本文關(guān)鍵詞：細(xì)粒棘球蚴表位質(zhì)粒的構(gòu)建和噬菌體展示

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【摘要】：目的合成Eg95T-B聯(lián)合表位肽段,通過噬菌體展示技術(shù)獲得含不同聯(lián)合表位的肽段,為細(xì)粒棘球蚴病的多抗原表位疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。方法采用DNAman軟件設(shè)計3對相應(yīng)引物,分別擴(kuò)增各段聯(lián)合表位的核苷酸序列,連接PMD18-T載體,PCR擴(kuò)增測序正確的序列,然后用T4連接酶將各段外源基因重組到M13KE噬菌體載體上,構(gòu)建M13KE/Eg95-1、M13KE/Eg95-2和M13KE/Eg95-3質(zhì)粒,轉(zhuǎn)入大腸埃希菌ER2738感受態(tài)細(xì)胞中,運(yùn)用PCR方法對插入序列進(jìn)行初步鑒定,測序確定序列正確且無基因突變。使各段基因所對應(yīng)的外源肽融合表達(dá)于M13KE噬菌體PⅢ蛋白上,通過PEG/NaCl沉淀法提純重組噬菌體。結(jié)果成功構(gòu)建了M13KE/Eg95-1 M13KE/Eg95-2與M13KE/Eg95-3噬菌體展示系統(tǒng),PCR擴(kuò)增Eg95-1、Eg95-2、Eg95-3片段分別為192、168和222bp,與預(yù)期大小一致。結(jié)論成功構(gòu)建了T細(xì)胞和B細(xì)胞聯(lián)合表位的噬菌體展示系統(tǒng),為抗原表位的篩選奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院新疆重大疾病醫(yī)學(xué)重點實驗室-省部共建國家重點實驗室;新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： Eg 表位質(zhì)粒 噬菌體展示系統(tǒng)
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.31160194;81260253;30960358;81160200;81060135) 新疆自治區(qū)自然科學(xué)基金項目(No.2012211A034)
【分類號】：R392
【正文快照】： 細(xì)粒棘球蚴病(echinococcosis)又稱囊型包蟲病(cystic echinococcosis,CE),是一種人畜共患慢性寄生蟲病,由細(xì)粒棘球蚴引起。該病在世界范圍內(nèi)廣泛流行[1],嚴(yán)重威脅家畜業(yè)的發(fā)展,也給人類的健康帶來重大的影響。目前仍缺少有效治療棘球蚴病的治療方法[2-3],疫苗研究成為當(dāng)前研

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周翔,詹金彪,毛獻(xiàn)榮,王克夷;從噬菌體展示隨機(jī)肽庫中篩選豌豆凝集素的結(jié)合肽[J];浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年05期

2 王雙,孫志偉,杜威世,張錦超,俞煒源;新型pⅨ噬菌體展示系統(tǒng)的建立及初步評價[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2005年05期

3 黃躍龍;李俠;許靜;劉俊霞;宋增璇;盧光t;;噬菌體展示抗體微型文庫的構(gòu)建[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2006年06期

4 吳國球,沈子龍;噬菌體展示載體的構(gòu)建[J];中國藥科大學(xué)學(xué)報;2002年06期

5 孟露露,柳川;不同靶標(biāo)的噬菌體展示肽庫篩選的研究新進(jìn)展[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2002年02期

6 郭莉,湯永民;噬菌體展示系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2005年03期

7 王森;高亞男;歐水平;楊明;;噬菌體展示肽在促進(jìn)藥物透過皮膚和血腦屏障中的應(yīng)用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年06期

8 蔡學(xué)忠;田鍔;;噬菌體展示定位和噬菌體展示工程[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);1998年01期

9 董金華;唐玉海;喬寧;韓金宏;董美華;董益陽;;噬菌體展示抗克倫特羅抗體文庫的構(gòu)建及單克隆抗體的篩選[J];生物技術(shù)通報;2014年02期

10 楊海捷;段光杰;劉友生;陳銳;余德文;楊宇;;運(yùn)用噬菌體展示隨機(jī)肽庫篩選與內(nèi)毒素結(jié)合的高親和性多肽[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2008年24期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋震宇;劉金明;何金桃;孫帥;石耀軍;李浩;陸珂;林矯矯;岳城;;東方田鼠血清篩選噬菌體展示抗原對小鼠日本血吸蟲病免疫效果觀察[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

2 楊華;劉忠華;楊煥森;王潔;沙巍;胡忠義;;結(jié)核特異性血清標(biāo)志物的篩選研究[A];中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病學(xué)分會2010年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2010年

3 李娜;張利寧;高飛;王群;;CD28拮抗性類肽的篩選及其生物活性測定[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

4 劉新平;張曉光;韓炯;李福洋;王吉村;藥立波;;噬菌體展示的小肽序列差異對TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞毒作用的影響[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會第八屆會員代表大會暨全國學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

5 李淑婷;馬秋蘭;陳彪;;噬菌體展示法篩選a-synuclein相關(guān)基因的研究[A];第6次全國微生物學(xué)與免疫學(xué)大會論文摘要匯編[C];2004年

6 楊棟強(qiáng);于海濤;張野;李_g;王偉;蔣偉;蘇雯靜;白雪帆;;應(yīng)用噬菌體展示從七肽展示庫篩選β3整合素受體拮抗劑[A];第四屆中國醫(yī)師協(xié)會感染科醫(yī)師大會暨傳染病診治高峰論壇、浙江省醫(yī)學(xué)會肝病、感染病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2011年

7 黃巍;李凌波;韓玲;楊渝珍;;用重組TACE胞外功能域從噬菌體展示隨機(jī)15肽庫篩選TACE的抑制肽[A];湖北省暨武漢生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會第八屆會員代表大會和第十五次學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2004年

8 梁坤;李瑤;褚泰偉;;~(99m)Tc放射性標(biāo)記噬菌體及生物分布[A];第九屆全國核化學(xué)與放射化學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2010年

9 黃巍;李凌波;韓玲;楊渝珍;;用重組TACE胞外功能域從噬菌體展示隨機(jī)15肽庫篩選TACE的抑制肽[A];湖北省生物工程學(xué)會2004年年會學(xué)術(shù)報告及論文摘要匯編[C];2004年

10 范獻(xiàn)軍;寧保安;白家磊;彭媛;柳明;高志賢;;T7噬菌體展示阿特拉津抗體庫的構(gòu)建和篩選[A];第七次全國分析毒理學(xué)大會暨第四屆分析毒理專業(yè)委員會第二次會議論文摘要集[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 丁艷麗;BLyS_（134-285）對噬菌體展示文庫的篩選及其受體突變體的研究[D];沈陽藥科大學(xué);2005年

2 柴雅明;LSB-1噬菌體水解酶重組技術(shù)及應(yīng)用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 王欣梅;大腸桿菌f2噬菌體分子印跡膜的制備、評價和應(yīng)用[D];華中科技大學(xué);2011年

4 郭永超;噬菌體展示介導(dǎo)的免疫擴(kuò)增病原檢測方法研究[D];中國科學(xué)院研究生院（武漢病毒研究所）;2007年

5 李娜;CD28拮抗性類肽、CD137結(jié)合肽的篩選及生物活性測定[D];山東大學(xué);2006年

6 宗憲磊;KGF和TGF-β1噬菌體模擬肽改善創(chuàng)面愈合質(zhì)量的實驗研究[D];山東大學(xué);2010年

7 陳紅巖;提高和延長裸DNA介導(dǎo)的人凝血Ⅸ（hFⅨ）在小鼠中的表達(dá)及M13的噬菌體基因轉(zhuǎn)移體系的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 茹貝貝;噬菌體展示實驗數(shù)據(jù)的預(yù)處理研究[D];電子科技大學(xué);2013年

2 朱雷;多肽介導(dǎo)的膜Ⅰ型基質(zhì)金屬蛋白酶的標(biāo)記與定量[D];吉林大學(xué);2008年

3 徐容;重組Ig結(jié)合分子噬菌體展示文庫的構(gòu)建及選擇研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2004年

4 蘇全平;噬菌體作為疫苗載體誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子類型的研究[D];東北師范大學(xué);2007年

5 呂萌;一株含新裂解酶的大腸桿菌噬菌體基因組測序及其裂解酶的活性檢測[D];吉林大學(xué);2015年

6 施洪喜;Fba1蛋白及展示其表位的雜合噬菌體應(yīng)用于癌癥患者血清白色念珠菌抗體的檢測[D];東北師范大學(xué);2015年

7 何金桃;抱雌溝蛋白篩選日本血吸蟲成蟲噬菌體展示cDNA文庫的研究[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 黃琰;瑞氏木霉纖維素二糖水解酶CBHI噬菌體展示系統(tǒng)的構(gòu)建[D];山東大學(xué);2005年

9 趙佳慧;細(xì)胞間粘附分子1特異性靶向結(jié)合肽的篩選及其生物學(xué)功能研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2003年

10 龔婷;對蝦養(yǎng)殖環(huán)境中TCBS類群細(xì)菌多樣性分析及蝦源氣單胞菌噬菌體生物學(xué)特性研究[D];國家海洋局第三海洋研究所;2014年

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本文編號：656609