本文關(guān)鍵詞：大鼠外周血間充質(zhì)干細胞的富集及生物學特性研究

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【摘要】：目的:探究大鼠外周血間充質(zhì)干細胞(PBMSC)的有效富集方法,并進一步研究其生物學特性。方法:采集經(jīng)G-CSF動員的4周齡SD大鼠外周血,用密度梯度離心法分離出單個核細胞,繼而采用貼壁培養(yǎng)法獲得成纖維樣集落生長細胞,繪制細胞生長曲線;應用流式細胞術(shù)(CD90、CD44、CD29、CD45、CD11b和CD79a)和免疫細胞化學染色法(CD73、CD105、CD34和HLA-DR)分析富集的第2代PBMSC的表型特征,并對其進行成骨、成軟骨和成脂肪細胞誘導分化能力鑒定。結(jié)果:1原代培養(yǎng)6-7 d可見明顯的成纖維樣細胞集落生長,至培養(yǎng)21 d細胞生長匯合度可達80%;傳代細胞貼壁能力強,形態(tài)均一,呈梭形漩渦狀生長;傳代培養(yǎng)的PBMSC于培養(yǎng)次日即可進入對數(shù)生長期,細胞倍增時間為39.2 h。2富集的PBMSC高表達CD90、CD44、CD29、CD73及CD105,不表達CD45、CD11b、CD79a、CD34和HLA-DR。3PBMSC分別經(jīng)成骨、成軟骨和成脂細胞誘導分化培養(yǎng)21 d后,再分別經(jīng)茜素紅染色顯示有大量鈣化結(jié)節(jié)形成,阿利新藍染色的胞漿內(nèi)有大量糖胺聚糖形成,油紅O染色細胞內(nèi)有大量脂滴形成。結(jié)論:采用本研究方法可從大鼠外周血中分離富集到高純度、高豐度的PBMSC,且其具備MSC的生長特點和表型特征,并具有中胚層多系分化能力。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學院暨附屬醫(yī)院貴州省細胞工程重點實驗室;遵義醫(yī)學院暨附屬醫(yī)院人體解剖學教研室;
【關(guān)鍵詞】： 外周血 間充質(zhì)干細胞 誘導分化 成骨細胞 成軟骨細胞 成脂細胞 大鼠
【基金】：貴州省科學技術(shù)基金資助項目(黔科合J字LKZ[2011]19號) 貴州省科技攻關(guān)資助項目(黔科合SY字[2012]3124號)
【分類號】：R329.28;Q253
【正文快照】： J Exp Hematol 2015;(2):506-511間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSC)是干細胞與組織工程研究中采用最為廣泛的種子細胞來源,尤其是骨髓來源的MSC(bone marrow-de-rived mesenchymal stem cells,BMMSC)[1-3]。研究證實,MSC廣泛分布于機體的許多組織中,如骨髓、脂肪組織

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本文編號：808343