小鼠樹突狀細(xì)胞分泌的Exosome對(duì)同種異體T細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究
本文關(guān)鍵詞:小鼠樹突狀細(xì)胞分泌的Exosome對(duì)同種異體T細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:目的:通過不同手段處理小鼠骨髓來源的樹突狀細(xì)胞(DC),分別提取其分泌的Exosome,研究Exosome表型變化以及其對(duì)小鼠同種異體脾臟來源的T淋巴細(xì)胞增殖的影響,來尋找優(yōu)化DC培養(yǎng)方案,探索DC源Exosome對(duì)T淋巴細(xì)胞的作用機(jī)制。 方法:首先檢測并驗(yàn)證應(yīng)用病原微生物產(chǎn)物L(fēng)PS、抑炎因子IL-10、糖皮質(zhì)激素地塞米松等手段對(duì)DC表面分子表達(dá)的影響;然后在以上實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上提取A:5天無處理組,B:7天無處理組,,C:7天LPS組,D:7天地塞米松組,E:7天IL-10組。提取不同培養(yǎng)條件下昆明小鼠骨髓源DC分泌的Exosome,用ICR小鼠(T cell+imDC)+昆明小鼠Exosome模擬混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR),CCK-8方法檢測計(jì)算各組Exosome對(duì)同種異體T淋巴細(xì)胞的增殖抑制率。 結(jié)果:(1)DC表面分子MHC-II、CD80、CD86表達(dá)量變化比較如下:LPS組DC表面分子MHC-II、CD80、CD86表達(dá)量較其他組明顯升高(P0.05)。(2)各組提取的Exosome表面分子表達(dá)量比較如下:MHC-II表達(dá)量B組分別與另外四組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),CD80表達(dá)量C組分別與A組、E組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),CD86表達(dá)量C組分別與A組、E組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。各組提取的Exosome對(duì)T細(xì)胞增殖抑制率均為正值,各組之間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),另外各組組內(nèi)不同濃度比較亦均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 結(jié)論:(1)DC表面分子MHC-II、CD80及CD86表達(dá)量隨著時(shí)間推移逐漸上調(diào),是隨時(shí)間逐漸走向成熟的過程;地塞米松及IL-10具有拮抗LPS促imDC成熟作用,降低DC表面MHC-II、CD80及CD86的表達(dá)量。(2)Exosome表面分子表達(dá)量與其來源細(xì)胞有關(guān),不同處理組DC來源的Exosome其表面分子表達(dá)量不同。(3)各實(shí)驗(yàn)組提取的Exosome在imDC輔助下均有抑制T淋巴細(xì)胞增殖的作用,且5天無處理組、7天無處理組、7天地塞米松組、7天IL-10組Exosome對(duì)T淋巴細(xì)胞的增殖抑制率較7天LPS組明顯高,并呈現(xiàn)濃度依賴性。各實(shí)驗(yàn)組中7天IL-10組抑制T淋巴細(xì)胞增殖效果最好。
【關(guān)鍵詞】:小鼠 樹突狀細(xì)胞 Exosome T淋巴細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R392
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 前言9-12
- 材料和方法12-22
- 結(jié)果22-29
- 討論29-37
- 結(jié)論37-38
- 參考文獻(xiàn)38-43
- 綜述43-50
- 參考文獻(xiàn)47-50
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文50-51
- 致謝51-53
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