本文關(guān)鍵詞：兔肝臟應(yīng)用解剖學(xué)研究及兔小肝綜合征模型的建立

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【摘要】：背景 肝移植或肝葉切除術(shù)有關(guān)的基本問(wèn)題之一是供肝/余肝的體積能否滿足機(jī)體生理功能的需求,當(dāng)供肝或余肝體積過(guò)小,其生理功能不能滿足機(jī)體的需求,則可能表現(xiàn)為小肝綜合征(small-for-size syndrome, SFSS)。SFSS是肝切除或活體肝移植可能發(fā)生的嚴(yán)重并發(fā)癥之一,表現(xiàn)為術(shù)后凝血障礙、肝性腦病、頑固性腹水和持續(xù)性黃疸,甚至伴有呼吸功能衰竭和腎功能衰竭,患者死亡。SFSS的發(fā)生機(jī)理可能與多種因素有關(guān),如移植物的大小、門靜脈過(guò)度灌注、潛在病變、肝再生能力、流入道和流出道情況,受者病情輕重等；然而,SFSS的發(fā)病機(jī)理至今尚未完全闡明,防治措施也在積極探索中。 近年來(lái),文獻(xiàn)報(bào)道了多種SFSS實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,并利用這些模型來(lái)研究SFSS的發(fā)病機(jī)制和防治措施。以大鼠、犬、豬等動(dòng)物制作的SFSS模型,各具優(yōu)缺點(diǎn),如大鼠體積小,手術(shù)精細(xì),不易實(shí)施血管分流術(shù)調(diào)節(jié)門靜脈灌注壓力；而犬、豬等動(dòng)物價(jià)格昂貴、手術(shù)條件要求高,且不宜進(jìn)行大樣本量研究。我們擬實(shí)施“門靜脈壓力調(diào)控預(yù)防SFSS的實(shí)驗(yàn)研究”[云南省科技廳-昆明醫(yī)學(xué)院聯(lián)合專項(xiàng)基金(2008CD008)],探究門靜脈灌注壓力在SFSS發(fā)生過(guò)程中的作用。該課題需要建立符合SFSS典型表現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,還需要利用該模型實(shí)施門腔分流以調(diào)節(jié)門靜脈灌注壓力。通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn),大鼠、犬、豬等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均不能較好的滿足本課題研究的需要。因此,我們探索以兔作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,建立SFSS動(dòng)物模型。 文獻(xiàn)關(guān)于鼠、豬、犬等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肝臟解剖學(xué)研究較為詳細(xì),而有關(guān)兔肝臟解剖學(xué)研究很少并且描述混亂。因此,本課題首先對(duì)兔肝臟及其附屬管道進(jìn)行應(yīng)用解剖學(xué)研究,在此基礎(chǔ)上建立符合需要的SFSS模型并用于后續(xù)研究。 目的 1.對(duì)兔肝臟分葉及附屬管道進(jìn)行描述性解剖學(xué)研究,結(jié)合文獻(xiàn)復(fù)習(xí),對(duì)其分葉和附屬管道進(jìn)行規(guī)范化命名。 2.建立兔SFSS動(dòng)物模型,并用于后續(xù)研究。 方法 1.兔肝臟及其附屬管道應(yīng)用解剖學(xué)研究：選擇由昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物科提供的健康日本大耳兔20只,體重范圍1.5kg～2.5kg。經(jīng)耳緣靜脈按照1ml/kg注射3%戊巴比妥鈉麻醉。固定其四肢,腹部退毛。(1)肝臟在體與離體解剖學(xué)觀察：取正中切口進(jìn)入腹腔,離斷肝周韌帶,充分暴露肝臟對(duì)其進(jìn)行在體解剖學(xué)觀察。處死動(dòng)物后,經(jīng)門靜脈灌注生理鹽水沖洗血管。完整取下肝臟對(duì)其進(jìn)行離體解剖學(xué)觀察。(2)全肝及各肝葉稱重,并計(jì)算各肝葉占全肝臟及兔體重百分比。(3)制作門靜脈和肝靜脈管道灌注標(biāo)本。經(jīng)腸系膜上靜脈插管結(jié)扎其尾側(cè)端,注入管道鑄型劑(造牙粉和自凝牙托水10g：10ml混合)制作門靜脈管道鑄型標(biāo)本。結(jié)扎肝后腔靜脈頭側(cè)、尾側(cè)端,同上注射管道鑄型劑制作肝靜脈管道鑄型標(biāo)本。待管道鑄型標(biāo)本硬固后,取出肝臟。將其放置于20%氫氧化鈉溶液中浸泡腐蝕顯露管道標(biāo)本。Microsoft office2007Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行描述性分析,計(jì)量數(shù)據(jù)結(jié)果以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)”表示。 2.兔SFSS模型的建立。將42只兔隨機(jī)分為5組,分別為假手術(shù)組(n=2),A組(n=10)為切除“左中葉+右中葉”組,B組(n=10)為切除“左外葉+左中葉+右中葉”組,C組(n=10)為切除“尾狀葉+左中葉+右中葉+右外葉”組,D組(n=10)為切除“左外葉+左中葉+右中葉+右外葉”組。經(jīng)耳緣靜脈按照1ml/kg注射3%戊巴比妥鈉麻醉。固定四肢,腹部退毛,碘伏消毒,鋪無(wú)菌單。取腹部正中切口進(jìn)入腹腔。應(yīng)用無(wú)血切肝技術(shù),分別對(duì)A組、B組、C組及D組實(shí)施肝葉切除術(shù)。觀察術(shù)后活動(dòng)及進(jìn)食情況。術(shù)前和術(shù)后存活兔分別于第1、3、5、7天麻醉后經(jīng)耳緣靜脈采血留取標(biāo)本檢測(cè)ALT、Tbil、PT,然后開腹獲取肝組織標(biāo)本行組織病理學(xué)檢查。術(shù)后死亡兔行肝臟剖檢。Microsoft office2007Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行描述性分析,計(jì)量數(shù)據(jù)結(jié)果以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)”表示。 結(jié)果 1.兔肝肝裂明顯,依據(jù)肝葉形態(tài)、肝裂走形和門靜脈主干分支形式將兔肝臟分為五葉：尾狀葉、左外葉、左中葉、右中葉和右外葉。全肝質(zhì)量為(60.13±16.11)g,占其質(zhì)量百分比為(2.88±0.06)%,各肝葉質(zhì)量分別為(3.93±1.13)g、(15.93±3.50)g、(14.83±3.31)g、(15.08±4.34)g、(12.08±3.55)g；占全肝質(zhì)量百分比分別為(6.22±1.02)%、(25.44±2.55)%、(23.72±2.71)%、(24.15±5.21)%、(19.32±4.23)%。左中葉和右中葉根部肝組織融合,其余各肝葉相對(duì)獨(dú)立,尾狀葉包括相對(duì)獨(dú)立的乳頭突和尾狀突兩部分。各肝葉有相對(duì)獨(dú)立的Glisson系統(tǒng)且肝靜脈走行于肝蒂內(nèi)。 2.根據(jù)上述測(cè)得的肝葉質(zhì)量及不同肝葉組合占全肝質(zhì)量百分比數(shù)據(jù),A、B、C、D四組保留肝葉占全肝質(zhì)量百分比分別約為50%、30%、25%、6%肝葉,術(shù)后一周存活率分別為100%、50%、20%和0%。術(shù)后第1天,B組和C組ALT、Tbi1、PT值開始升高,至術(shù)后第3天達(dá)到高峰；術(shù)后第5天開始下降,至術(shù)后第7天達(dá)到相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài),而對(duì)照組和A組術(shù)前、術(shù)后ALT、Tbi1、PT值變化均不大。術(shù)后死亡兔進(jìn)行剖檢可見余肝不同程度的淤血腫脹、淤膽和胃腸道淤血,腹水渾濁。術(shù)后存活兔剖檢,肝臟紅潤(rùn),質(zhì)地軟；A組、B組和D組可見不同程度肝臟增大,其中B組和C組肝臟增生明顯。術(shù)前獲取的對(duì)照組肝組織標(biāo)本HE染色顯示：中央靜脈清晰,肝細(xì)胞胞質(zhì)及胞核清晰,無(wú)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。A組術(shù)后第1天和第3天獲取的肝組織標(biāo)本HE染色顯示：中央靜脈中度淤血,間質(zhì)水腫、肝細(xì)胞漿疏松、空泡化及點(diǎn)狀壞死和少量灶性壞死,中央靜脈和肝竇擴(kuò)張,匯管區(qū)有較多炎細(xì)胞浸潤(rùn),少量肝細(xì)胞核有絲分裂象及二倍體細(xì)胞；術(shù)后第5天和術(shù)后第7天可見肝細(xì)胞明顯增生,有較多的二倍體和多倍體細(xì)胞。B組和C組術(shù)后第1天獲取的肝臟標(biāo)本HE染色顯示：中央靜脈中度到重度淤血,間質(zhì)水腫,術(shù)后第3天肝竇內(nèi)血栓形成明顯,大片灶狀肝細(xì)胞壞死,肝細(xì)胞有絲分裂象明顯及少量多倍體及二倍體細(xì)胞；術(shù)后第5天肝細(xì)胞仍不同程度腫脹、間質(zhì)水腫及炎細(xì)胞浸潤(rùn),但較前減輕；術(shù)后第7天,二倍體細(xì)胞明顯增多,少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。 結(jié)論 1.兔肝臟解剖學(xué)既與犬、鼠、豬等哺乳類動(dòng)物類似,又具有其自身的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)兔肝臟在體、離體解剖學(xué)和肝臟管道灌注標(biāo)本的觀察,規(guī)范了文獻(xiàn)中對(duì)兔肝解剖學(xué)的混亂描述。在此基礎(chǔ)上,測(cè)量全肝及各肝葉質(zhì)量,并計(jì)算各肝葉占全肝質(zhì)量百分比,為在該方面的基礎(chǔ)研究提供數(shù)據(jù)支持。 2.根據(jù)兔解剖學(xué)特點(diǎn)行不同質(zhì)量百分比肝葉切除術(shù)來(lái)制作SFSS模型。當(dāng)保留肝臟占全肝質(zhì)量百分比約25%～30%時(shí)表現(xiàn)為SFSS,保留30%肝臟體積時(shí),術(shù)后存活率較保留25%肝臟體積高,因此保留30%肝臟體積時(shí)制作的SFSS模型更為穩(wěn)定,可作為研究SFSS發(fā)病機(jī)制及防治措施較為理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。 3.本實(shí)驗(yàn)建立的兔SFSS模型可用作基金項(xiàng)目“門靜脈壓力調(diào)控預(yù)防SFSS實(shí)驗(yàn)研究”的后續(xù)研究。
【關(guān)鍵詞】：兔 肝臟 應(yīng)用解剖 SFSS 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R-332;R657.3
【目錄】：

• 縮略詞表6-7
• 中文摘要7-11
• Abstract11-16
• 第一部分 兔肝臟及其附屬管道應(yīng)用解剖學(xué)研究16-22
• 引言16
• 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 實(shí)驗(yàn)方法17-18
• 結(jié)果18-19
• 討論19-22
• 第二部分 兔肝小肝綜合征模型的建立22-33
• 引言22-23
• 實(shí)驗(yàn)材料23
• 實(shí)驗(yàn)方法23-27
• 結(jié)果27-30
• 討論30-33
• 全文結(jié)論33-34
• 附圖34-42
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 綜述44-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表的文章52-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：821163