本文關(guān)鍵詞：測(cè)量和分析纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的新方法

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【摘要】：氣管中纖毛的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)（CBA）通過(guò)清除呼吸道中的痰液和病原體扮演著重要的作用。因?yàn)槔w毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)極其復(fù)雜以至于不能僅僅通過(guò)頻率來(lái)描述其特征，所以我們用激光共聚焦顯微鏡的線掃模式記錄纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)并且定義了六個(gè)參數(shù)來(lái)反應(yīng)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。當(dāng)測(cè)量纖毛運(yùn)動(dòng)的小鼠纖毛細(xì)胞時(shí)，這六個(gè)參數(shù)的值都大于零。 接下來(lái)我們用10微摩爾腺嘌呤核苷三磷酸刺激細(xì)胞，同時(shí)記錄細(xì)胞內(nèi)鈣水平和纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。我們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)鈣水平先增高，緊接著纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)增強(qiáng)。在這六個(gè)參數(shù)之中，頻率、幅度和積分面積顯著增高，然而上升時(shí)間、下降時(shí)間和半數(shù)衰變時(shí)間明顯下降。這些結(jié)果表明六個(gè)參數(shù)適合評(píng)估纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)而且升高的細(xì)胞內(nèi)鈣水平可能增強(qiáng)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。 接下來(lái)我們用機(jī)械刺激纖毛尖端，并且用我們建立的方法觀察各個(gè)參數(shù)的變化。結(jié)果表明機(jī)械刺激介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣水平和纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的變化不僅和腺嘌呤核苷三磷酸引導(dǎo)的變化相似，而且這種變化可以被10微摩爾的鈣離子螯合劑BAPTA-AM處理十分鐘阻斷掉。此外，在無(wú)鈣條件下，，我們檢測(cè)到相同的阻斷效果，當(dāng)向浴槽中加入2毫摩爾的鈣離子后可以重新恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)鈣水平的增加和纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的增強(qiáng)。 綜上所述，我們提供了一種能夠同時(shí)測(cè)量和分析纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)并監(jiān)控細(xì)胞內(nèi)鈣水平的方法。并且用這個(gè)方法證明了當(dāng)機(jī)械刺激纖毛尖端時(shí)，細(xì)胞外鈣離子的進(jìn)入使細(xì)胞內(nèi)鈣水平升高，轉(zhuǎn)而促發(fā)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的增強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】：纖毛細(xì)胞 纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng) 細(xì)胞內(nèi)鈣 機(jī)械刺激
【學(xué)位授予單位】：中南民族大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R363
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 第一章 緒論9-18
• 1.1 纖毛概述9-16
• 1.1.1 纖毛的定義9-10
• 1.1.2 纖毛的結(jié)構(gòu)與功能10-12
• 1.1.3 測(cè)量和分析纖毛運(yùn)動(dòng)的方法12-15
• 1.1.4 鈣對(duì)氣管纖毛運(yùn)動(dòng)的調(diào)控機(jī)制15-16
• 1.2 本文構(gòu)想16-18
• 1.2.1 研究目的16-17
• 1.2.2 研究?jī)?nèi)容17-18
• 第二章 測(cè)量和分析纖毛運(yùn)動(dòng)的新方法18-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料18
• 2.1.1 Balb/C 小鼠18
• 2.1.2 主要儀器和試劑18
• 2.1.3 溶液配制18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法18-20
• 2.2.1 纖毛細(xì)胞的分離18-19
• 2.2.2 纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的測(cè)量和分析19-20
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-23
• 2.3.1 激光共聚焦線掃描和纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的計(jì)算20-22
• 2.3.2 纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的記錄與分析22-23
• 2.4 小結(jié)23-24
• 第三章 纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)與細(xì)胞內(nèi)鈣同時(shí)記錄24-30
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料24-25
• 3.1.1 Balb/C 小鼠24
• 3.1.2 主要儀器和試劑24
• 3.1.3 生理溶液24-25
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法25-26
• 3.2.1 纖毛細(xì)胞的分離25
• 3.2.2 纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的測(cè)量和分析25
• 3.2.3 細(xì)胞內(nèi)鈣的測(cè)量25
• 3.2.4 ATP 和 Ionomycin 的給藥與 patch 實(shí)驗(yàn)25-26
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-29
• 3.3.1 ATP 介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣升高和纖毛運(yùn)動(dòng)水平的增強(qiáng)26-28
• 3.3.2 纖毛運(yùn)動(dòng)頻率的增加導(dǎo)致幅度的增加28-29
• 3.4 小結(jié)29-30
• 第四章 機(jī)械刺激增加細(xì)胞內(nèi)鈣水平增強(qiáng)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)30-36
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料30-31
• 4.1.1 Balb/C 小鼠30
• 4.1.2 主要儀器和試劑30
• 4.1.3 生理溶液30-31
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法31-33
• 4.2.1 纖毛細(xì)胞的分離31
• 4.2.2 纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的測(cè)量和分析31
• 4.2.3 細(xì)胞內(nèi)鈣的測(cè)量31-32
• 4.2.4 機(jī)械刺激操作過(guò)程32-33
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-35
• 4.3.1 機(jī)械刺激增加細(xì)胞內(nèi)鈣水平增強(qiáng)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)33-34
• 4.3.2 細(xì)胞內(nèi)鈣水平的增加調(diào)控機(jī)械刺激介導(dǎo)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)增強(qiáng)34-35
• 4.3.3 機(jī)械刺激通過(guò)鈣內(nèi)流使纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)增強(qiáng)35
• 4.4 小結(jié)35-36
• 結(jié)果與討論36-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 致謝42-43
• 附錄 研究生期間發(fā)表的文章43

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 鄒霞;李筠;周建峰;;斑馬魚胚胎左右不對(duì)稱發(fā)育的研究現(xiàn)狀與展望[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年10期

2 劉書霞;耿軼釗;張輝;紀(jì)青;;驅(qū)動(dòng)蛋白的結(jié)構(gòu)與功能[J];生命科學(xué)研究;2013年06期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 韓康;杜氏鹽藻鞭毛內(nèi)運(yùn)輸?shù)鞍譏FT88基因的克隆及功能分析[D];鄭州大學(xué);2013年

2 劉聰輝;鲆鰈魚Nodal信號(hào)途徑相關(guān)基因的克隆與胚胎發(fā)育早期表達(dá)分析[D];中國(guó)海洋大學(xué);2013年

3 鄒霞;斑馬魚redd1基因在心臟左右不對(duì)稱發(fā)育中功能的初步研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2013年

4 王雪松;FGF-10和NF-κBp65在變應(yīng)性鼻炎鼻黏膜中的表達(dá)及相關(guān)性研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號(hào)：612199