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體外定向誘導(dǎo)成年大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向許旺細(xì)胞樣細(xì)胞分化的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-08 08:50

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【摘要】:目的探討體外定向誘導(dǎo)成年大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)向許旺細(xì)胞樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化的有效方法。方法分別進(jìn)行成年大鼠許旺細(xì)胞原代培養(yǎng)和BMSC分離培養(yǎng)。根據(jù)誘導(dǎo)方法不同,分為化學(xué)誘導(dǎo)組和共培養(yǎng)誘導(dǎo)組。采用顯微鏡觀察許旺細(xì)胞和BMSC的生長情況,分別采用免疫熒光化學(xué)染色法[檢測神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)抗體和S-100抗體等許旺細(xì)胞標(biāo)志蛋白]和流式細(xì)胞術(shù)鑒定兩種細(xì)胞;顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀察兩組細(xì)胞的形態(tài)和生長情況;共培養(yǎng)誘導(dǎo)組共培養(yǎng)3 d后,化學(xué)誘導(dǎo)組誘導(dǎo)作用4 h、1 d后分別采用免疫熒光化學(xué)染色的方法評(píng)估兩組細(xì)胞的誘導(dǎo)分化情況。結(jié)果化學(xué)誘導(dǎo)組誘導(dǎo)后的細(xì)胞發(fā)生了明顯的許旺細(xì)胞樣細(xì)胞形態(tài)改變,預(yù)誘導(dǎo)4 h后即出現(xiàn)GFAP抗體表達(dá)陽性,維持誘導(dǎo)1 d后,GFAP抗體陽性表達(dá)率為(80.9±3.5)%,S-100抗體陽性表達(dá)率為(59.0±1.1)%。誘導(dǎo)2 d后分化細(xì)胞開始出現(xiàn)脫落死亡,3 d后大部分分化細(xì)胞脫落死亡。共培養(yǎng)誘導(dǎo)組共培養(yǎng)3 d后,被誘導(dǎo)的BMSC未出現(xiàn)類似化學(xué)誘導(dǎo)組明顯的細(xì)胞形態(tài)改變,GFAP抗體陽性表達(dá)率為(89.8±2.4)%,S-100抗體陽性表達(dá)率為(80.9±1.7)%。共培養(yǎng)誘導(dǎo)組S-100、GFAP抗體陽性表達(dá)率均高于化學(xué)誘導(dǎo)組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.01)。結(jié)論共培養(yǎng)誘導(dǎo)法不僅對(duì)BMSC向許旺細(xì)胞樣細(xì)胞定向分化具有明確的效果,而且對(duì)BMSC的存活和增殖均有促進(jìn)作用,因此該法相對(duì)于化學(xué)誘導(dǎo)法更加安全和有效。
【作者單位】: 廣東醫(yī)學(xué)院解剖教研室;
【關(guān)鍵詞】骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 許旺細(xì)胞 共培養(yǎng) 誘導(dǎo) 分化
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81401022) 湛江市科技公關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(2012C3102012) 廣東醫(yī)學(xué)院科研基金項(xiàng)目青年基金(Q2009006)
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)一直是困擾臨床工作者的難題。對(duì)于超過l cm的神經(jīng)缺損,傳統(tǒng)的自體神經(jīng)移植方法療效最佳,但因供體來源的限制而制約了其應(yīng)用。隨著組織工程研究的發(fā)展,尤其是由支架材料和細(xì)胞外基質(zhì)、種子細(xì)胞以及誘導(dǎo)和促進(jìn)生長的因子等幾個(gè)部分組成的“組織工程化人工神

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 Xiao-Yong Liu;Jian Chen;Qing Zhou;Jing Wu;Xiao-Ling Zhang;Li Wang;Xiao-Yan Qin;;In vitro tissue engineering of lamellar cornea using human amniotic epithelial cells and rabbit cornea stroma[J];International Journal of Ophthalmology(English Edition);2013年04期

2 柴樹宏;鮑艷春;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為胰島素分泌細(xì)胞的能力比較[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

3 尹東亮;孫,

本文編號(hào):813070


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