本文關(guān)鍵詞：粉塵螨過敏原脂肪酶的表達、純化及生物信息學(xué)分析

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【摘要】：為克隆原核表達并純化出粉塵螨過敏原脂肪酶蛋白,鑒定其免疫學(xué)活性,并分析其分子特征.通過重組合成粉塵螨新過敏原脂肪酶基因,與p ET-28a載體連接后轉(zhuǎn)化大腸埃希菌E.coli Top10,用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達重組新過敏原脂肪酶蛋白;經(jīng)鎳柱親和層析純化出粉塵螨重組脂肪酶蛋白,用Western Blot、ELISA方法檢測其免疫原性.用生物信息學(xué)軟件預(yù)測其理化性質(zhì)、二級結(jié)構(gòu),并構(gòu)建分子進化樹.成功表達純化出高純度的粉塵螨重組脂肪酶蛋白,十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)結(jié)果顯示表達重組產(chǎn)物分子質(zhì)量約為40 k Da,與理論值一致,純化后的表達產(chǎn)物經(jīng)Western blot印跡檢測有明顯條帶顯示.信息學(xué)分析顯示蛋白二級結(jié)構(gòu)由α螺旋(16.38%)、延伸主鏈(18.93%)、無規(guī)則卷曲(64.69%)組成.成功原核表達出粉塵螨過敏原脂肪酶蛋白,并純化獲得較高純度及較強免疫學(xué)活性的重組脂肪酶蛋白,為塵螨過敏性疾病的特異性診斷和免疫治療奠定理論基礎(chǔ).
【作者單位】： 深圳大學(xué)過敏反應(yīng)與免疫學(xué)研究所;南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 粉塵螨 過敏原 重組脂肪酶 生物信息學(xué)分析
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31328014,31400786) 廣東省高等學(xué)校國際暨港澳臺科技合作創(chuàng)新平臺項目(2012gjhz0009) 深圳市科技計劃國際科技合作項目(GJHZ20130408174112021) 深圳市科技計劃基礎(chǔ)研究項目(JCYJ20130329110735981,JCYJ20120613173233810) 深圳市南山區(qū)研發(fā)項目(KC2012JSYB0003A)資助
【分類號】：R392
【正文快照】： 0引言近年來,過敏性疾病諸如過敏性鼻炎、哮喘等發(fā)病率逐年升高,成為全球關(guān)注的公眾衛(wèi)生學(xué)問題.其中塵螨是室內(nèi)主要的過敏原,過敏體質(zhì)者吸人其排泄物與死亡殘體后可誘發(fā)I型變態(tài)反應(yīng)[1-2],塵螨過敏原是過敏性哮喘的主要誘因,雖然各個國家之間有地域差異,但是在北美、南美、歐洲

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 劉曉宇;張強;吉坤美;李荔;劉志剛;;粉塵螨疫苗免疫治療過敏性鼻炎小鼠鼻黏膜的電鏡觀察[J];江西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2011年05期

2 李鐘鳴;鄔玉蘭;劉志剛;;粉塵螨Der f15的基因克隆與其表達載體的構(gòu)建[J];江西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2013年02期

3 李維中;王月明;吳瑩瑩;鄔玉蘭;劉志剛;;粉塵螨第十六類變應(yīng)原的克隆表達、純化及免疫原性鑒定[J];南昌大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年12期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 李鐘鳴;鄔玉蘭;劉志剛;;粉塵螨Der f15的基因克隆與其表達載體的構(gòu)建[J];江西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2013年02期

2 謝佳星;張清玲;羅煒;賴克方;;小鼠鼻氣道阻力檢測方法的建立[J];廣西醫(yī)學(xué);2014年04期

3 萬倩;陳獻雄;孫新;鐘政榮;劉志剛;;粉塵螨Der f4基因的克隆和蛋白分子特征分析[J];江西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2014年03期

4 楊小猛;王俊軼;陳濤;劉志剛;楊平常;;塵螨腸道微生物蛋白核苷二磷酸激酶的克隆、表達及純化[J];江西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2014年05期

5 李丹青;常惠玉;駱寒冰;;布地奈德聯(lián)用沙丁胺醇霧化吸入結(jié)合內(nèi)服中藥湯劑治療過敏性鼻炎療效觀察[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2012年12期

6 張子強;;花粉阻隔劑聯(lián)合塵螨清除劑與丙酸氟替卡松鼻噴劑治療變應(yīng)性鼻炎的臨床隨機對照研究[J];醫(yī)學(xué)綜述;2014年18期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉志奇;TFH細胞及其相關(guān)細胞因子在變應(yīng)性鼻炎小鼠模型中的表達和意義[D];華中科技大學(xué);2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐瑞霞,蔣鶴齡;塵螨浸液治療31例變態(tài)反應(yīng)性疾病療效觀察[J];安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;1997年01期

2 劉志剛;劉瑞濤;賴仞;李荔;夏立新;;粉塵螨抗細菌活性物質(zhì)的分離與鑒定[J];江西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2011年01期

3 劉曉宇;張強;吉坤美;李荔;劉志剛;;粉塵螨疫苗免疫治療過敏性鼻炎小鼠鼻黏膜的電鏡觀察[J];江西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2011年05期

4 黃丹;張羅;韓德民;;變應(yīng)性鼻炎流行病學(xué)研究的常用方法[J];中國耳鼻咽喉頭頸外科;2007年01期

5 孫勁旅,陳軍;塵螨過敏原分子生物學(xué)特性[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊);2003年05期

6 孔維佳;許庚;董震;張羅;程雷;張u&琳;;變應(yīng)性鼻炎的流行病學(xué)與治療[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2009年08期

7 劉立林;徐敏;賈麗麗;楊波;楊紅萍;王慧;;過敏性紫癜患兒變應(yīng)原的分析及護理[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2010年12期

8 ;Science Letters:A synthetic Toll-like receptor 2 ligand decreases allergic immune responses in a mouse rhinitis model sensitized to mite allergen[J];Journal of Zhejiang University(Science B:An International Biomedicine & Biotechnology Journal);2008年04期

9 李朝品;陶莉;楊慶貴;賀驥;劉小燕;;安徽省房舍和儲藏物孳生粉螨物種多樣性研究[J];中國病原生物學(xué)雜志;2008年03期

10 楊李;王運剛;崔玉寶;;塵螨變應(yīng)原免疫生物學(xué)研究進展[J];中國病原生物學(xué)雜志;2011年02期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;塵螨過敏原的基礎(chǔ)研究及其產(chǎn)業(yè)化項目介紹[J];廣東科技;2010年18期

2 趙仕勇;張靜;陸權(quán);;塵螨過敏原的分子生物學(xué)研究概況[J];實用兒科臨床雜志;2007年21期

3 孫勁旅;陳軍;張宏譽;;塵螨過敏原的交叉反應(yīng)性[J];昆蟲學(xué)報;2006年04期

4 付亞南;王靜;向莉;;哮喘患兒家庭內(nèi)塵螨過敏原分布特征及其臨床意義[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2012年06期

5 付亞南;向莉;;室內(nèi)塵螨過敏原監(jiān)控及其對兒童哮喘防控效果研究進展[J];環(huán)境與健康雜志;2013年03期

6 孫勁旅,張宏譽,應(yīng)萬濤,王京蘭,錢小紅;戶塵螨過敏原指紋圖譜研究[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報;2002年04期

7 孫勁旅,陳軍;塵螨過敏原分子生物學(xué)特性[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊);2003年05期

8 劉婉瑩;向軍儉;劉志剛;;不同塵螨過敏原誘導(dǎo)組胺釋放能力分析[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年05期

9 張光霽;高中山;吳善東;劉奕;;兩種方法檢測戶塵螨過敏原特異性IgE的對比研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2013年06期

10 孫寶清;韋妮莉;李靖;江梅;鐘南山;;蟑螂過敏患者對蠶蛾與塵螨過敏原體外檢測研究[J];中華哮喘雜志(電子版);2009年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 鄒澤紅;李輝嚴;傅意玲;馬三梅;陳惠芳;王永飛;陶愛林;;重組低過敏原性粉塵螨過敏原的表達及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會2010年全國變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議暨中歐變態(tài)反應(yīng)高峰論壇參會指南/論文匯編[C];2010年

2 孫勁旅;張宏譽;王京蘭;應(yīng)萬濤;錢小紅;;戶塵螨過敏原雙向免疫印跡指紋圖譜研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第二次全國變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

3 甄世祺;張惠力;周明浩;陳曉東;尹立紅;陳連生;要茂盛;;塵螨過敏原Derp和Derf自然電荷量的初步研究[A];2011年全國環(huán)境衛(wèi)生學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

4 付亞南;王靜;向莉;;哮喘患兒家庭內(nèi)塵螨過敏原分布特征及其臨床意義[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三屆全國兒科呼吸學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

5 付亞南;王靜;向莉;;哮喘患兒家庭內(nèi)塵螨過敏原分布特征及其臨床意義[A];中華醫(yī)學(xué)會第十七次全國兒科學(xué)術(shù)大會論文匯編（下冊）[C];2012年

6 沈湘波;劉來昱;趙海金;蔡紹曦;侯長春;高元妹;周曉婷;;塵螨過敏原經(jīng)由PI3K通路促進人支氣管上皮細胞表達血管內(nèi)皮生長因子[A];中華醫(yī)學(xué)會第七屆全國哮喘學(xué)術(shù)會議暨中國哮喘聯(lián)盟第三次大會論文匯編[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 靜雨;發(fā)育期動物呼吸臭氧會引發(fā)哮喘[N];中國醫(yī)藥報;2002年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 孫勁旅;戶塵螨過敏原實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2002年

2 吳奎;屋塵螨過敏原轉(zhuǎn)染樹突狀細胞誘導(dǎo)哮喘小鼠免疫耐受的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

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本文編號：614307