本文關(guān)鍵詞：銅綠假單胞菌與輕型鏈球菌混合生物膜體外模型的建立

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【摘要】：目的探索混合細(xì)菌生物膜(biofilm,BF)培養(yǎng)的適宜條件,建立混合細(xì)菌BF體外模型,并為研究混合細(xì)菌BF的調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法分別培養(yǎng)銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌株P(guān)AO1、輕型鏈球菌(Streptococcus mitis)標(biāo)準(zhǔn)株ATCC49456。紫外分光光度計(jì)、CCK-8(cell counting kit-8)比色法比較2種細(xì)菌在不同p H值、培養(yǎng)基、混合比例、加入順序和混合時(shí)間條件下的生長(zhǎng)情況。建立單獨(dú)及混合細(xì)菌BF后,熒光探針SYTO9/PI標(biāo)記,激光共聚焦顯微鏡(confocal laserscanning microscopy,CLSM)觀察BF內(nèi)部活死菌比例。掃描電鏡(scanning electron microscopy,SEM)觀察BF結(jié)構(gòu)。結(jié)果 p H值為7.5最適宜2種細(xì)菌生長(zhǎng),P0.01;2種細(xì)菌在腦心浸出液培養(yǎng)基中生長(zhǎng)明顯優(yōu)于胰大豆蛋白胨肉湯培養(yǎng)基,P0.01;PAO1與S.mitis以1:3混合,且PAO1優(yōu)先加入,能形成較好的BF,P0.01;2種細(xì)菌混合的時(shí)機(jī)以PAO1培養(yǎng)后立即混合S.mitis為優(yōu),P0.01。CLSM結(jié)果顯示PAO1可形成成熟致密的BF;S.mitis單獨(dú)培養(yǎng)不形成BF;混合細(xì)菌BF較單獨(dú)PAO1組活菌比例增多,3組厚度分別為(19.02±1.298)μm,(2.250±0.25)μm和(28.76±3.472)μm,P0.05。SEM顯示混合細(xì)菌BF內(nèi)兩種細(xì)菌共存,結(jié)構(gòu)更加致密立體。結(jié)論成功建立PAO1混合S.mitis的BF體外模型,方法簡(jiǎn)便易行,結(jié)果可靠,重復(fù)性強(qiáng)。初步證實(shí)S.mitis可參與混合菌BF形成,并起促進(jìn)作用。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院新生兒中心 兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國(guó)際科技合作基地 兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 銅綠假單胞菌 輕型鏈球菌 生物膜 模型
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81370744) 教育部高等學(xué)校博士點(diǎn)基金(No.20135503110009) 國(guó)家臨床重點(diǎn)專科建設(shè)項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)資助(No.衛(wèi)辦醫(yī)政函2011-873) “十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目之課題五(No.2012BAI04B05)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 氣管插管機(jī)械通氣技術(shù)的普遍開展在挽救越來越多早產(chǎn)兒及危重新生兒的同時(shí),也造成了越來越多的導(dǎo)管相關(guān)性感染。導(dǎo)管相關(guān)性感染發(fā)生率高,病情遷延反復(fù),且對(duì)常用抗生素不敏感,成為臨床上非常棘手的問題[1]。而氣管導(dǎo)管(endotrachealtube,ETT)表面生物膜(BF,biofi lm)正是造成下

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：789656