骨形態(tài)發(fā)生蛋白7腺病毒基因轉(zhuǎn)染對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)功能的影響
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【摘要】:背景:基因轉(zhuǎn)染技術(shù)正積極地應(yīng)用于組織再生治療之中,研究表明骨形態(tài)發(fā)生蛋白7具有骨誘導(dǎo)特性,可以有效促進(jìn)成骨細(xì)胞的發(fā)育以及新骨的形成。目的:探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白7腺病毒基因轉(zhuǎn)染對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。方法:分離、培養(yǎng)羊骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,利用重組骨形態(tài)發(fā)生蛋白7腺病毒(adenovirus bone morphogenetic protein 7,Adeno-BMP7)對第2代骨髓基質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染,透射電鏡觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞周期,Western blot檢測骨形態(tài)發(fā)生蛋白7的表達(dá),Von Kossa染色觀察鈣結(jié)節(jié)形態(tài)情況。取轉(zhuǎn)染后第3天及相應(yīng)未轉(zhuǎn)染的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞制備珊瑚-細(xì)胞復(fù)合物,于裸鼠脊柱兩側(cè)背部皮下注射4周和8周后進(jìn)行大體觀察和組織學(xué)檢測。結(jié)果與結(jié)論:體外細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察可見Adeno-BMP7基因轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細(xì)胞存在活躍的物質(zhì)合成代謝;流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染不會對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞周期產(chǎn)生明顯影響;Western blot檢測轉(zhuǎn)染后的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞存在骨形態(tài)發(fā)生蛋白7蛋白的表達(dá);Von Kossa染色可見轉(zhuǎn)染Adeno-BMP7后的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞形成較大的鈣結(jié)節(jié)。經(jīng)裸鼠皮下回植實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),Adeno-BMP7轉(zhuǎn)染后骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的成骨能力和成骨質(zhì)量明顯提高。以上結(jié)果表明經(jīng)Adeno-BMP7轉(zhuǎn)染可以有效促進(jìn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞成骨分化。
【作者單位】: 武警廣東省總隊(duì)醫(yī)院番禺分院;
【關(guān)鍵詞】: 骨髓 間質(zhì)干細(xì)胞 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 基因 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 骨形態(tài)發(fā)生蛋白腺病毒基因 轉(zhuǎn)染 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞 生物學(xué)功能 細(xì)胞周期 鈣結(jié)節(jié) 成骨分化 超微結(jié)構(gòu)
【基金】:2012年廣東省醫(yī)學(xué)科研基金項(xiàng)目(A2012456)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 文章亮點(diǎn):1骨形態(tài)發(fā)生蛋白是一種誘導(dǎo)成骨細(xì)胞分化的生長因子,骨形態(tài)發(fā)生蛋白7與骨形態(tài)發(fā)生蛋白家族中的其他成員一樣,在間充質(zhì)干細(xì)胞向骨和軟骨的轉(zhuǎn)化中起了關(guān)鍵作用。隨著基因技術(shù)的發(fā)展,將骨形態(tài)發(fā)生蛋白7基因轉(zhuǎn)移到相關(guān)細(xì)胞之中,然后移植到需要進(jìn)行骨再生的局部位置,可以
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 畢經(jīng)鋒;王雪峰;;骨形態(tài)反應(yīng)蛋白-2對骨髓基質(zhì)干細(xì)胞與軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)向軟骨細(xì)胞分化的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2012年10期
2 劉澤漢;王立春;張宏穎;公偉勛;荊鵬偉;陳琳;何旭;;動物脂肪干細(xì)胞聯(lián)合雙重轉(zhuǎn)化生長因子釋放支架修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2012年12期
3 劉云龍;李奇;林荔軍;林昭偉;帥明;;BMP-2及VEGF雙基因骨髓干細(xì)胞復(fù)合磷酸鈣支架生物相容性的體外實(shí)驗(yàn)研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年18期
4 陳佳濱;李強(qiáng);茹嘉;武成聰;寧寅寬;蔡偉良;;BMP-2和EGFP重組腺病毒體外轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年02期
5 符培亮;叢銳軍;張雷;丁U喨,
本文編號:838648
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