本文關(guān)鍵詞：小鼠腹腔巨噬細(xì)胞不同分離方法的比較

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【摘要】：目的比較不同方法分離的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的生物學(xué)特性并找出最優(yōu)方法。方法采用3種方法分離小鼠腹腔巨噬細(xì)胞:5%淀粉肉湯小鼠腹腔注射3 d后灌洗(5%淀粉肉湯組);直接DMEM液腹腔灌洗(無(wú)血清DMEM組);含75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗(75%血清DMEM組),每組6只小鼠。觀察各組巨噬細(xì)胞形態(tài)、計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量、流式細(xì)胞儀測(cè)細(xì)胞純度、臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)細(xì)胞存活率、劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)遷移能力及ELISA檢測(cè)脂多糖(LPS)刺激后巨噬細(xì)胞分泌TNFα、IL-6及IL-1β的水平。結(jié)果 3組巨噬細(xì)胞的形態(tài)、純度、存活率相似,75%血清DMEM組巨噬細(xì)胞數(shù)量為(80.47±0.82)×105個(gè),明顯多于5%淀粉肉湯組(5.64±0.31)×105個(gè)及無(wú)血清DMEM組(2.63±0.42)×105個(gè)(P0.05);75%血清DMEM組巨噬細(xì)胞遷移能力明顯高于其他兩組(P0.05);75%血清DMEM組巨噬細(xì)胞分泌TNFα(15.51±0.51)ng/m L、IL-6(415.33±1.55)pg/m L、IL-1β(421.01±2.64)pg/m L,均多于5%淀粉肉湯組TNFα(10.50±0.50)ng/m L、IL-6(386.33±1.52)pg/m L、IL-1β(375.33±2.51)pg/m L(P0.05),也多于無(wú)血清DMEM組TNFα(9.56±0.25)ng/m L、IL-6(384.66±1.15)pg/m L、IL-1β(393.34±2.62)pg/m L(P0.05)。結(jié)論 75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗是一個(gè)比較好的分離小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的方法。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室;第二軍醫(yī)大學(xué);第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)海醫(yī)院脊柱外科;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細(xì)胞 小鼠 遷移 細(xì)胞因子
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 巨噬細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要細(xì)胞成分,具有抗感染、抗腫瘤和參與免疫應(yīng)答、免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)功能[1-2]。巨噬細(xì)胞來(lái)源于骨髓,廣泛分布于機(jī)體各種組織中,如肝、脾、骨髓、胸腺、胸腔、腹腔等。近年來(lái)關(guān)于巨噬細(xì)胞的研究越來(lái)越多,如何獲得數(shù)量充足、功能良好的巨噬細(xì)胞至關(guān)重

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8 葉金善;環(huán)氧化酶-2/前列腺素E_2在血管緊張素Ⅱ刺激巨噬細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

9 閆坤;前列腺素E1對(duì)小鼠子宮巨噬細(xì)胞表型和功能活性的影響[D];河南師范大學(xué);2011年

10 汪韶君;扇貝裙邊糖胺聚糖對(duì)巨噬細(xì)胞脂蛋白代謝及脂蛋白受體表達(dá)的影響研究[D];青島大學(xué);2006年

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