本文關(guān)鍵詞：ERK5信號通路在髓核細胞退變的作用研究

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【摘要】：目的：探索髓核細胞中ERK5信號通路的作用，，是否能為退變椎間盤提供潛在的分子治療途徑。 方法：1、從正常椎間盤組織分離髓核細胞，應(yīng)用免疫組化及免疫熒光的方法檢測ERK5及P-ERK5在髓核細胞的表達，XTT法檢測不同濃度的BIX02188對髓核細胞的細胞毒性；2、髓核細胞分組給予不同濃度的BIX02188抑制2小時后，加入H2O2刺激5分鐘，Westernblot檢測P-ERK5的表達；3、髓核細胞分組：5μM BIX0218組和空白對照組，48小時后RT-PCR檢測Ⅱ型膠原，糖胺多糖，SOX9基因mRNA的表達；4、髓核細胞分組：5μMBIX0218組和空白對照組，48小時后ELISA法檢測IL-6、NO、MMP-3、TIMP-1的表達。 結(jié)果：1、ERK-5、P-ERK5在髓核細胞的細胞核及胞漿均有表達，10μM以下的BIX02188無細胞毒性；2、200μM的H2O2能激活髓核細胞P-ERK5的表達，BIX02188濃度在3-10μM刺激髓核細胞能抑制髓核細胞P-ERK5的表達；3、抑制髓核細胞ERK5信號通路48小時后Ⅱ型膠原，糖胺多糖，SOX9表達明顯降低，與空白對照組相比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(n=5,P0.05)；4、抑制髓核細胞ERK5信號通路48小時后NO、IL-6、MMP3表達增高，與空白對照組相比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(n=5,P0.05)，TIMP-1無明顯變化。 結(jié)論：1、ERK5及P-ERK5在髓核細胞的胞核及胞漿中均有表達；2、抑制ERK5信號通路后，髓核細胞Ⅱ型膠原，糖胺多糖，SOX9基因表達降低；NO、IL-6、MMP3表達升高，TIMP-1無明顯變化。
【關(guān)鍵詞】：髓核細胞 細胞外調(diào)節(jié)信號激酶5(ERK5) BIX02188 椎間盤
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 前言8-13
• 第一部分 髓核細胞的分離，免疫組化檢測 ERK5 及 P-ERK5 在髓核細胞的表達，XTT 檢測 BIX02188 的細胞毒性13-19
• 材料與方法13-19
• 1.1、實驗材料13-15
• 1.2、實驗方法15-17
• 1.3、實驗結(jié)果17-19
• 第二部分 不同濃度的抑制劑 BIX02188 對髓核細胞 ERK5 的影響19-25
• 材料與方法19-25
• 2.1 、實驗材料19-21
• 2.2 、實驗方法21-24
• 2.3 、實驗結(jié)果24-25
• 第三部分 抑制 ERK5 的激活，髓核細胞Ⅱ型膠原，糖胺多糖和 SOX9 的基因轉(zhuǎn)錄水平的檢測25-29
• 材料與方法25-29
• 3.1 、實驗材料25-26
• 3.2 、實驗方法26-28
• 3.3 、實驗結(jié)果28-29
• 第四部分 抑制 ERK5 的激活，髓核細胞細胞外液中 NO、IL-6、MMP-3、TIMP-1 的檢測29-37
• 材料與方法29-37
• 4.1 、實驗材料29-32
• 4.2 、實驗方法32-34
• 4.3 、實驗結(jié)果34-37
• 討論37-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-47
• 附錄47-49
• 縮略詞表49-50
• 在校期間發(fā)表論文50-51
• 致謝51

【參考文獻】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 邢孟永;P-p38MAPK和Ⅱ型膠原在退變腰椎間盤組織中表達的實驗研究[D];大理學(xué)院;2012年

2 程勇軍;SOX9基因與人頸椎間盤退變相關(guān)性的初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

本文編號：621920