本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用iTRAQ質(zhì)譜分析技術(shù)對(duì)小鼠精原干細(xì)胞標(biāo)志物進(jìn)行動(dòng)態(tài)研究與篩選

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【摘要】：目的:利用i TRAQ蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)檢測(cè)各年齡階段小鼠精原干細(xì)胞(SSCs)蛋白的表達(dá),進(jìn)一步分析SSCs標(biāo)志物表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化,運(yùn)用生物信息學(xué)蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫篩選并發(fā)現(xiàn)新的標(biāo)志物。方法:以健康雄性C57BL/6小鼠為研究對(duì)象,按照鼠齡不同分為8組,無菌提取各組小鼠睪丸組織,采用復(fù)合酶消化、免疫磁珠分選(MACS)的方法純化SSCs后提取蛋白,利用雙向電泳及蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)并結(jié)合蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫對(duì)各組蛋白質(zhì)進(jìn)行分析鑒定。結(jié)果:質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)共得到譜圖248 510張,通過Mascot軟件進(jìn)行分析,共鑒定到1 132種蛋白。以蛋白豐度差異倍數(shù)達(dá)到1.2倍以上,且經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)P0.05視為存在差異性蛋白,8組共檢測(cè)到差異蛋白298種。鑒定到目前已知的SSCs標(biāo)志物9種(PCNA、GFRα1、CDH1、Annexin A7、UCHL1、VASA、CD49f、CD29、PLZf),通過各組對(duì)比獲得在不同鼠齡段內(nèi)表達(dá)變化趨勢(shì),其中GFRα1、CD49f、CD29在SSCs中的變化趨勢(shì)與以往文獻(xiàn)一致,并篩選出10種蛋白質(zhì)(P63、CD71、CD98、K19、ACE、K18、K15、K17、SH2、SH3)作為SSCs標(biāo)志物進(jìn)一步研究的對(duì)象。結(jié)論:SSCs內(nèi)的蛋白隨著小鼠鼠齡的變化表達(dá)存在差異,i TRAQ蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)可以對(duì)SSCs蛋白質(zhì)組學(xué)信息進(jìn)行分析與比較,獲得各鼠齡階段差異性表達(dá)蛋白,為進(jìn)一步分析和研究這些差異性蛋白的功能與作用提供了新的方法。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院泌尿外科;寧夏醫(yī)科大學(xué)生育力保持省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;寧夏醫(yī)科大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 精原干細(xì)胞 蛋白質(zhì)組學(xué) 生物標(biāo)記物 相對(duì)和絕對(duì)定量的等量異位標(biāo)簽
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81241143)~~
【分類號(hào)】：R321.1;O657.63
【正文快照】： Supported by a grant from National Natural Science Foundation of China(81241143).Correspondece to:MA Liang-hong,email:mmm1770@163.comReceived:November 1,2014;accepted:January 29,2015相對(duì)和絕對(duì)定量的等量異位標(biāo)簽(isobaric tagsfor relative and absolute quan

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 劉世學(xué);唐偉;熊濤;;人精原干細(xì)胞分離、培養(yǎng)及鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年06期

2 王得志,周新華,張泉,張良;β_1整合素在生后不同年齡階段小鼠睪丸生精細(xì)胞分布的研究[J];解剖學(xué)研究;2003年04期

3 周慶輝,周新華,張泉,王得志,張良,黎莉;整合素α_6亞基在不同年齡段小鼠睪丸精原細(xì)胞表達(dá)觀察[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2005年02期

4 白楊;葉哲偉;曾甫清;;流式細(xì)胞儀富集大鼠A1～A4型精原干細(xì)胞[J];中華男科學(xué)雜志;2008年01期

5 鄧雪連;林發(fā)全;;磁性活性細(xì)胞分選技術(shù)在男性不育研究中的應(yīng)用[J];中華男科學(xué)雜志;2012年01期

6 于春梅;張平;王靜;劉明兮;王暉;周作民;沙家豪;;Annexin A7在精原干細(xì)胞中的表達(dá)研究[J];中華男科學(xué)雜志;2011年06期

7 李延倉;李孝建;沈雁;;表皮干細(xì)胞標(biāo)記物鑒定及應(yīng)用現(xiàn)狀[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年46期

8 馬俊勛;肝臟干細(xì)胞的現(xiàn)狀和未來[J];中華肝膽外科雜志;2003年10期

9 孔群芳;羅奮華;薩初拉;包佳婧;劉代艷;吳應(yīng)積;;山羊精原干細(xì)胞的分離純化及鑒定[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年10期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周慶輝,周新華,張泉,王得志,張良,黎莉;整合素α_6亞基在不同年齡段小鼠睪丸精原細(xì)胞表達(dá)觀察[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2005年02期

2 邱峰龍;李碧春;;精原干細(xì)胞介導(dǎo)法制備轉(zhuǎn)基因羊的研究進(jìn)展[J];中國畜牧獸醫(yī);2012年12期

3 趙會(huì)敏;李敏霞;楊歡;張颯;楊小淦;陸陽清;盧克煥;;精原干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2014年02期

4 汪存利;姜宏;孫靜波;;曲細(xì)精管片段培養(yǎng)法和混合細(xì)胞共培養(yǎng)法對(duì)小鼠生精細(xì)胞的增殖分化效應(yīng)[J];東南國防醫(yī)藥;2014年06期

5 何忠杰,方馳華,馬俊勛,張偉,朱新勇,楊麗萍,路艷盟;大鼠肝卵圓細(xì)胞免疫組化定位及超微結(jié)構(gòu)觀察[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2005年04期

6 王春偉;扶曉波;呂妍;趙軍;郭秋萍;張衛(wèi)藝;胡建宏;;牛精原干細(xì)胞研究進(jìn)展[J];家畜生態(tài)學(xué)報(bào);2013年10期

7 張煒;任有蛇;張春香;;哺乳動(dòng)物精原干細(xì)胞研究進(jìn)展及應(yīng)用展望[J];黑龍江動(dòng)物繁殖;2014年04期

8 何文艷;劉樹賢;姜慧卿;;肝干細(xì)胞的基礎(chǔ)及應(yīng)用研究[J];熱帶病與寄生蟲學(xué);2008年01期

9 劉丹;夏娟;劉歡歡;余樹民;;哺乳動(dòng)物精原干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)研究進(jìn)展[J];四川動(dòng)物;2014年02期

10 祝輝;崔毓桂;周作民;;睪丸細(xì)胞生物學(xué)研究進(jìn)展[J];生殖醫(yī)學(xué)雜志;2014年04期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 何忠杰;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為類肝細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2006年

2 馬良宏;精原干細(xì)胞移植治療因大劑量化療所致不育的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

3 廖明德;人表皮干細(xì)胞復(fù)合裸鼠脫細(xì)胞真皮支架構(gòu)建組織工程皮膚及移植的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

4 張磊;環(huán)境因素誘導(dǎo)卵圓細(xì)胞增殖的機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2009年

5 郭丹;人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞系中側(cè)群細(xì)胞的腫瘤干細(xì)胞樣和間質(zhì)細(xì)胞樣特性研究[D];鄭州大學(xué);2013年

6 于雪;水牛精原干細(xì)胞的體外培養(yǎng)與鑒定及轉(zhuǎn)基因干細(xì)胞的異種移植[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 Sibtain Ahmad;[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 何建波;膽管轉(zhuǎn)分化對(duì)斑馬魚肝臟嚴(yán)重受損后的修復(fù)作用[D];西南大學(xué);2014年

9 周勵(lì);大鼠雌性生殖干細(xì)胞建系、生物學(xué)特性研究與應(yīng)用[D];上海交通大學(xué);2014年

10 安俊輝;組蛋白甲基化酶ESET調(diào)控小鼠精原干細(xì)胞存活的機(jī)理研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄧呈亮;溫度影響體外培養(yǎng)大鼠精原細(xì)胞SCF/c-kit增殖通路及細(xì)胞周期[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2011年

2 張晴晴;ALDH1、Notch4和Numb在乳腺病變中的表達(dá)及其與乳腺干細(xì)胞發(fā)育及病變的相關(guān)性研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

3 尹成玉;間充質(zhì)干細(xì)胞治療視神經(jīng)損傷的臨床觀察[D];青島大學(xué);2011年

4 馬俊勛;肝臟干細(xì)胞分離培養(yǎng)及體外細(xì)胞因子調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

5 戴國勝;胎膜來源間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)燒傷愈合的研究[D];中南大學(xué);2008年

6 尤楠;HNF4α在胎肝干細(xì)胞定向分化修復(fù)肝組織損傷中作用機(jī)理的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

7 趙麗花;肝細(xì)胞肝癌組織中肝癌干細(xì)胞與肝癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年

8 寇小琴;豬精原干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

9 李元;不同急性肝損傷模型大鼠卵圓細(xì)胞生物學(xué)差異及自噬的變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

10 李青;小鼠卵巢中生殖干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 畢罡,李彥鋒,李黔生,靳風(fēng)爍,張勇,徐序廣,靳文生,霍文謙;人睪丸精原細(xì)胞的分離和純化[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年11期

2 多曙光;吳應(yīng)積;羅奮華;旭日干;;牛乳腺上皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)及其生物學(xué)特性[J];動(dòng)物學(xué)研究;2006年03期

3 王得志,周新華,張泉,張良;β_1整合素在生后不同年齡階段小鼠睪丸生精細(xì)胞分布的研究[J];解剖學(xué)研究;2003年04期

4 李彥鋒,郭應(yīng)祿,李曉紅,靳風(fēng)爍,江軍,畢罡;人精原干細(xì)胞的磁式分選和功能鑒定[J];中華男科學(xué)雜志;2004年08期

5 白楊;葉哲偉;曾甫清;;大鼠睪丸中c-kit的表達(dá)特點(diǎn)與精原干細(xì)胞的分化[J];中華男科學(xué)雜志;2007年01期

6 劉海超;張巖;于泊洋;吳應(yīng)積;;制備精原干細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞條件的優(yōu)化[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年04期

7 胡甜園;白音巴圖;羅奮華;吳應(yīng)積;;綿羊cdh1基因cDNA全編碼區(qū)的克隆及序列分析[J];生物技術(shù)通報(bào);2011年09期

8 張巖;羅奮華;劉林洪;薩初拉;于泊洋;吳應(yīng)積;;大鼠精原干細(xì)胞的高效分離和純化方法[J];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2011年05期

9 蔣祥龍,范立青,朱文兵,曾亞榮,盧光王秀;CD117(c-kit)在人類精液生精細(xì)胞中表達(dá)研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2005年02期

10 劉玲;朱化彬;王琛;郝海生;趙學(xué)明;馮榮;杜衛(wèi)華;秦彤;劉巖;王棟;;精原干細(xì)胞移植相關(guān)技術(shù)研究進(jìn)展[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2012年11期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張浩波;精子凋亡與男性不育相關(guān)系列研究[D];山東大學(xué);2007年

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 赫崇巖,趙玉珍,王慶,高金方;生物樣品~(13)C的轉(zhuǎn)化和質(zhì)譜分析技術(shù)[J];質(zhì)譜學(xué)雜志;1985年02期

2 彭運(yùn)生;;全國~(15)N質(zhì)譜分析技術(shù)經(jīng)驗(yàn)交流會(huì)(簡(jiǎn)訊)[J];北京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1985年02期

3 尹會(huì)聽;王潔;;二次離子質(zhì)譜分析技術(shù)及應(yīng)用研究[J];光譜實(shí)驗(yàn)室;2008年02期

4 陳煥文;胡斌;張燮;;復(fù)雜樣品質(zhì)譜分析技術(shù)的原理與應(yīng)用[J];分析化學(xué);2010年08期

5 ;海外化工[J];上海化工;1999年15期

6 王雙;徐占成;徐姿靜;;利用大體積進(jìn)樣技術(shù)與質(zhì)譜技術(shù)聯(lián)合分析中國白酒中的微量香味成分[J];釀酒;2014年01期

7 孫雷;畢言鋒;張?bào)P;徐倩;汪霞;王樹槐;;飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技術(shù)及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J];中國獸藥雜志;2009年07期

8 周南;;第14屆歐洲分析會(huì)議[J];分析試驗(yàn)室;2009年05期

9 何志壯;;一種新的聯(lián)合分析技術(shù)——ICP-MS[J];分析試驗(yàn)室;1986年02期

10 周南;;第2屆天然和合成大分子的分離和鑒定國際會(huì)議(Ⅰ)[J];分析試驗(yàn)室;2006年01期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 龍開明;湯磊;賈寶亭;劉雪梅;楊天麗;劉釗;;亞皮克量級(jí)钚的質(zhì)譜分析技術(shù)[A];2005年全國無機(jī)質(zhì)譜、同位素質(zhì)譜和質(zhì)譜儀器學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)論文集[C];2005年

2 杜金騰;劉敏;;質(zhì)譜分析技術(shù)在化學(xué)分析中的應(yīng)用研究[A];第三屆空間材料及其應(yīng)用技術(shù)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2011年

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本文編號(hào)：695173