單增李斯特菌P60單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用
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【摘要】:目的制備并篩選單增李斯特菌P60特異性單克隆抗體,初步建立其快速檢測(cè)方法。方法以體外表達(dá)并純化的李斯特菌P60蛋白為抗原免疫Balb/c小鼠,采用雜交瘤技術(shù)制備抗李斯特菌P60的McAb,鑒定其抗體亞型,并對(duì)單抗的腹水效價(jià)、穩(wěn)定性及親和力進(jìn)行分析。用純化的單克隆抗體包被酶標(biāo)板,結(jié)合生物素化處理的P60多克隆抗體,夾心ELISA篩選單增李斯特菌特異性單抗,并以重組P60為標(biāo)準(zhǔn)品,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果獲得了4株可穩(wěn)定分泌P60單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。ELISA檢測(cè)表明,篩選的6C2單克隆抗體株可特異性與單增李斯特菌(4b)P60反應(yīng)。結(jié)論建立的夾心ELISA方法可對(duì)單增李斯特菌進(jìn)行特異性鑒別和定量檢測(cè)。
【作者單位】: 天津市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【關(guān)鍵詞】: 單增李斯特菌 P 單克隆抗體 鑒定 ELISA
【基金】:國(guó)家“十一五”科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.2007BAD40B01)~~
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 單核細(xì)胞增生性李斯特菌(Listeria monocyto-genes,LM)簡(jiǎn)稱單增李斯特菌,是一種能引起人獸共患的食源性致病菌。該菌屬于細(xì)胞內(nèi)寄生的革蘭氏陽(yáng)性桿菌,人畜感染后,主要表現(xiàn)為腦膜炎、敗血癥和血液中單核細(xì)胞增多等癥狀,死亡率達(dá)20%~30%[1]。該菌在自然界廣泛存在,食品中存在的
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):738042
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