本文關(guān)鍵詞：兔眼前段缺血致虹膜新生血管模型VEGF和IGF-I表達(dá)水平研究

  更多相關(guān)文章： 虹膜新生血管 胰島素生長因子-I 血管內(nèi)皮生長因子 新生血管性青光眼

【摘要】：目的：新生血管性青光眼(neovascular glaucoma，NVG)是以新生血管長入虹膜和房角為特征表現(xiàn)的青光眼，主要與引起眼內(nèi)缺血缺氧的血管源性疾病相關(guān)，是一種眼部多種結(jié)構(gòu)破壞、致盲率高的眼病。組織病理上眼內(nèi)纖維血管膜由增生的肌成纖維細(xì)胞和新生血管組成[1]。其中的虹膜新生血管（Neovascularization of iris，NVI）是繼發(fā)于多種眼病和全身系統(tǒng)性疾病的共同病理過程，缺血、缺氧及其他多種因素引發(fā)大量促血管生長因子的上調(diào)性表達(dá)，導(dǎo)致血管通透性增加和內(nèi)皮細(xì)胞增殖，是新生血管的發(fā)生和形成的關(guān)鍵性步驟。虹膜表面及房角新生血管進(jìn)一步發(fā)展，同時合并有纖維血管膜形成，阻塞房角結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致房角關(guān)閉而產(chǎn)生嚴(yán)重繼發(fā)性的新生血管性青光眼。其中虹膜新生血管的生長和發(fā)展過程中血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和胰島素樣生長因子-I（insulin-likegrowth factor-I，IGF-I）及其相關(guān)受體起到重要的促進(jìn)和先導(dǎo)作用。本研究建立兔眼前段缺血誘發(fā)虹膜新生血管模型，為探索虹膜新生血管相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展機(jī)制提供合適的動物模型。采用HE染色光鏡下計數(shù)新生血管數(shù)量，免疫組織化學(xué)染色方法從蛋白水平檢測VEGF和IGF-I的表達(dá)情況，ELISA方法測定不同時間點(diǎn)房水組織和血清組織當(dāng)中VEGF和IGF-1兩種因子的表達(dá)含量變化情況。IGF-I在視網(wǎng)膜及脈絡(luò)膜新生血管形成的相關(guān)實驗報道較多，在NVI繼發(fā)NVG的研究中較少見，以此實驗探討干預(yù)NVG發(fā)生的病理機(jī)制，進(jìn)一步揭示相關(guān)血管因子在虹膜新生血管及新生血管性青光眼病理機(jī)制中的促生長作用，為臨床診斷和治療新生血管性青光眼提供新的思路和方法。 方法：實驗用雄性新西蘭大白兔14只，體重在1.5-2kg，正常飲食飲水飼養(yǎng)。采用隨機(jī)分組，分為正常組和模型組，正常組雙眼僅行單純打開結(jié)膜囊后無縫和術(shù)，模型組雙眼為手術(shù)眼，均行上、下直肌離斷合并4條渦靜脈阻塞手術(shù)。從術(shù)前1天及術(shù)后1天，3天，5天，7天，9天裂隙燈觀察至11天處死。正常組僅行裂隙燈觀察。11天處死后取眼球部分前節(jié)組織切片，在光學(xué)顯微鏡下觀察并比較兩組虹膜組織形態(tài)結(jié)構(gòu)和新生血管數(shù)量及形態(tài)。采用組織切片HE染色觀察并計數(shù)虹膜新生血管數(shù)目，，采用免疫組織化學(xué)染色組織切片方法在蛋白水平測定VEGF和IGF-I表達(dá)量，比較兩組虹膜組織VEGF和IGF-I兩種因子的表達(dá)量差異情況。應(yīng)用ELISA方法在蛋白水平測定不同時間點(diǎn)（1天，3天，5天，7天，9天，11天）房水組織和血清當(dāng)中VEGF和IGF-I兩種因子的表達(dá)含量變化情況。 結(jié)果： 1.與同期正常組比較，模型組（11天）虹膜組織新生血管數(shù)量明顯增多，差異性顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 2.與同期正常組比較，模型組（11天）虹膜組織切片VEGF和IGF-1在蛋白水平的表達(dá)量較正常組明顯升高，兩組相比較差異性顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05)。 3.與同期正常組比較，模型組新生血管隨著時間進(jìn)展數(shù)量增多，VEGF和IGF-1兩種因子在房水中蛋白水平表達(dá)量逐漸升高，差異性顯著，均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 4.與同期正常組比較，模型組新生血管隨著時間進(jìn)展數(shù)量增多，VEGF和IGF-1兩種因子在血清中表達(dá)量逐漸升高，差異性顯著，均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 1.前節(jié)缺血致虹膜新生血管兔眼模型中虹膜新生血管的形成與眼前段組織的缺血、缺氧有關(guān)。眼前段缺血制作的虹膜新生血管模型部位準(zhǔn)確，虹膜新生血管量較多容易觀察，是進(jìn)行虹膜新生血管發(fā)生機(jī)制及藥物干預(yù)研究的合適模型。 2.在兔眼前節(jié)缺血致虹膜新生血管模型中，VEGF和IGF-I表達(dá)顯著增高，VEGF和IGF-I與虹膜新生血管及新生血管性青光眼的發(fā)病密切相關(guān)，有著促進(jìn)調(diào)控血管生成的作用。 3.在兔眼前節(jié)缺血致虹膜新生血管模型中，隨著造模時間延長，VEGF和IGF-1在虹膜新生血管中的表達(dá)量逐漸增高，可見新生血管形成過程中，VEGF和IGF-1參與調(diào)控血管生成，具有密切相關(guān)性。為臨床治療虹膜新生血管等眼部微血管病變提供新的方向。
【關(guān)鍵詞】：虹膜新生血管 胰島素生長因子-I 血管內(nèi)皮生長因子 新生血管性青光眼
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R775;R-332
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-20
• 1. 實驗對象14
• 2. 主要試劑14
• 3. 主要儀器14-15
• 4. 實驗分組15
• 5. 動物模型制作15
• 5.1 建立模型15
• 5.2 一般狀態(tài)及眼前節(jié)變化15
• 6. 標(biāo)本處理15
• 7. 指標(biāo)測定15-20
• 7.1 角膜混濁程度評分標(biāo)準(zhǔn)15-16
• 7.2 前房反應(yīng)的評分標(biāo)準(zhǔn)16
• 7.3 虹膜顏色變化的評分標(biāo)準(zhǔn)16
• 7.4 虹膜新生血管的評分標(biāo)準(zhǔn)16
• 7.5 HE 染色光鏡下觀察組織病理形態(tài)學(xué)變化16-17
• 7.6 免疫組化染色過程17-19
• 7.7 ELISA 過程19-20
• 8. 數(shù)據(jù)分析20
• 結(jié)果20-28
• 1. 一般狀態(tài)的觀察20-21
• 2. 術(shù)后眼部前節(jié)情況觀察21-23
• 2.1 正常組21
• 2.2 模型組21-23
• 3. HE 染色光鏡下病理形態(tài)觀察結(jié)果23-24
• 4. 免疫組化檢測結(jié)果24-26
• 4.1 血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）免疫組化檢測結(jié)果24-25
• 4.2 胰島素樣生長因子-1（IGF-1）免疫組化檢測結(jié)果25-26
• 5. ELISA 檢測結(jié)果26-28
• 5.1 房水組織中 VEGF 及 IGF-1 ELISA 檢測結(jié)果26-27
• 5.2 血清中 VEGF 及 IGF-1 ELISA 檢測結(jié)果27-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述36-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 致謝44-45

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 李養(yǎng)軍,惠延年;IGF-I對視網(wǎng)膜新生血管形成的調(diào)控及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[J];國際眼科雜志;2005年05期

2 張忠紅;欒潔;;眼內(nèi)新生血管與細(xì)胞因子[J];國際眼科雜志;2006年01期

3 蔣瑤祁;彭輝燦;;VEGF家族及其受體與視網(wǎng)膜新生血管形成[J];國際眼科雜志;2006年05期

4 張小玲;孫文濤;;糖尿病性視網(wǎng)膜病變患者房水中VEGF與IGF-1的定量測定及分析[J];國際眼科雜志;2008年05期

5 趙芳芳;謝伯林;;IGF-1與脈絡(luò)膜新生血管性疾病[J];國際眼科雜志;2012年02期

6 武麗，曹景泰，劉世鉞;人虹膜新生血管的分類及超微結(jié)構(gòu)[J];解剖學(xué)報;1995年02期

7 仝偉兵;李曉芳;張靜;;IGF-I及IGF-I受體與視網(wǎng)膜新生血管的研究[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年S1期

8 韓靜;閆小龍;韓泉洪;惠延年;王雨生;馬吉獻(xiàn);;兔角膜堿燒傷后角膜和房水中VEGF的表達(dá)[J];眼科新進(jìn)展;2006年02期

9 呂明良;李敏;;IGF-1對人RPE細(xì)胞HIF-1α及VEGF表達(dá)的影響[J];眼科新進(jìn)展;2011年07期

本文編號：723764