本文關(guān)鍵詞：兔坐骨神經(jīng)勻漿上清液對脂肪干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用

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【摘要】：目的探討兔坐骨神經(jīng)勻漿上清液對脂肪來源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的誘導(dǎo)分化作用。方法取4月齡健康新西蘭大白兔(體重2.0~2.5 kg)體外分離、培養(yǎng)ADSCs并傳至第3代;用b FGF預(yù)誘導(dǎo)后,加入正常坐骨神經(jīng)勻漿上清液(B組)及損傷3、7、14 d的坐骨神經(jīng)勻漿上清液(分別為C、D、E組)對其進(jìn)行誘導(dǎo),空白對照組(A組)僅加入D-Hank液。觀察細(xì)胞形態(tài)變化,并采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測各組細(xì)胞神經(jīng)組織蛋白(S-100)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)及巢蛋白(Nestin)基因表達(dá),免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測S-100蛋白表達(dá)。結(jié)果 C、D、E組細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后逐漸出現(xiàn)雪旺細(xì)胞或神經(jīng)細(xì)胞樣形態(tài)改變,以D組變化最為明顯;A、B組細(xì)胞形態(tài)未見明顯改變,仍以梭形為主。S-100免疫細(xì)胞化學(xué)染色示,C、D、E組染色均為陽性,以D組陽性細(xì)胞最多;A、B組細(xì)胞無陽性表達(dá)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測示,S-100基因表達(dá)量隨損傷時(shí)間延長呈上升趨勢,C、D組達(dá)高峰,之后緩慢下降;C、D組表達(dá)量顯著高于A、B、E組(P0.05),C、D組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。NSE基因表達(dá)量呈相同趨勢,D組達(dá)高峰,之后緩慢下降;D、E組表達(dá)量顯著高于A、B、C組(P0.05),D、E組間差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Nestin基因表達(dá)量各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論兔損傷坐骨神經(jīng)勻漿上清液在體外能夠有效誘導(dǎo)ADSCs分化為雪旺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞,傷后早期(3~7 d)可作為細(xì)胞移植的最佳時(shí)間。
【作者單位】： 天津市天津醫(yī)院骨科研究所細(xì)胞工程室;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪來源干細(xì)胞 雪旺細(xì)胞 神經(jīng)細(xì)胞 坐骨神經(jīng)勻漿 誘導(dǎo)分化
【基金】：天津市衛(wèi)生局科技基金資助項(xiàng)目(2011KZ57)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 脂肪來源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,13.5 cm、1 500 r/min離心10 min;棄上清,D-HankADSCs)是一種具有多向分化潛能的成體干細(xì)胞,且液清洗1遍,用含10%FBS的L-DMEM培養(yǎng)基重懸,具有跨胚層分化能力,其數(shù)量大、易獲得、體外擴(kuò)增細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度為4×104個/m L

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王曉萃;吳金生;付文玉;邢海霞;;誘導(dǎo)大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞形成的神經(jīng)元樣細(xì)胞的形態(tài)特征[J];解剖學(xué)報(bào);2007年01期

2 張儒有;鄭永日;郭薇;胡韶山;;不同損傷時(shí)期人腦挫裂傷對神經(jīng)干細(xì)胞分化影響的體外研究[J];航空航天醫(yī)學(xué)雜志;2011年06期

3 陳增海;馬萬里;高春正;陳鵬;任鵬;姜夕峰;李貴新;;人臍血干細(xì)胞培養(yǎng)及其向神經(jīng)元樣細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化的研究[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年11期

4 任志午;趙U，

本文編號：745354