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再程序化星形膠質(zhì)細胞的制備及體外定向分化為神經(jīng)元的研究

發(fā)布時間:2017-09-07 01:43

  本文關(guān)鍵詞:再程序化星形膠質(zhì)細胞的制備及體外定向分化為神經(jīng)元的研究


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【摘要】:目的探討再程序化星形膠質(zhì)細胞制備并在體外誘導(dǎo)其分化為神經(jīng)元。方法在體外培養(yǎng)大鼠腦皮質(zhì)來源星形膠質(zhì)細胞(astrocyte),隨后將提純、鑒定過的第三代星形膠質(zhì)細胞接種于12孔培養(yǎng)皿中,并分為A、B、C 3組。其中A組為帶有綠色熒光蛋白(GFP)的慢病毒載體介導(dǎo)neurogenin2(Ngn2)基因轉(zhuǎn)染的星形膠質(zhì)細胞,制備再程序化星形膠質(zhì)細胞;B組為帶有GFP基因的空載體病毒轉(zhuǎn)染的星形膠質(zhì)細胞;C組為未進行慢病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染的星形膠質(zhì)細胞;轉(zhuǎn)基因1周后加入含細胞生長因子誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化15 d,光鏡下觀察各組細胞形態(tài)變化以及定向神經(jīng)元分化的差異。結(jié)果 A組星形膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)基因后再誘導(dǎo)15 d,很大部分細胞形態(tài)呈神經(jīng)元樣改變,胞體呈梭形或橢圓形,有多個突起伸出且突起較長,表達神經(jīng)元核蛋白(Neu N)、神經(jīng)絲蛋白(NF)及神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)的比例大大提高,相比B組及C組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05);而B組與C組神經(jīng)元分化比例的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論慢病毒介導(dǎo)Ngn2基因體外轉(zhuǎn)染星形膠質(zhì)細胞可制備出再程序化星形膠質(zhì)細胞,誘導(dǎo)后具有更強的向神經(jīng)元定向分化能力。
【作者單位】: 江蘇大學(xué)附屬金壇醫(yī)院神經(jīng)外科;南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】neurogenin 星形膠質(zhì)細胞 神經(jīng)元分化 再程序化
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81171147) 江蘇省“興衛(wèi)工程”醫(yī)學(xué)重點人才基金RC201156 金壇市科技計劃項目(JT2014059)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 神經(jīng)系統(tǒng)損傷可導(dǎo)致機體功能不同程度的缺失,影響個體生活、自理能力。如何修復(fù)損傷的神經(jīng)系統(tǒng)一直困擾著廣大科學(xué)工作者,至今尚未找到行之有效的治療手段;通過干細胞誘導(dǎo)分化成神經(jīng)元來替代受損的神經(jīng)元將是一種比較可行的治療手段[1]。以前的種子細胞(如來源于胚胎、骨髓、

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