本文關(guān)鍵詞：帕金森病模型大鼠黑質(zhì)自噬的表達和藥物干預(yù)研究

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【摘要】：目的觀察帕金森�。≒arkinson's disease, PD）模型大鼠黑質(zhì)自噬的表達和咪多吡藥物干預(yù)對其表達的影響，探討自噬在PD發(fā)病中的作用及咪多吡治療帕金森病的作用機制。 方法1.健康雄性SD大鼠90只按隨機數(shù)字法分為正常對照組（對照組）、帕金森病模型組（模型組）和咪多吡治療組（咪多吡組），每組又分為模型制備后4d、8d兩個亞組，每個亞組各15只大鼠，其中，6只用于免疫組化染色，6只用于Western blotting法檢測，3只用于透射電鏡觀察。2.采用頸背部皮下注射魚藤酮制作PD模型。3.模型制備成功后給予咪多吡（0.5mg/kg）灌胃，分別連續(xù)給藥4d和8d。4.透射電鏡觀察黑質(zhì)自噬體的形成；免疫組化和Western blotting法檢測黑質(zhì)Beclin1和LC3的表達水平。5.組織切片采用OLYMPUS顯微鏡（400×）攝像，應(yīng)用Motic Med6.0數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進行分析，Western blotting結(jié)果用Image J分析。6.數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x s）表示，組間比較采用單因素方差分析，以P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果1.透射電鏡下，對照組大鼠黑質(zhì)中神經(jīng)元細(xì)胞核型規(guī)則，核膜完整，染色質(zhì)分布均勻，胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器豐富，結(jié)構(gòu)基本正常，，未見到自噬體。模型組4d時，神經(jīng)元細(xì)胞中出現(xiàn)自噬體，呈圓形，多位于細(xì)胞核旁，溶酶體數(shù)量增多。8d時，自噬體、溶酶體數(shù)量顯著增多。咪多吡組神經(jīng)元細(xì)胞損傷較模型組減輕，可見到正常的細(xì)胞器，依然可見腫脹線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，4d時，可見自噬小體，但較模型組明顯減少。8d時，未見到自噬體。2.與對照組相比較，模型組大鼠黑質(zhì)中Beclin1、LC3蛋白表達和LC3II/LC3I比值增多（P0.05），8d高于4d，有顯著性差異（P0.05）。與模型組相比較，咪多吡組黑質(zhì)中Beclin1、LC3蛋白表達和LC3II/LC3I比值降低（P0.05），8d低于4d，有顯著性差異（P0.05）。 結(jié)論1. PD模型大鼠黑質(zhì)中自噬被激活，自噬參與了PD的發(fā)生發(fā)展過程；2.咪多吡可能通過抑制PD模型大鼠黑質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞自噬，發(fā)揮對帕金森病的治療作用。
【關(guān)鍵詞】：帕金森病 自噬 LC3 Beclin1 藥物干預(yù) 咪多吡
【學(xué)位授予單位】：河北聯(lián)合大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R742.5;R-332
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-11
• 第1章 實驗研究11-35
• 1.1 材料與方法11-20
• 1.1.1 主要藥物和試劑11
• 1.1.2 主要儀器和器材11
• 1.1.3 實驗動物及分組11-12
• 1.1.4 動物模型制備及給藥12-13
• 1.1.5 電鏡觀察13-14
• 1.1.6 免疫組化檢測方法14-16
• 1.1.7 免疫印跡檢測方法16-20
• 1.1.8 統(tǒng)計學(xué)分析20
• 1.2 結(jié)果20-27
• 1.2.1 各組大鼠黑質(zhì)電鏡觀察結(jié)果20-22
• 1.2.2 各組大鼠黑質(zhì) Beclin1、LC3 免疫組化結(jié)果22-25
• 1.2.3 各組大鼠黑質(zhì) Beclin1、LC3 II /LC3I 免疫印跡檢測結(jié)果25-27
• 1.3 討論27-31
• 1.3.1 帕金森病動物模型的制備27-29
• 1.3.2 自噬及其觀察結(jié)果29
• 1.3.3 各組大鼠黑質(zhì) Beclin1 和 LC3 的表達變化29-30
• 1.3.4 咪多吡對 PD 模型大鼠的作用30-31
• 1.4 結(jié)論31
• 參考文獻31-35
• 第2章 綜述 關(guān)于自噬與帕金森病的研究35-50
• 2.1 自噬概述36
• 2.2 自噬的發(fā)生過程36-37
• 2.3 自噬的分子機制37-39
• 2.3.1 自噬發(fā)生的分子機制37-38
• 2.3.2 自噬的調(diào)控機制38-39
• 2.4 自噬的雙重功能39-40
• 2.4.1 自噬的保護作用39-40
• 2.4.2 自噬與細(xì)胞的死亡40
• 2.5 自噬的檢測40-42
• 2.5.1 透射電子顯微鏡下超微結(jié)構(gòu)的觀察41
• 2.5.2 自噬相關(guān)蛋白的檢測41-42
• 2.6 自噬與帕金森病42-44
• 2.6.1 α-突觸核蛋白與自噬42-43
• 2.6.2 PINK1 與自噬43-44
• 2.6.3 DJ-1 與自噬44
• 參考文獻44-50
• 致謝50-51
• 導(dǎo)師簡介51-52
• 作者簡介52-53
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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本文編號：749769