骨形態(tài)發(fā)生蛋白7轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞再生骨組織
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【摘要】:背景:骨形態(tài)發(fā)生蛋白7具有促進骨髓間充質(zhì)干細胞分裂增殖的作用,在誘導(dǎo)新骨形成方面有重要的研究意義。目的:觀察攜帶人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7慢病毒載體轉(zhuǎn)染后骨髓間充質(zhì)干細胞骨形態(tài)發(fā)生蛋白7蛋白及mR NA的表達。方法:提取并培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,通過形態(tài)學(xué)和細胞表面標(biāo)記進行鑒定;構(gòu)建攜帶人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7的慢病毒載體,轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,提取RNA后采用RT-PCR的方法檢測骨形態(tài)發(fā)生蛋白7mR NA水平相對表達量的變化,Western blotting檢測骨形態(tài)發(fā)生蛋白7蛋白水平相對表達量的變化。結(jié)果與結(jié)論:成功構(gòu)建了攜帶骨形態(tài)發(fā)生蛋白7基因的慢病毒載體PLV-sfG FP(2A)-BMP7,重組載體質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染至大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞中,轉(zhuǎn)染組的骨形態(tài)發(fā)生蛋白7 m RNA和蛋白表達高于空載體組和空白組,差異有顯著性意義(P0.05),說明外源性骨形態(tài)發(fā)生蛋白7基因被有效整合到骨髓間充質(zhì)干細胞并進行表達。
【作者單位】: 山東省中醫(yī)藥研究院;武警江蘇總隊醫(yī)院南京分院;山東中醫(yī)藥大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: 骨髓 間質(zhì)干細胞 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 慢病毒感染 干細胞 骨髓干細胞 骨髓間充質(zhì)干細胞 慢病毒載體 轉(zhuǎn)染 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81273776) 山東省科技發(fā)展專項(2014GSF118026)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 文章亮點:1實驗通過構(gòu)建攜帶人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7慢病毒載體,轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞,取得了較理想的轉(zhuǎn)染效率,瞬時表達結(jié)果與骨形態(tài)發(fā)生蛋白要求吻合。2實驗采用Western bllotting和RT-PCR方法證實了人骨形態(tài)發(fā)生蛋白7基因表達質(zhì)?沙晒D(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞并進行表達,基因
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本文編號:624144
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