發(fā)布時間：2017-08-18 14:44

  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用iTRAQ質(zhì)譜分析技術(shù)對小鼠精原干細胞標(biāo)志物進行動態(tài)研究與篩選

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【摘要】：目的:利用i TRAQ蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)檢測各年齡階段小鼠精原干細胞(SSCs)蛋白的表達,進一步分析SSCs標(biāo)志物表達的動態(tài)變化,運用生物信息學(xué)蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫篩選并發(fā)現(xiàn)新的標(biāo)志物。方法:以健康雄性C57BL/6小鼠為研究對象,按照鼠齡不同分為8組,無菌提取各組小鼠睪丸組織,采用復(fù)合酶消化、免疫磁珠分選(MACS)的方法純化SSCs后提取蛋白,利用雙向電泳及蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)并結(jié)合蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫對各組蛋白質(zhì)進行分析鑒定。結(jié)果:質(zhì)譜實驗共得到譜圖248 510張,通過Mascot軟件進行分析,共鑒定到1 132種蛋白。以蛋白豐度差異倍數(shù)達到1.2倍以上,且經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗P0.05視為存在差異性蛋白,8組共檢測到差異蛋白298種。鑒定到目前已知的SSCs標(biāo)志物9種(PCNA、GFRα1、CDH1、Annexin A7、UCHL1、VASA、CD49f、CD29、PLZf),通過各組對比獲得在不同鼠齡段內(nèi)表達變化趨勢,其中GFRα1、CD49f、CD29在SSCs中的變化趨勢與以往文獻一致,并篩選出10種蛋白質(zhì)(P63、CD71、CD98、K19、ACE、K18、K15、K17、SH2、SH3)作為SSCs標(biāo)志物進一步研究的對象。結(jié)論:SSCs內(nèi)的蛋白隨著小鼠鼠齡的變化表達存在差異,i TRAQ蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)可以對SSCs蛋白質(zhì)組學(xué)信息進行分析與比較,獲得各鼠齡階段差異性表達蛋白,為進一步分析和研究這些差異性蛋白的功能與作用提供了新的方法。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院泌尿外科;寧夏醫(yī)科大學(xué)生育力保持省部共建教育部重點實驗室;寧夏醫(yī)科大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 精原干細胞 蛋白質(zhì)組學(xué) 生物標(biāo)記物 相對和絕對定量的等量異位標(biāo)簽
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81241143)~~
【分類號】：R321.1;O657.63
【正文快照】： Supported by a grant from National Natural Science Foundation of China(81241143).Correspondece to:MA Liang-hong,email:mmm1770@163.comReceived:November 1,2014;accepted:January 29,2015相對和絕對定量的等量異位標(biāo)簽(isobaric tagsfor relative and absolute quan

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本文編號：695173