本文關(guān)鍵詞：一種簡便、可靠的免疫組化雙重標記新方法

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【摘要】：目的探索一種簡便可靠、清晰的免疫組化雙重標記方法 ,可用普通光學(xué)顯微鏡觀察,并能長期保存染色結(jié)果。方法免疫組化雙標中,均使用辣根過氧化物酶(HRP)連接的二抗,底物分別選用二氨基聯(lián)苯胺(3,3'-diaminobenzidine,DAB)和鎳增強DAB。第一標DAB染色完成后切片煮沸4~5 min以滅活HRP,完全阻斷交叉反應(yīng),然后進行第二標鎳增強DAB染色。結(jié)果 1切片煮沸5 min,可完全滅活殘余的HRP酶活性,防止染色反應(yīng)交叉;5%的H2O2滅活HRP酶不完全,易產(chǎn)生交叉反應(yīng);短暫高溫滅活HRP不損壞之前的特異性DAB染色或造成組織損傷。2第一標DAB的棕黃色與第二標鎳增強DAB的紫藍色反差大、背景低;顛倒底物使用次序?qū)p害雙標質(zhì)量。此外,雙標切片可采用傳統(tǒng)的中性樹膠封片,染色結(jié)果能恒久保存。結(jié)論采用同一種酶標記系統(tǒng)建立了簡便、可靠的免疫組化雙標新方法。該方法標記結(jié)果清晰、操作簡便、試劑易得,有較大應(yīng)用價值。
【作者單位】： 鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院神經(jīng)退行性疾病與修復(fù)實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 免疫組化 辣根過氧化物酶 二氨基聯(lián)苯胺 鎳 方法 雙重標記 交叉反應(yīng)
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(30470594,30772282)
【分類號】：R392
【正文快照】： 在基礎(chǔ)和臨床病理形態(tài)學(xué)研究中,免疫組織化學(xué)染色是一種很常用的技術(shù)。在同一張組織切片上免疫組織化學(xué)雙重標記(免疫組化雙標)可以了解兩種抗原分子之間不同的組織細胞分布,以分析兩者相互關(guān)系[1];其結(jié)果對比直觀,信息量遠比傳統(tǒng)單染高,并可克服由于切片間各種差異而引起的時

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉俊,龍漢安,肖秀麗,趙東暉,唐學(xué)清;一種組織原位雙重標記的方法[J];川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年03期

2 林吉進,李玉光,霍霞,陳宋明,王東明;雙重標記連接蛋白43激光共聚焦顯微鏡檢測方法的研究[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2001年03期

3 倪燦榮，，戴益民;原位雜交與免疫組化結(jié)合的雙重標記方法的研究[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1996年04期

4 鄭翠紅;黃光英;張明敏;;熒光雙重標記Cx43在大鼠“足三里”表達的實驗研究[J];針刺研究;2005年04期

5 王心蕊;周洪瀾;王建偉;孟召祥;王醫(yī)術(shù);;激光共聚焦顯微鏡觀察免疫熒光雙重標記的前列腺癌內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶及其作用底物的表達[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年06期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

本文編號：842394