發(fā)布時(shí)間：2017-08-29 13:42

  本文關(guān)鍵詞：多克隆及單克隆P24抗體在石蠟組織切片上檢測BDV-P24蛋白質(zhì)的應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 多克隆P24抗體 單克隆P24抗體 博爾納病病毒 免疫組化染色

【摘要】：研究目的： 驗(yàn)證本課題組前期制備的多克隆及單克隆P24抗體能否在石蠟組織切片上檢測博爾納病病毒（Borna disease virus，BDV）磷蛋白（P24蛋白質(zhì)）以及探索其運(yùn)用的條件。 研究方法： 選擇出生24h內(nèi)的SD大鼠20只為實(shí)驗(yàn)組顱內(nèi)注射BDV病毒液，對照組大鼠20只在相同部位注射磷酸鹽緩沖液（Phosphate BufferedSaline，PBS），未經(jīng)注射的SD大鼠和C57小鼠各40只作為陰性實(shí)驗(yàn)對照，飼養(yǎng)到60天取腦石蠟包埋制片；免疫組化染色用Envision兩步法，，一抗為多克隆或單克隆P24抗體，以PBS代替一抗作為空白對照，P24抗體的稀釋濃度分別從1:50、1:100、1:200、1:400、直到1:5000；以高倍鏡下神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色或棕褐色顆粒為陽性，將每張切片陽性細(xì)胞比例評分乘以陽性強(qiáng)度評分計(jì)算總分。 結(jié)果： 多克隆P24和單克隆P24抗體分別在BDV感染大鼠實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組的染色評分差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（多克隆抗體Z＝－3.108，P=0.000，而單克隆抗體Z＝－4.605，p=0.000）；在多克隆P24抗體稀釋度中，1:200、1:400的敏感性好而背景著色較輕，在單克隆P24抗體稀釋度中，1:100、1:200、1:400的敏感性好而無背景著色。 結(jié)論： 多克隆及單克隆P24抗體在石蠟組織切片上能檢測出BDV P24蛋白質(zhì)；并且多克隆P24抗體推薦的濃度為1:200和1:400，單克隆P24抗體的推薦濃度為1:100、1:200和1:400。
【關(guān)鍵詞】：多克隆P24抗體 單克隆P24抗體 博爾納病病毒 免疫組化染色
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R392
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-14
• 2 結(jié)果14-16
• 3 討論16-18
• 參考文獻(xiàn)18-21
• 文獻(xiàn)綜述21-28
• 參考文獻(xiàn)25-28
• 致謝28-29
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文29-30

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 徐曉艷;金戈;張亮;馬麗華;李文娟;鄧婧;黃榮忠;房亮;謝鵬;;抗博爾納病病毒核蛋白多克隆抗體的制備和鑒定[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2011年03期

本文編號：753609