本文關(guān)鍵詞：兔抗弓形蟲Ⅰ型液泡型質(zhì)子焦磷酸酶多克隆抗體的制備及鑒定

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【摘要】：目的制備兔抗弓形蟲I型液泡型質(zhì)子焦磷酸酶(Tg VP1)多克隆抗體并鑒定其應用。方法選擇弓形蟲ME49株Tg VP1氨基酸序列中的兩條多肽,Tg VP1-1與Tg VP1-2,進行人工合成,并將其與KLH偶聯(lián)作為抗原免疫新西蘭大耳白兔,收集血清制備多克隆抗體,并通過ELISA、Western blot、免疫熒光等方法進行鑒定。結(jié)果經(jīng)間接ELISA測定,兔抗Tg VP1-1及Tg VP1-2的多克隆抗體效價均達1∶128 000;Western blot結(jié)果顯示兩種多抗均能識別弓形蟲天然蛋白中85 000左右條帶,與Tg VP1預測相對分子質(zhì)量大小相符,且特異性較好;通過免疫熒光技術(shù)檢測到兩株多抗識別的蛋白均定位于細胞質(zhì)中,與酸性鈣體的分布相同。結(jié)論采用人工合成多肽為免疫原所獲得的兔抗Tg VP1多克隆抗體效價高,特異性好,弓形蟲Tg VP1和酸性鈣體的深入研究奠定了基礎(chǔ),同時也為弓形蟲病的診斷提供了新的有效工具。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學生物技術(shù)學院;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 焦磷酸酶 酸性鈣體 多克隆抗體
【基金】：國家自然科學基金(81171608)~~
【分類號】：R392
【正文快照】： 弓形蟲是一種危害性巨大的機會致病微生物,屬于頂復門寄生蟲,雖然貓科動物為其目前確認的唯一終宿主[1],但其可侵犯所有溫血動物,尤其對免疫缺陷人群有極大威脅[2]。弓形蟲感染后可致弓形蟲病[3],危害嚴重卻無特征性臨床癥狀,并可通過多種途徑傳播[4-5]。其中,弓形蟲病的母嬰

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