本文關鍵詞：福氏志賀菌2型外膜蛋白A的原核表達及多克隆抗體的制備

  更多相關文章： 福氏志賀菌 OmpA蛋白 多克隆抗體 酶聯(lián)免疫吸附試驗 Western blot

【摘要】：福氏志賀菌外膜蛋白A是細菌入侵宿主細胞的作用蛋白,同時激活機體的免疫機制對抗細菌的感染,在動物疫苗上有很好的應用前景。采用分子克隆方法獲得福氏志賀菌OmpA蛋白表達菌株;利用SDS-PAGE電泳切膠純化、尿素梯度復性獲得OmpA蛋白,免疫小鼠制備OmpA蛋白多克隆抗體;采用ELISA法檢測抗體滴度,Western blot檢測抗血清特異性;DNAMan與MEGA軟件分析OmpA蛋白系統(tǒng)進化關系。結果顯示,OmpA重組載體雙酶切、DNA測序鑒定結果,以及蛋白表達、純化條帶大小與預測一致;ELISA法確認OmpA抗血清滴度達1∶1 600,Western blot證實抗血清具有很好的特異性。OmpA序列系統(tǒng)發(fā)生分析發(fā)現(xiàn)不同種的致病菌存在同源性,尤其C-端同源性較高,并且不同種志賀菌具有更高的同源性。表明成功制備OmpA蛋白和小鼠多克隆抗體,為OmpA蛋白功能與疫苗開發(fā)研究奠定了基礎。
【作者單位】： 陜西理工學院生物科學與工程學院;
【關鍵詞】： 福氏志賀菌 OmpA蛋白 多克隆抗體 酶聯(lián)免疫吸附試驗 Western blot
【基金】：陜西省教育廳科學研究計劃(2013JK0723) 陜西理工學院校級項目(SLGQD13-15)
【分類號】：R378
【正文快照】： 福氏志賀菌(Shigella flexneri)為革蘭陰性致病菌,屬于高度傳染性和危害嚴重的急性腸道傳染病,臨床上可引起細菌性痢疾,病死率高[1-2];世界各地都有流行,尤其是發(fā)展中國家,患病群體主要為兒童[3]。隨著抗生素的濫用,福氏志賀菌產生不同程度的耐藥性[4],有待開發(fā)一種新型的安全

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本文編號：708562