本文關(guān)鍵詞：血管生成素及其突變體與核糖核酸酶抑制因子蛋白的相互作用

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【摘要】：目的研究血管生成素(ANG)突變體與核糖核酸酶抑制因子(RI)的相互作用。方法構(gòu)建p CMV-3×flagANGH13R和p CMV-3×flag-ANGH114R突變體質(zhì)粒;用免疫熒光標(biāo)記結(jié)合共聚焦顯微鏡技術(shù)來(lái)確立RI與ANG突變體蛋白在BIU-87細(xì)胞內(nèi)的定位;用GST融合蛋白沉降技術(shù)檢測(cè)RI與ANG突變體蛋白在細(xì)胞外的相互作用;用免疫共沉淀(Co-IP)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)兩蛋白在人膀胱癌BIU-87細(xì)胞內(nèi)的相互作用。結(jié)果 p CMV-3×flag-ANGH13R和p CMV-3×flag-ANGH114R突變體質(zhì)粒構(gòu)建成功;RI和ANG突變體蛋白存在共定位現(xiàn)象;GST-RI融合蛋白誘導(dǎo)表達(dá)正確,RI和ANG突變體蛋白在原核反應(yīng)體系中存在相互作用;RI與ANG突變體蛋白在真核細(xì)胞內(nèi)存在相互作用。結(jié)論 RI和ANG突變體蛋白在原核反應(yīng)體系和真核細(xì)胞中都存在相互作用,并且兩突變型與RI相互作用存在一定的差異。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)教研室;重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 血管生成素突變體 核糖核酸酶抑制因子 BIU-細(xì)胞
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81372203,81172424)
【分類號(hào)】：R3411
【正文快照】： 核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)是一種重要的胞質(zhì)內(nèi)酸性多功能蛋白,可能參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的RNA水平,能與血管生長(zhǎng)因子緊密結(jié)合,強(qiáng)烈抑制血管生長(zhǎng)[1]。血管生成素(angioge-nin,ANG)是一個(gè)強(qiáng)有力的血管生成因子,在體內(nèi)和體外均具有強(qiáng)烈的誘發(fā)血管生成的活性,能有

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本文編號(hào)：613140