本文關鍵詞：細粒棘球蚴表位質粒的構建和噬菌體展示

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【摘要】：目的合成Eg95T-B聯(lián)合表位肽段,通過噬菌體展示技術獲得含不同聯(lián)合表位的肽段,為細粒棘球蚴病的多抗原表位疫苗的研制奠定基礎。方法采用DNAman軟件設計3對相應引物,分別擴增各段聯(lián)合表位的核苷酸序列,連接PMD18-T載體,PCR擴增測序正確的序列,然后用T4連接酶將各段外源基因重組到M13KE噬菌體載體上,構建M13KE/Eg95-1、M13KE/Eg95-2和M13KE/Eg95-3質粒,轉入大腸埃希菌ER2738感受態(tài)細胞中,運用PCR方法對插入序列進行初步鑒定,測序確定序列正確且無基因突變。使各段基因所對應的外源肽融合表達于M13KE噬菌體PⅢ蛋白上,通過PEG/NaCl沉淀法提純重組噬菌體。結果成功構建了M13KE/Eg95-1 M13KE/Eg95-2與M13KE/Eg95-3噬菌體展示系統(tǒng),PCR擴增Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3片段分別為192、168和222bp,與預期大小一致。結論成功構建了T細胞和B細胞聯(lián)合表位的噬菌體展示系統(tǒng),為抗原表位的篩選奠定了基礎。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院新疆重大疾病醫(yī)學重點實驗室-省部共建國家重點實驗室;新疆醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院;
【關鍵詞】： Eg 表位質粒 噬菌體展示系統(tǒng)
【基金】：國家自然科學基金項目(No.31160194;81260253;30960358;81160200;81060135) 新疆自治區(qū)自然科學基金項目(No.2012211A034)
【分類號】：R392
【正文快照】： 細粒棘球蚴病(echinococcosis)又稱囊型包蟲病(cystic echinococcosis,CE),是一種人畜共患慢性寄生蟲病,由細粒棘球蚴引起。該病在世界范圍內廣泛流行[1],嚴重威脅家畜業(yè)的發(fā)展,也給人類的健康帶來重大的影響。目前仍缺少有效治療棘球蚴病的治療方法[2-3],疫苗研究成為當前研

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本文編號：656609