本文關(guān)鍵詞：三維培養(yǎng)hESCs來源視杯樣組織中c-kit和SSEA-4的時(shí)空表達(dá)特點(diǎn)研究

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【摘要】：目的研究人胚胎干細(xì)胞(human embryonic stem cells,h ESCs)三維培養(yǎng)后形成的視杯樣組織中c-kit和SSEA-4表達(dá)的時(shí)空特性。方法 H1人胚胎干細(xì)胞行三維培養(yǎng)和神經(jīng)誘導(dǎo)分化,在分化7、14、21、30、49、70、90 d固定組織并行免疫熒光鑒定檢測c-kit和SSEA-4的表達(dá),同時(shí)在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)將分化組織消化成單細(xì)胞行流式細(xì)胞儀檢測驗(yàn)證。結(jié)果三維培養(yǎng)第14天可見Rax+視泡(optic vesicle,OV)樣結(jié)構(gòu),第30天形成具有內(nèi)層Pax6+、外層Mitf+的雙層視杯樣(optic cup,OC)結(jié)構(gòu),第90天可見部分Crx+細(xì)胞。c-kit主要表達(dá)于h ESCs來源OV狀及OC狀的神經(jīng)上皮樣結(jié)構(gòu)中,SSEA-4早期均勻表達(dá)于整個(gè)組織,晚期則主要集中于周邊部。c-kit+細(xì)胞比例呈先升高(P0.01)后下降(P0.01)趨勢,并在分化14 d達(dá)40%的峰值。SSEA-4+細(xì)胞比例從分化0 d至70 d持續(xù)下降(P0.01),直到90 d一直維持于該低水平。結(jié)論在三維培養(yǎng)h ESCs來源OV或OC狀組織中,c-kit基因隨誘導(dǎo)分化而激活,且主要表達(dá)于神經(jīng)上皮層,呈先增高后下降趨勢。SSEA-4早期高表達(dá)于整個(gè)組織,之后逐漸減少至周邊部并維持于低水平狀態(tài)。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院眼科;第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍眼科中心 視覺損傷與再生修復(fù)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 三維培養(yǎng) 視杯 c-kit SSEA- 胚胎干細(xì)胞
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃,2013CB967002)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 重慶,第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍眼科中心,視覺損傷與再生修復(fù)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室2)視網(wǎng)膜色素變性(retinitis pigmentosa,RP)、干性老年性黃斑變性(age-related macular degeneration,AMD)、Stargardt’s病等視網(wǎng)膜變性類疾病常常累及多種視網(wǎng)膜細(xì)胞,如感光細(xì)胞、視網(wǎng)膜色素上皮

【共引文獻(xiàn)】

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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【相似文獻(xiàn)】

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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本文編號：717248