本文關(guān)鍵詞：Exendin-4對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷的保護(hù)作用

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【摘要】：目的：研究艾塞那肽（exendin-4，Ex-4）對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（humanumbilical vein endothelial cells；HUVECs）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激損傷的保護(hù)作用。 方法：含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液在5%CO2培養(yǎng)箱37℃貼壁培養(yǎng)HUVECs，待細(xì)胞平鋪至培養(yǎng)瓶底部80%左右時(shí)，采用內(nèi)源性過氧化氫酶抑制物（endogenous peroxidase blocking solution；EPBS）誘導(dǎo)HUVECs凋亡，觀察Ex-4拮抗HUVECs凋亡的作用。實(shí)驗(yàn)分成4組，每組8瓶，包括①正常對照組(n=8)：不做任何處理；②Ex-4處理組(n=8)：(Ex-4，8μg/ml，45min)；③E PBS處理組(n=8)：(EPBS，，100μL/mL，30min)；④Ex-4預(yù)處理+EPBS處理組(n=8)：Ex-4預(yù)處理(8μg/mL，45min)后，加EPBS(100μL/mL，30min)。激光共聚焦確認(rèn)HUVECs上存在胰高血糖素樣肽-1受體(glucagon-like peptide-1receptor，GLP-1R)；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率，評價(jià)EPBS誘導(dǎo)HUVECs凋亡情況，以及Ex-4預(yù)處理對EPBS誘導(dǎo)HUVECs凋亡的影響。Westernblot檢測CLNX、IRE1a、CHOP和Bax蛋白表達(dá)情況，探討Ex-4拮抗HUVECs凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡蛋白的關(guān)系。 結(jié)果：HUVECs上有GLP-1受體表達(dá)。EPBS處理組和正常對照組比較，EPBS能顯著增加HUVECs的凋亡率[(52.27±3.66)%vs (7.25±0.62)%, P0.01]；Ex-4預(yù)處理+EPBS處理組與EPBS處理組比較，Ex-4可使EPBS誘導(dǎo)的HUVECs凋亡率明顯降低[(37.77±2.86)%vs(52.27±3.66)%, P0.01]。Ex-4處理組和正常對照組比較，Ex-4明顯抑制CLNX、IRE1a、CHOP和Bax蛋白的表達(dá)（0.68±0.06vs1.00±0.05,P0.01；0.52±0.10vs1.00±0.06, P0.01；0.64±0.10vs1.00±0.12,P0.01；0.68±0.05vs1.00±0.06, P0.01）；EPBS處理組和正常對照組比較，EPBS能增加CLNX、IRE1a、CHOP和Bax蛋白的表達(dá)(1.76±0.16vs1.00±0.05, P0.01；2.48±0.28vs1.00±0.06, P0.01；4.58±0.32vs1.00±0.12, P0.01；2.25±0.10vs1.00±0.06, P0.01)。Ex-4預(yù)處理+EPBS處理組和EPBS處理組比較，Ex-4預(yù)處理可使EPBS誘導(dǎo)的CLNX、IRE1a、CHOP和Bax蛋白的表達(dá)顯著降低(0.42±0.05vs1.76±0.16,P0.01；0.66±0.08vs2.48±0.28, P0.01；1.65±0.12vs4.58±0.32,P0.01；1.48±0.08vs2.25±0.10, P0.01)。 結(jié)論：Ex-4預(yù)處理對EPBS誘導(dǎo)的HUVEC凋亡有明顯抑制作用，其抑制作用與降低CLNX、IRE1a、CHOP和Bax蛋白的表達(dá)相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 細(xì)胞凋亡 內(nèi)源性過氧化氫酶抑制物 艾塞那肽
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-8
• 摘要8-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-15
• 1. 材料和方法15-19
• 1.1 材料15
• 1.2 方法15-18
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理18-19
• 2. 結(jié)果19-27
• 2.1 GLP-1 受體在 HUVECs 的表達(dá)19-20
• 2.2 HUVECs 凋亡的檢測20-22
• 2.3 Western blot 檢測各組蛋白變化表達(dá)22-27
• 3. 討論27-29
• 4. 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-35
• 文獻(xiàn)綜述35-44
• 參考文獻(xiàn)38-44
• 致謝44-45
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文45-46

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳杰萍;郭志新;齊偉;俞媛賢;杜時(shí)晶;劉晉津;;艾塞那肽通過下調(diào)p22phox、NOX4和TGF-β1減輕1型糖尿病大鼠主動脈的氧化應(yīng)激損傷[J];中國動脈硬化雜志;2013年08期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王喜梅;Sitagliptin對缺氧環(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 鄭洲;代謝手術(shù)改善肥胖合并2型糖尿病患者血管舒張功能及相關(guān)機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

2 葉菲;艾塞那肽與沙格列汀聯(lián)合二甲雙胍治療2型糖尿病患者的療效與安全性比較[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號：678427