本文關(guān)鍵詞：低氧對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及增殖的影響

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【摘要】：目的探討低氧培養(yǎng)對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)、免疫表型、分化潛能以及對細(xì)胞增殖和凋亡等的影響,為其今后在干細(xì)胞移植和組織細(xì)胞工程研究提供理論支持。 方法經(jīng)父母授權(quán)同意后收取足月剖宮產(chǎn)新生兒臍帶,采用酶消化法分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,細(xì)胞貼壁法培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。分別將細(xì)胞置入20%O2、10%O2和3%O2培養(yǎng)條件下培養(yǎng),鑒定第7代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞特性。將人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞行成骨和成脂誘導(dǎo),通過茜素紅和油紅O染色檢測人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化和成脂分化潛能；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物(CD105、CD73、 CD90、CD29、CD44、HLA-ABC、CD106、CD45、CD34、HLA-DR),觀察細(xì)胞免疫表型的變化；細(xì)胞計數(shù)法繪制細(xì)胞生長曲線；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期；Annexin V/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果本實驗3%O2低氧培養(yǎng)的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有成脂、成骨多向分化的潛能；人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞CD105、CD73、CD90、CD44、HLA-ABC呈高表達(dá),CD106、CD29、CD45、CD34、HLA-DR低表達(dá),提示低氧培養(yǎng)并不影響人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的免疫表型。3%O2、10%02和20%O2氧濃度培養(yǎng)組,倍增時間分別為17.2小時、18.9小時和20.8小時,提示細(xì)胞增殖速度增快,且3%O2低氧培養(yǎng)組與20%O2氧濃度培養(yǎng)組比較有顯著差異(P0.05)；3%O2低氧培養(yǎng)組與20%02氧濃度培養(yǎng)組比較,G0/1期細(xì)胞減少,S期細(xì)胞增多,增殖指數(shù)增高(P0.05)。3%O2培養(yǎng)組細(xì)胞凋亡率為(13.41%士1.39%),顯著低于20%O2培養(yǎng)組(20.83%±1.81%),兩組間差異顯著(P0.05)。 結(jié)論3%O2低氧持續(xù)培養(yǎng)可促進(jìn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖,減少細(xì)胞凋亡,并可保留其干細(xì)胞的特性。
【關(guān)鍵詞】：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 低氧 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 前言6-8
• 實驗材料8-11
• 實驗方法11-14
• 實驗結(jié)果14-24
• 討論24-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 英文縮略語31-32
• 綜述32-45
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 致謝45-46
• 發(fā)表文章46-47

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：797834