本文關(guān)鍵詞：Wnt信號(hào)途徑促進(jìn)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分化

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【摘要】：背景:脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞定向分化的能力以及調(diào)節(jié)機(jī)制尚未完全闡明。目的:觀察脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞在體外分化為Ⅱ型肺泡上皮的能力以及Wnt途徑對(duì)分化的調(diào)節(jié)作用。方法:取大鼠脂肪組織,體外分離培養(yǎng)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞并通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行鑒定。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、小氣道生長(zhǎng)液組和Wnt3a組,對(duì)照組用普通DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng),小氣道生長(zhǎng)液組和Wnt3a組均使用小氣道生長(zhǎng)液培養(yǎng),且Wnt3a組加入Wnt信號(hào)通路激動(dòng)劑Wnt3a培養(yǎng)。誘導(dǎo)10 d后分別通過q RT-PCR和免疫熒光檢測(cè)Ⅱ型肺泡上皮標(biāo)志物肺表面活性蛋白B,C,D的表達(dá),并于誘導(dǎo)5 d和10 d時(shí)通過Western blot檢測(cè)磷酸化β-catenin和GSK-3β。結(jié)果與結(jié)論:大鼠脂肪組織中可成功分離出純度較高的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,可表達(dá)CD44和CD29,不表達(dá)CD11b和CD45;經(jīng)小氣道生長(zhǎng)液誘導(dǎo)后,脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞中肺表面活性蛋白B,C,D蛋白和mR NA表達(dá)均上調(diào)(P0.01),表明其可被誘導(dǎo)為Ⅱ型上皮細(xì)胞;加入Wnt3a后,經(jīng)誘導(dǎo)的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞中肺表面活性蛋白B,C,D蛋白和mR NA表達(dá)均高于小氣道生長(zhǎng)液組(P0.01),且在誘導(dǎo)過程中磷酸化β-catenin表達(dá)隨時(shí)間逐漸上調(diào)而GSK-3β表達(dá)逐漸下調(diào)(P0.01)。結(jié)果證實(shí),Wnt信號(hào)通路在脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為Ⅱ肺泡上皮細(xì)胞過程中激活并促進(jìn)干細(xì)胞的定向分化。
【作者單位】： 吉林大學(xué)第一醫(yī)院二部急診科;吉林大學(xué)第一醫(yī)院呼吸科;吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院內(nèi)鏡中心;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 組織工程 間充質(zhì)干細(xì)胞 肺泡 脂肪干細(xì)胞 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞 分化 Wnta β-catenin 大鼠 脂肪 流式細(xì)胞術(shù) GSK-β 國(guó)家自然科學(xué)基金
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81072368) 國(guó)家級(jí)、省部級(jí)基金支持項(xiàng)目:吉林省衛(wèi)生廳(2012Z053)~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑及儀器:Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞約占所有肺泡上皮細(xì)胞的60%,其試劑及儀器來源主要功能是分泌肺泡表面活性物質(zhì)以減輕表面張力防止肺Ⅳ型膠原酶/胰蛋白酶/胎牛血清、Gibco,Grand Island,NY,USA泡塌陷[1-2]。另外

【共引文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：735451