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水通道蛋白3和8在消化系統(tǒng)的表達及其在炎癥性腸病動物模型中的改變

發(fā)布時間:2017-09-12 22:50

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【摘要】:第一部分目的:研究水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)3和8在正常消化系統(tǒng)的表達及分布情況并探討其在消化系統(tǒng)中的功能。方法:9只正常SPF級SD大鼠處死,取食管、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸和肝組織,通過RT-PCR、western blot和免疫組織化學(xué)檢測AQP3和AQP8的表達和分布情況。結(jié)果及結(jié)論:AQP3表達于復(fù)層鱗狀上皮(食管和前胃)和單層柱狀上皮細胞(腺胃、回腸、近端結(jié)腸和遠端結(jié)腸)的基底側(cè)膜上,而AQP8則表達于空腸、回腸和近端結(jié)腸的柱狀上皮細胞的亞頂端膜區(qū)域,以及肝細胞的頂端膜上和亞頂端膜區(qū)域。第一部分目的:研究水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)3和8在正常消化系統(tǒng)的表達及分布情況并探討其在消化系統(tǒng)中的功能。方法:9只正常SPF級SD大鼠處死,取食管、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸和肝組織,通過RT-PCR、western blot和免疫組織化學(xué)檢測AQP3和AQP8的表達和分布情況。結(jié)果及結(jié)論:AQP3表達于復(fù)層鱗狀上皮(食管和前胃)和單層柱狀上皮細胞(腺胃、回腸、近端結(jié)腸和遠端結(jié)腸)的基底側(cè)膜上,而AQP8則表達于空腸、回腸和近端結(jié)腸的柱狀上皮細胞的亞頂端膜區(qū)域,以及肝細胞的頂端膜上和亞頂端膜區(qū)域。第二部分目的:研究2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)誘導(dǎo)的大鼠炎癥性腸病模型中AQP3和AQP8表達及分布的改變并探討其在炎癥性腸病中的可能作用。方法:30只SPF級雌性Sprague-Dawley大鼠隨機分為三組:模型組(n=18),酒精對照組(n=6),正常對照組(n=6)。實驗第一天,模型組大鼠給予100mg/kgTNBS+50%乙醇灌腸,酒精對照組給予等體積的50%乙醇,正常對照組不給任何處理。實驗第七天處死所有大鼠并取回腸、近端結(jié)腸和遠端結(jié)腸組織,通過RT-PCR、western blot和免疫組織化學(xué)檢測AQP3和AQP8的表達及分布的改變情況。結(jié)果:與酒精對照組和正常對照組相比,TNBS+50%乙醇灌腸組大鼠存在著明顯的腸道炎癥和損傷,同時AQP3和AQP8的nRNA和蛋白表達水平均降低,但其組織細胞定位并沒有發(fā)生改變。結(jié)論:AQP3和AQP8在TNBS誘導(dǎo)的炎癥性腸病中表達下調(diào),因此其可能在炎癥性腸病的發(fā)病中起一定的作用。第一部分目的:研究水通道蛋白(Aquaporins, AQPs)3和8在正常消化系統(tǒng)的表達及分布情況并探討其在消化系統(tǒng)中的功能。方法:9只正常SPF級SD大鼠處死,取食管、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸和肝組織,通過RT-PCR、western blot和免疫組織化學(xué)檢測AQP3和AQP8的表達和分布情況。結(jié)果及結(jié)論:AQP3表達于復(fù)層鱗狀上皮(食管和前胃)和單層柱狀上皮細胞(腺胃、回腸、近端結(jié)腸和遠端結(jié)腸)的基底側(cè)膜上,而AQP8則表達于空腸、回腸和近端結(jié)腸的柱狀上皮細胞的亞頂端膜區(qū)域,以及肝細胞的頂端膜上和亞頂端膜區(qū)域。第二部分目的:研究2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)誘導(dǎo)的大鼠炎癥性腸病模型中AQP3和AQP8表達及分布的改變并探討其在炎癥性腸病中的可能作用。方法:30只SPF級雌性Sprague-Dawley大鼠隨機分為三組:模型組(n=18),酒精對照組(n=6),正常對照組(n=6)。實驗第一天,模型組大鼠給予100mg/kgTNBS+50%乙醇灌腸,酒精對照組給予等體積的50%乙醇,正常對照組不給任何處理。實驗第七天處死所有大鼠并取回腸、近端結(jié)腸和遠端結(jié)腸組織,通過RT-PCR、western blot和免疫組織化學(xué)檢測AQP3和AQP8的表達及分布的改變情況。結(jié)果:與酒精對照組和正常對照組相比,TNBS+50%乙醇灌腸組大鼠存在著明顯的腸道炎癥和損傷,同時AQP3和AQP8的nRNA和蛋白表達水平均降低,但其組織細胞定位并沒有發(fā)生改變。結(jié)論:AQP3和AQP8在TNBS誘導(dǎo)的炎癥性腸病中表達下調(diào),因此其可能在炎癥性腸病的發(fā)病中起一定的作用。第三部分目的:研究5-氨基水楊酸治療TNBS誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎后AQP3和AQP8的表達改變并探討其可能的機制。方法:60只SPF級雌性Sprague-Dawley大鼠隨機分為五組,分別為酒精對照組、造模對照組、5-ASA 50mg/kg組、5-ASA 100mg/kg組5-ASA 150mg/kg組,每組12只。實驗第1天,造模對照組、5-ASA 50mg/kg組、5-ASA 100mg/kg組和5-ASA150mg/kg組給予含2.5mg/ml TNBS的50%乙醇溶液100mg/kg體重灌腸,酒精對照組給予等體積的50%乙醇灌腸;實驗第5天5-ASA 50mg/kg組、5-ASA 100mg/kg組(?)5-ASA 150mg/kg組分別給予5-ASA 50mg/kg、100mg/kg.150mg/kg口服,酒精對照組和造模對照組正常飲食;實驗第14天處死所有大鼠,取近端結(jié)腸組織,通過RT-PCR和western blot檢測AQP3和AQP8的表達改變情況。結(jié)果:與造模對照組相比,5-ASA 50mg/kg組、5-ASA 100mg/kg組和5-ASA150mg/kg組的CMDI、HPS和DAI評分均較低,伴隨著結(jié)腸TNF-α表達下調(diào),AQP3和AQP8的mRNA和蛋白表達水平明顯上調(diào)。結(jié)論:TNBS誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸炎經(jīng)過5-ASA治療后,腸道炎癥緩解,伴隨AQP3和AQP8的mRNA和蛋白表達水平恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】:AQP3 AQP8 大鼠 消化系統(tǒng) AQP3 AQP8 大鼠 炎癥性腸病 AQP3 AQP8 5-ASA 炎癥性腸病
【學(xué)位授予單位】:復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R574;R-332
【目錄】:
  • 縮略詞表4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 前言9-11
  • 第一部分11-25
  • —、材料11-13
  • 二、方法13-18
  • 三、結(jié)果18-23
  • 四、討論23-25
  • 第二部分25-38
  • 一、材料25
  • 二、方法25-28
  • 三、結(jié)果28-35
  • 四、討論35-38
  • 第三部分38-46
  • 一、材料38
  • 二、方法38
  • 三、結(jié)果38-43
  • 四、討論43-46
  • 全文總結(jié)46-47
  • 參考文獻47-52
  • 綜述52-62
  • 參考文獻56-62
  • 附錄一62-63
  • 附錄二63-64
  • 致謝64-65

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Alexandra Zahn;Christoph Moehle;Thomas Langmann;Robert Ehehalt;Frank Autschbach;Wolfgang Stremmel;Gerd Schmitz;;Aquaporin-8 expression is reduced in ileum and induced in colon of patients with ulcerative colitis[J];World Journal of Gastroenterology;2007年11期

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本文編號:840004

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