本文關(guān)鍵詞：凡納濱對蝦過敏原蛋白Lit v 1.2的原核表達與純化

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【摘要】：目的:誘導(dǎo)表達凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)過敏原蛋白Lit v 1.2,并利用6-His標(biāo)簽獲得純化蛋白。方法:用NdeⅠ和PstⅠ雙酶切實驗室前期構(gòu)建保存的p GEM-T-Lit v 1.2質(zhì)粒,將目的基因與表達載體p ET44a連接,轉(zhuǎn)入表達菌株Rosetta,通過氨芐青霉素(Amp)抗性基因篩選,異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達,獲得Lit v 1.2蛋白。通過親和層析純化蛋白,SDS-PAGE凝膠電泳檢測純化效果。結(jié)果:成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒p ET44a-Lit v 1.2,SDS-PAGE結(jié)果顯示Lit v1.2基因在大腸桿菌Rosetta中獲得高效的可溶性表達,蛋白質(zhì)分子量與理論值相符,且獲得的目標(biāo)蛋白純度高。結(jié)論:本研究通過原核表達及親和層析獲得高產(chǎn)量、高純度的凡納濱對蝦過敏原蛋白Lit v 1.2,為進一步研究Lit v 1.2的免疫學(xué)特性奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院廣東省過敏反應(yīng)與免疫重點實驗室/呼吸疾病國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 凡納濱對蝦 過敏原 原肌球蛋白 重組表達 蛋白純化
【基金】：國家重大科技專項(2014ZX08011-005B) 廣東高�？萍紕�(chuàng)新項目(2013KJCX148) 廣州市科技攻關(guān)(201300000159)項目的資助
【分類號】：R392
【正文快照】： 1本文受國家重大科技專項(2014ZX08011-005B)、廣東高校科技創(chuàng)新項目(2013KJCX148)和廣州市科技攻關(guān)(201300000159)項目的資助。近年來,我國食物過敏發(fā)病率呈逐年上升的趨勢,食物過敏成為食品工業(yè)重要的安全問題,已經(jīng)備受關(guān)注。在常見過敏食物中,蝦蟹等甲殼類海產(chǎn)品是主要的致

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 毛露甜;范紅英;張在軍;黃婉慧;楊華勝;周立斌;;蝦類和蟹類的過敏原組分分析[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2008年06期

2 彭艷;張小鵬;;組胺H_1受體拮抗藥的藥理作用研究進展[J];中國藥房;2010年21期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 刁依心;;慢性蕁麻疹患者過敏原皮膚點刺法檢測結(jié)果分析[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)刊;2013年12期

2 陳偉;吳興達;劉群英;鄔敏辰;黃海波;劉平靜;;中華絨螯蟹主要變應(yīng)原的純化與應(yīng)用分析[J];中國海洋藥物;2010年03期

3 吳興達;陳偉;黃海波;劉平靜;劉群英;;中華絨螯蟹組織蛋白中變應(yīng)原組分的分析與提取[J];中國生物制品學(xué)雜志;2009年11期

4 范靜婧;朱瑋瑋;王婧薷;陳云玉;章佩芬;王立偉;陳麗新;;益母草對家兔離體小腸平滑肌的作用及其作用機制研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2012年04期

5 黃建芳;林婷婷;向軍儉;楊紅宇;;河蝦主要過敏組分的分離、純化、鑒定及其致敏性分析[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年05期

6 任曉霞;張昕;蔡桂紅;李玉英;王轉(zhuǎn)花;;苦蕎過敏原TBa表位區(qū)段的表達及免疫活性分析[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年06期

7 毛露甜;陳麗婉;范紅英;劉新華;;診斷用過敏原膜芯片的制備及其應(yīng)用研究[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年06期

8 黃琳;;2006—2010年廣西壯族自治區(qū)皮膚病醫(yī)院抗組胺藥應(yīng)用分析[J];中國醫(yī)院用藥評價與分析;2011年06期

9 王彩霞;黃建芳;向軍儉;孫一帆;呂思;郭潔;;凡納濱對蝦次要過敏原肌質(zhì)鈣結(jié)合蛋白的質(zhì)譜鑒定及免疫交叉反應(yīng)[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年08期

10 陸宏霞;;H_1受體阻斷劑的臨床應(yīng)用與分析[J];中國當(dāng)代醫(yī)藥;2012年35期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳麗莎;蝦過敏原提取物量效關(guān)系的表征[D];中國海洋大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 吳興達;中華絨螯蟹主要致敏原的分離純化與免疫學(xué)鑒定[D];江南大學(xué);2009年

2 黃建芳;河蝦主要過敏原單克隆抗體的制備及河蝦過敏原不同組分共同表位分析[D];暨南大學(xué);2010年

3 沈海旺;章魚過敏原的研究[D];集美大學(xué);2012年

4 陳瑜;多酚化合物對蝦類過敏原免疫活性的影響及抗過敏活性的研究[D];中國海洋大學(xué);2012年

5 陳立;枸櫞酸苯海拉明口腔崩解片制備及其評價[D];西南大學(xué);2013年

6 任杰;中華對蝦主要致敏原鑒定、提取及有效致敏組分在sIgE檢測中的初步應(yīng)用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 潘虎;郝飛;;4種抗組胺藥對體外培養(yǎng)鼻息肉組織炎癥因子表達影響的比較[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2006年24期

2 侯一峰;周艷春;鄭曉璇;王海燕;傅意玲;方澤曼;何韶衡;;組胺對肺上皮細胞Toll樣受體表達的上調(diào)作用[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2006年20期

3 燕志強;章如新;余少卿;溫武;吳革平;;組胺HR1拮抗劑對變應(yīng)性鼻炎IL-12及DCs的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年19期

4 趙建軍;劉勇;陳新林;劉建新;田英芳;張蓬勃;康前雁;邱芬;楊蓬勃;;組胺對大鼠腦皮質(zhì)內(nèi)血管的作用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年09期

5 伍秋容;廣州地區(qū)不同年齡組過敏性疾病患者的致敏原分布特性分析[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2005年02期

6 梁桂珍,李放娟,侯穗波,單衍梅,羅媚旦;1625例變態(tài)反應(yīng)性疾病過敏原檢測結(jié)果分析[J];實用臨床醫(yī)學(xué);2005年07期

7 張紅云;宋娟娟;劉志剛;康敏雄;;荔枝果實中profilin的表達純化及其與樺樹花粉Bet v 2的交叉反應(yīng)性研究[J];免疫學(xué)雜志;2007年05期

8 李振興;林洪;李明華;曹立民;;不同蝦類的過敏原及其過敏原性[J];水產(chǎn)學(xué)報;2006年02期

9 齊瑩;千智斌;吳中海;;組胺H_1和H_2受體在新生大鼠離體延髓腦片呼吸節(jié)律性放電調(diào)節(jié)中的作用[J];生理學(xué)報;2008年03期

10 陶夢非;任濤;田德增;梁永杰;;抗組胺藥物對運動性哮喘豚鼠模型的作用[J];同濟大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年01期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 王海艷;袁飛;吳亞君;楊海榮;李剛;陳穎;;芹菜過敏原蛋白Api g1.02的克隆、表達及單抗制備[J];中國食品學(xué)報;2012年05期

2 ;2009年檢測新品推介:BIOAVID~汶檢測卡、RIDASCREEN~汶試劑盒、EASI-EXTRACT~汶免疫親和柱[J];食品安全導(dǎo)刊;2009年09期

3 ;[J];;年期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 胡玉靜;湖南烙鐵頭蛇毒主要過敏原蛋白的鑒定[D];南京醫(yī)科大學(xué);2012年

2 裴君;花生過敏原酶聯(lián)免疫分析方法的建立[D];天津科技大學(xué);2014年

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本文編號：839781