本文關鍵詞：兔坐骨神經(jīng)勻漿上清液對脂肪干細胞的誘導分化作用

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【摘要】：目的探討兔坐骨神經(jīng)勻漿上清液對脂肪來源干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的誘導分化作用。方法取4月齡健康新西蘭大白兔(體重2.0~2.5 kg)體外分離、培養(yǎng)ADSCs并傳至第3代;用b FGF預誘導后,加入正常坐骨神經(jīng)勻漿上清液(B組)及損傷3、7、14 d的坐骨神經(jīng)勻漿上清液(分別為C、D、E組)對其進行誘導,空白對照組(A組)僅加入D-Hank液。觀察細胞形態(tài)變化,并采用實時熒光定量PCR檢測各組細胞神經(jīng)組織蛋白(S-100)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)及巢蛋白(Nestin)基因表達,免疫細胞化學染色檢測S-100蛋白表達。結(jié)果 C、D、E組細胞經(jīng)誘導后逐漸出現(xiàn)雪旺細胞或神經(jīng)細胞樣形態(tài)改變,以D組變化最為明顯;A、B組細胞形態(tài)未見明顯改變,仍以梭形為主。S-100免疫細胞化學染色示,C、D、E組染色均為陽性,以D組陽性細胞最多;A、B組細胞無陽性表達。實時熒光定量PCR檢測示,S-100基因表達量隨損傷時間延長呈上升趨勢,C、D組達高峰,之后緩慢下降;C、D組表達量顯著高于A、B、E組(P0.05),C、D組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。NSE基因表達量呈相同趨勢,D組達高峰,之后緩慢下降;D、E組表達量顯著高于A、B、C組(P0.05),D、E組間差異亦有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Nestin基因表達量各組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論兔損傷坐骨神經(jīng)勻漿上清液在體外能夠有效誘導ADSCs分化為雪旺細胞和神經(jīng)細胞,傷后早期(3~7 d)可作為細胞移植的最佳時間。
【作者單位】： 天津市天津醫(yī)院骨科研究所細胞工程室;
【關鍵詞】： 脂肪來源干細胞 雪旺細胞 神經(jīng)細胞 坐骨神經(jīng)勻漿 誘導分化
【基金】：天津市衛(wèi)生局科技基金資助項目(2011KZ57)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 脂肪來源干細胞(adipose-derived stem cells,13.5 cm、1 500 r/min離心10 min;棄上清,D-HankADSCs)是一種具有多向分化潛能的成體干細胞,且液清洗1遍,用含10%FBS的L-DMEM培養(yǎng)基重懸,具有跨胚層分化能力,其數(shù)量大、易獲得、體外擴增細胞計數(shù)板計數(shù),調(diào)整細胞密度為4×104個/m L

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：745354