本文關(guān)鍵詞：福氏志賀菌2型外膜蛋白A的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備

  更多相關(guān)文章： 福氏志賀菌 OmpA蛋白 多克隆抗體 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) Western blot

【摘要】：福氏志賀菌外膜蛋白A是細(xì)菌入侵宿主細(xì)胞的作用蛋白,同時(shí)激活機(jī)體的免疫機(jī)制對(duì)抗細(xì)菌的感染,在動(dòng)物疫苗上有很好的應(yīng)用前景。采用分子克隆方法獲得福氏志賀菌OmpA蛋白表達(dá)菌株;利用SDS-PAGE電泳切膠純化、尿素梯度復(fù)性獲得OmpA蛋白,免疫小鼠制備OmpA蛋白多克隆抗體;采用ELISA法檢測(cè)抗體滴度,Western blot檢測(cè)抗血清特異性;DNAMan與MEGA軟件分析OmpA蛋白系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系。結(jié)果顯示,OmpA重組載體雙酶切、DNA測(cè)序鑒定結(jié)果,以及蛋白表達(dá)、純化條帶大小與預(yù)測(cè)一致;ELISA法確認(rèn)OmpA抗血清滴度達(dá)1∶1 600,Western blot證實(shí)抗血清具有很好的特異性。OmpA序列系統(tǒng)發(fā)生分析發(fā)現(xiàn)不同種的致病菌存在同源性,尤其C-端同源性較高,并且不同種志賀菌具有更高的同源性。表明成功制備OmpA蛋白和小鼠多克隆抗體,為OmpA蛋白功能與疫苗開(kāi)發(fā)研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 福氏志賀菌 OmpA蛋白 多克隆抗體 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) Western blot
【基金】：陜西省教育廳科學(xué)研究計(jì)劃(2013JK0723) 陜西理工學(xué)院校級(jí)項(xiàng)目(SLGQD13-15)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 福氏志賀菌(Shigella flexneri)為革蘭陰性致病菌,屬于高度傳染性和危害嚴(yán)重的急性腸道傳染病,臨床上可引起細(xì)菌性痢疾,病死率高[1-2];世界各地都有流行,尤其是發(fā)展中國(guó)家,患病群體主要為兒童[3]。隨著抗生素的濫用,福氏志賀菌產(chǎn)生不同程度的耐藥性[4],有待開(kāi)發(fā)一種新型的安全

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 朱陣;王婧;張繼瑜;魏小娟;周緒正;郭肖;劉翠翠;;福氏志賀菌2型多重PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2014年08期

2 劉祥;;溶藻弧菌附著定植因子ACFA原核載體構(gòu)建、表達(dá)條件優(yōu)化及多克隆抗體制備[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2015年01期

3 陳春琳;俱雄;萬(wàn)健;劉祥;;革蘭陰性菌外膜蛋白A研究進(jìn)展[J];生物技術(shù);2014年02期

4 劉祥;陳春琳;牟歡;吳三橋;張濤;張曉娟;;重組人骨硬化蛋白的表達(dá)、純化及多克隆抗體制備[J];生物技術(shù);2014年06期

5 王俊;祁偉;王淑香;郭文學(xué);;天津地區(qū)福氏志賀菌整合子攜帶及耐藥性研究[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2014年02期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳春琳;劉祥;王成富;王令;俱雄;張濤;吳三橋;張曉娟;;重組銅綠假單胞菌外膜蛋白OprI的原核表達(dá)及多克隆抗體制備[J];生物技術(shù);2015年01期

2 董利娟;楊賢;王俊;祁偉;呂星;梁帆;;志賀菌1、2類整合子及ISCR1攜帶情況與耐藥性的關(guān)系[J];天津醫(yī)藥;2015年04期

3 俱雄;陳春琳;劉祥;張濤;吳三橋;張曉娟;;大腸埃希菌外膜蛋白OmpC的原核表達(dá)與免疫保護(hù)作用研究[J];生命科學(xué)研究;2015年02期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 尤超;趙大球;梁乘榜;周春華;;PCR引物設(shè)計(jì)方法綜述[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2011年17期

2 陳諾;唐善虎;岑璐伽;李雪;;多重PCR技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)展[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2010年10期

3 趙愛(ài)蘭;熊衍文;白雪梅;張少敏;王艷;孫暉;葉長(zhǎng)蕓;;鑒定五類致瀉性大腸埃希菌和志賀菌的多重PCR方法[J];疾病監(jiān)測(cè);2011年01期

4 劉家云;龍銦;蘇明權(quán);樊新;張建芳;郝曉柯;;志賀菌、沙門菌和霍亂弧菌多重PCR快速檢測(cè)體系的建立[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2007年11期

5 任亮,朱寶芹,張軼博,王海燕,李塵遠(yuǎn),蘇玉虹,巴彩鳳;利用軟件Primer Premier 5.0進(jìn)行PCR引物設(shè)計(jì)的研究[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年06期

6 李智瓊;鄧尚廉;孫承謀;;用檢測(cè)ipaH基因的PCR檢測(cè)志賀菌屬[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2009年03期

7 胡麗芳;騫愛(ài)榮;商澎;;骨硬化蛋白與骨代謝[J];生命的化學(xué);2011年05期

8 王俊;祁偉;吳瑾;王淑香;郭文學(xué);馬艷紅;;天津地區(qū)志賀菌耐藥性及整合子攜帶調(diào)查[J];天津醫(yī)藥;2011年05期

9 劉祥;李惠;;大腸埃希菌外膜蛋白OmpA表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建和誘導(dǎo)條件優(yōu)化[J];生物技術(shù);2013年04期

10 程海燕;龐歡瑛;魯義善;簡(jiǎn)紀(jì)常;吳灶和;蔡雙虎;;溶藻弧菌acfA基因克隆與生物信息學(xué)分析[J];廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào);2014年01期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張一;袁士杰;張建群;羅學(xué)輝;;新型福氏志賀菌的研究進(jìn)展及流行現(xiàn)狀[J];中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2013年08期

2 金利勝,袁淑紅;葡萄糖銨陽(yáng)性的福氏志賀菌2a型的鑒定[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2002年04期

3 許學(xué)斌;易紅彬;屠麗紅;顧寶柯;陳悅;李燕婷;;一種罕見(jiàn)的福氏志賀菌4c型流行菌株的鑒定分析[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2006年03期

4 李海丹;羅朝晨;謝一俊;周文革;林震宇;;福建省首次檢出福氏志賀菌4c血清型[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

5 肖敏;易勇;毛旭虎;羅萍;聶棱;賈莉萍;魏平;王惠;敬華;鄒全明;;免疫磁分離及免疫比濁分析對(duì)福氏志賀菌的自動(dòng)快速定量檢測(cè)[J];免疫學(xué)雜志;2009年03期

6 鐘逶迤;王嵬;吳蓉榕;欒旭波;汪東籬;;福氏志賀菌4c亞型深圳分離株的病原特性及毒力基因分析[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2010年03期

7 王佳彬;;福氏志賀菌食物中毒實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)報(bào)告[J];預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志;2011年09期

8 陶哲;喻書徹;;福氏志賀菌感染的發(fā)病機(jī)制和疫苗研制[J];國(guó)際兒科學(xué)雜志;2006年04期

9 靳會(huì)娟;任艷萍;盧星;陳晨;張錦;王建麗;黃麗莉;馬宏;;濟(jì)源市福氏志賀菌毒力基因分型與分析[J];中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2007年03期

10 靳會(huì)娟;任艷平;蘆星;陳晨;;濟(jì)源市91株福氏志賀菌的耐藥性分析[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年11期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 師潤(rùn);陳陸;楊霞;王川慶;劉紅英;王新衛(wèi);常洪濤;姚惠霞;;人源福氏志賀菌對(duì)雞腸上皮原代細(xì)胞侵襲特性研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第十二次人獸共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第六屆第十四次教學(xué)專業(yè)委員會(huì)論文集[C];2012年

2 師潤(rùn);陳陸;劉紅英;楊霞;呂文強(qiáng);余秋穎;趙軍;王川慶;;人源福氏志賀菌對(duì)雞腸上皮原代細(xì)胞侵襲特性研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十六次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

3 俞蕙;王曉紅;葉穎子;薛健昌;朱啟昒;;兒童福氏志賀菌Ⅰ類整合子的檢測(cè)及其與耐藥性的關(guān)系[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

4 師潤(rùn);陳陸;楊霞;王川慶;劉紅英;王新衛(wèi);常洪濤;姚惠霞;;細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和骨架在人源福氏志賀菌侵襲雞腸上皮原代細(xì)胞中的作用[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第十二次人獸共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第六屆第十四次教學(xué)專業(yè)委員會(huì)論文集[C];2012年

5 魏小娟;張繼瑜;王松泰;黃嬌嬌;李劍勇;周緒正;牛建榮;李金善;李冰;;福氏志賀菌2a AcrA蛋白的表達(dá)、純化及初步結(jié)晶[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)藥理毒理學(xué)分會(huì)第十次研討會(huì)論文摘要集[C];2009年

6 王松泰;張繼瑜;魏小娟;曹小安;邱昌慶;;福氏志賀菌2a多藥耐藥基因marA的克隆及其原核表達(dá)[A];第二屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

7 孫素霞;王紅;王勇;俞守義;吳愛(ài)軍;;福氏志賀菌ipaC基因的克隆及序列分析[A];新世紀(jì)預(yù)防醫(yī)學(xué)面臨的挑戰(zhàn)——中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)首屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2002年

8 孫素霞;王紅;王勇;俞守義;吳愛(ài)軍;;福氏志賀菌ipaC基因克隆及序列分析[A];新世紀(jì)預(yù)防醫(yī)學(xué)面臨的挑戰(zhàn)——中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)首屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2002年

9 葉穎子;俞蕙;王曉紅;薛健昌;;兒童福氏志賀菌OXA型β內(nèi)酰胺酶耐藥基因及其耐藥性檢測(cè)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

10 俞蕙;王曉紅;葉穎予;朱啟昒;薛健昌;;兒童福氏志賀菌Ⅰ類整合子的檢測(cè)及其與耐藥性的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 本報(bào)記者 林洵 吳剛;科技創(chuàng)新要用數(shù)據(jù)說(shuō)話[N];健康報(bào);2012年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 張楠;中國(guó)新發(fā)福氏志賀菌多重耐藥優(yōu)勢(shì)克隆群傳播和進(jìn)化的基因組分析[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2014年

2 付華;福氏志賀菌轉(zhuǎn)錄譜在抗菌藥物作用機(jī)制研究中的應(yīng)用[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2008年

3 羅霞;血清型轉(zhuǎn)換噬菌體介導(dǎo)的O-抗原修飾以及對(duì)福氏志賀菌毒力的影響[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張曙霞;福氏志賀菌血清型多重PCR分型方法的建立及應(yīng)用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

2 肖敏;免疫比濁分析結(jié)合免疫磁分離技術(shù)在福氏志賀菌自動(dòng)快速定量檢測(cè)中的初步應(yīng)用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

3 黃嬌嬌;福氏志賀菌多藥耐藥相關(guān)基因的表達(dá)與耐藥性關(guān)系研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

4 師潤(rùn);人源福氏志賀菌對(duì)雞腸上皮細(xì)胞侵襲特性及其機(jī)制研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 劉翠翠;福氏志賀菌耐藥株的轉(zhuǎn)錄組測(cè)定及sRNA差異分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

6 蘇文莉;我國(guó)福氏志賀菌F4c亞型流行病學(xué)特征及變遷規(guī)律的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2014年

7 郭靜一;福氏志賀菌2a型301株uhpT突變體的構(gòu)建及功能分析[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2009年

8 趙天;黃連素抑制福氏志賀菌的作用機(jī)理及GadB蛋白功能的研究[D];江南大學(xué);2012年

9 王藝婷;福氏志賀菌血清型PCR檢測(cè)方法及血清型相關(guān)噬菌體SfX研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2010年

10 陳琛;福氏志賀菌F4cv和F4s新亞型的表型及基因型特性研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

，

本文編號(hào)：708562