單增李斯特菌P60單克隆抗體的制備及初步應用
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【摘要】:目的制備并篩選單增李斯特菌P60特異性單克隆抗體,初步建立其快速檢測方法。方法以體外表達并純化的李斯特菌P60蛋白為抗原免疫Balb/c小鼠,采用雜交瘤技術(shù)制備抗李斯特菌P60的McAb,鑒定其抗體亞型,并對單抗的腹水效價、穩(wěn)定性及親和力進行分析。用純化的單克隆抗體包被酶標板,結(jié)合生物素化處理的P60多克隆抗體,夾心ELISA篩選單增李斯特菌特異性單抗,并以重組P60為標準品,建立標準曲線。結(jié)果獲得了4株可穩(wěn)定分泌P60單克隆抗體的雜交瘤細胞株。ELISA檢測表明,篩選的6C2單克隆抗體株可特異性與單增李斯特菌(4b)P60反應。結(jié)論建立的夾心ELISA方法可對單增李斯特菌進行特異性鑒別和定量檢測。
【作者單位】: 天津市動物疫病預防控制中心;中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室;蘭州生物制品研究所有限責任公司;
【關(guān)鍵詞】: 單增李斯特菌 P 單克隆抗體 鑒定 ELISA
【基金】:國家“十一五”科技支撐計劃項目(No.2007BAD40B01)~~
【分類號】:R392
【正文快照】: 單核細胞增生性李斯特菌(Listeria monocyto-genes,LM)簡稱單增李斯特菌,是一種能引起人獸共患的食源性致病菌。該菌屬于細胞內(nèi)寄生的革蘭氏陽性桿菌,人畜感染后,主要表現(xiàn)為腦膜炎、敗血癥和血液中單核細胞增多等癥狀,死亡率達20%~30%[1]。該菌在自然界廣泛存在,食品中存在的
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,本文編號:738042
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