本文關(guān)鍵詞：表皮葡萄球菌生物膜形成相關(guān)基因在表皮葡萄球菌和白假絲酵母菌混合生物膜形成中的作用研究

  更多相關(guān)文章： 表皮葡萄球菌 白假絲酵母菌 混合生物膜 胞間黏附素基因A 纖維蛋白原結(jié)合蛋白基因 聚集相關(guān)蛋白基因

【摘要】：目的探討表皮葡萄球菌生物膜形成相關(guān)基因——胞間黏附素A(intercellular adhesion A,ica A)基因、纖維蛋白原結(jié)合蛋白(fibrinogen binding protein,fbe)基因、聚集相關(guān)蛋白(accumulation-associated protein,aap)基因在表皮葡萄球菌和白假絲酵母菌混合生物膜形成中的作用。方法實(shí)驗(yàn)分為3組,用表皮葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC35984(表葡組)及白假絲酵母菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC10231(白念組)分別培養(yǎng)及混合培養(yǎng)(混合組),建立表皮葡萄球菌、白假絲酵母菌及二者混合生長的體外生物膜模型。于培養(yǎng)2、4、6、8、12、24、48、72 h,采用結(jié)晶紫染色法半定量檢測生物膜形成能力,二甲氧唑黃[(2,3 bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)5〔(phenylamino)Carbonyl〕2H-tetrazolium hydroxide assay,XTT]比色法評(píng)價(jià)生物膜體外生長動(dòng)力學(xué);24、72 h掃描電鏡觀察生物膜超微結(jié)構(gòu)。熒光定量PCR分析培養(yǎng)72 h表葡組及混合組ica A、fbe、aap基因表達(dá)情況。結(jié)果結(jié)晶紫染色法生物膜半定量檢測示,混合組和表葡組均在培養(yǎng)12 h生物膜明顯增厚,72 h混合組超過表葡組,組間比較除72 h外,其余各時(shí)間點(diǎn)兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);白念組12 h出現(xiàn)生物膜的生長,在整個(gè)培養(yǎng)周期白念組生物膜厚度均低于混合組(P0.05)。XTT比色法生長動(dòng)力學(xué)檢測示,混合組整體生長速度快于白念組,且48 h后超過表葡組;混合組與表葡組除12 h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)外,其余各時(shí)間點(diǎn)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);混合組培養(yǎng)2、4 h時(shí)A值低于白念組,但比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);6 h后各時(shí)間點(diǎn)A值均顯著高于白念組(P0.05)。掃描電鏡觀察示,隨培養(yǎng)時(shí)間延長各組均形成結(jié)構(gòu)復(fù)雜、成熟的生物膜。培養(yǎng)72 h熒光定量PCR檢測示,與表葡組相比,混合組fbe、ica A、aap基因表達(dá)量分別增高1.93、1.52、1.46倍,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論表皮葡萄球菌和白假絲酵母菌混合生長能形成比單一微生物結(jié)構(gòu)更復(fù)雜的混合生物膜;混合生物膜較單一微生物生物膜更厚,可能與表皮葡萄球菌ica A、aap、fbe基因表達(dá)增加有關(guān)。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院胸心外科;昆明醫(yī)科大學(xué)附屬延安醫(yī)院心臟大血管外科;昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院乳腺科;
【關(guān)鍵詞】： 表皮葡萄球菌 白假絲酵母菌 混合生物膜 胞間黏附素基因A 纖維蛋白原結(jié)合蛋白基因 聚集相關(guān)蛋白基因
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81260228)~~
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 1 Department of Cardiovascular h oracic Surgery,3 Department of Clinical Laboratory,4 Department of Brest Surgery,the h ird Ai liatedHospital of Kunming Medical University,Kunming Yunnan,650118,P.R.China;2 Department of Cardiovascular Surgery,the Ai liat

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本文編號(hào)：713809