本文關(guān)鍵詞：重組9型腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)染動脈粥樣硬化模型小鼠主動脈:最佳在體表達(dá)時間點(diǎn)的確定

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【摘要】：背景:重組9型腺相關(guān)病毒載體對心肌組織具有較高的親和力,關(guān)于攜帶增強(qiáng)型綠色熒光蛋白報告基因的重組9型腺相關(guān)病毒(recombinant adeno-associated virus serotype 9-enhanced green fluorescent protein,r AAV9-e GFP)在動脈粥樣硬化模型小鼠主動脈中的表達(dá)情況還不確定。目的:探索攜帶r AAV9-e GFP轉(zhuǎn)染動脈粥樣硬化模型小鼠主動脈最佳的在體表達(dá)時間點(diǎn)。方法:給予30只Apo E-/-小鼠連續(xù)高脂飲食飼養(yǎng)16周建立為動脈粥樣硬化模型,然后隨機(jī)取其中25只通過尾靜脈注射轉(zhuǎn)染5.0×1011 vg(virus genomes)r AAV9-e GFP,另5只作為對照組給予生理鹽水。轉(zhuǎn)染病毒的動脈粥樣硬化模型小鼠分別于轉(zhuǎn)染后14,21,28,35,60 d處死,留取主動脈組織,應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡觀察增強(qiáng)型綠色熒光蛋白熒光表達(dá)情況,Western blot法檢測主動脈增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的蛋白表達(dá),觀察增強(qiáng)型綠色熒光蛋白體內(nèi)表達(dá)情況,確定病毒在體表達(dá)最佳時間點(diǎn)。結(jié)果與結(jié)論:r AAV9-e GFP可有效轉(zhuǎn)染動脈粥樣硬化模型小鼠主動脈血管,增強(qiáng)型綠色熒光蛋白可在主動脈組織中表達(dá),其表達(dá)強(qiáng)度隨著轉(zhuǎn)染時間的增加而逐漸增強(qiáng),于轉(zhuǎn)染35 d時表達(dá)最強(qiáng),60 d趨于穩(wěn)定,各時間點(diǎn)主動脈斑塊中增強(qiáng)型綠色熒光蛋白表達(dá)的水平差異有顯著意義(P0.001)。表明r AAV9-e GFP可有效在動脈粥樣硬化模型Apo E-/-小鼠主動脈中表達(dá),r AAV9-e GFP可成為動脈粥樣硬化治療的最佳載體。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心;
【關(guān)鍵詞】： 病毒 綠色熒光蛋白質(zhì)類 模型 動物 動脈粥樣硬化 實驗動物 心臟及血管損傷模型 組織構(gòu)建 型腺相關(guān)病毒 主動脈 轉(zhuǎn)染 Apo E-/-小鼠 國家自然科學(xué)基金
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81160042)~~
【分類號】：R543.5;R-332
【正文快照】： 南省西平縣人,漢族,新疆醫(yī)科大學(xué)在讀碩士,主要從事冠狀動脈粥樣硬化性心臟病基礎(chǔ)及臨床方面的研究。通訊作者:楊毅寧,博士,主任醫(yī)師,教授,博士生導(dǎo)師,新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心,新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市8300542015.05.014[http://www.crter.org](2015)05-00733-06

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1 張W，

本文編號：637559