抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒結構蛋白單克隆抗體的制備和功能分析
本文關鍵詞:抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒結構蛋白單克隆抗體的制備和功能分析
更多相關文章: 發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV) 核蛋白(NP) 糖蛋白(GP) 單克隆抗體
【摘要】:為制備抗發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)結構蛋白的單克隆抗體,本研究用滅活純化的SFTSV病毒顆粒免疫BALB/c小鼠,利用雜交瘤技術獲得分別分泌抗糖蛋白單抗和核蛋白單抗的雜交瘤細胞株。用免疫熒光法和免疫沉淀方法對制備的單克隆抗體的抗原特異性進行鑒定,并初步進行單抗效價、中和活性及親和力等功能分析。結果顯示,通過細胞融合和克隆化,共篩選出13株穩(wěn)定分泌抗糖蛋白(Glycoprotein,GP)單抗和7株穩(wěn)定分泌抗核蛋白(Nucleoprotein,NP)單抗的雜交瘤細胞株。免疫熒光和免疫沉淀鑒定顯示獲得的單抗有良好的抗原特異性?笹P單抗中6株針對Gn,7株針對Gc,大部分的間接免疫熒光(Indirect immunofluorescence assay,IFA)滴度在1 280~20 480之間,其中4株抗Gn單抗具有中和活性。獲得的7株抗NP單抗均與NP特異性結合,IFA滴度范圍在5 120~20 480,均無中和活性。此外,經非競爭ELISA檢測的兩株抗GP單抗(1C8和1G8)均有較高親和力。本研究為SFTS診斷方法的發(fā)展及SFTSV致病機制研究奠定了基礎。
【作者單位】: 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所衛(wèi)生部醫(yī)學病毒和病毒病重點實驗室;
【關鍵詞】: 發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(SFTSV) 核蛋白(NP) 糖蛋白(GP) 單克隆抗體
【基金】:“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項:發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒滅活疫苗的研制(2013ZX09102029) 國家自然科學基金:SFTS布尼亞病毒轉錄調控元件的鑒定及功能研究(31270201)
【分類號】:R392;R373
【正文快照】: 發(fā)熱伴血小板減少綜合征(Sever fever withthrombocytopenia syndrome,SFTS)是我國首次發(fā)現(xiàn)和命名的具有重要公共衛(wèi)生意義的新發(fā)傳染病。臨床表現(xiàn)主要為急性發(fā)熱伴血小板和白細胞減少,常伴有胃腸道癥狀,神經癥狀,多功能臟器損傷等癥狀。目前已確定該新發(fā)傳染病病原為布尼亞病
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