本文關(guān)鍵詞：膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）恒河猴模型及藥物治療

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【摘要】：本項(xiàng)研究主要分為兩個(gè)部分：第一部分，用牛II型膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎模型的建立；第二部分，采用已上市且在臨床上已驗(yàn)證具有治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis，RA）作用的藥物西樂葆（CELEBREX，塞來昔布膠囊）和益賽普（ETANERCEP，注射用重組人II型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白）來驗(yàn)證膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎模型是否可用于RA治療藥物的評(píng)價(jià)。 第一部分牛II型膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎模型的建立 目的：采用牛II型膠原誘導(dǎo)建立恒河猴關(guān)節(jié)炎模型。方法：采用完全弗氏佐劑制備的牛II型膠原懸濁液免疫6只恒河猴，每周測(cè)定動(dòng)物的血液學(xué)和生化學(xué)指標(biāo)，采用半定量評(píng)分系統(tǒng)觀察動(dòng)物的體重及行為學(xué)狀態(tài)并評(píng)分，X線檢查骨關(guān)節(jié)病變程度。結(jié)果：注射膠原后12-15天（D12-D15），恒河猴均出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥表現(xiàn)，背部注射部位皮膚潰爛出血，臨床表現(xiàn)為采食速度減慢，體重下降率超過14%或者呈增長緩慢、雙足行為異常。動(dòng)物表現(xiàn)分為：①2/6只動(dòng)物在免疫后第一周到第二周發(fā)展成急性活動(dòng)期關(guān)節(jié)炎（全身臨床評(píng)分3-4分），病程發(fā)展迅速，行動(dòng)遲緩且不喜攀爬繼而指關(guān)節(jié)紅腫，血清中CRP、WBC、NEUT、MONO和抗II型膠原IgG水平顯著或極顯著升高(P≤0.05或P≤0.01)，HGB、ALB顯著降低，D26-D40關(guān)節(jié)嚴(yán)重腫脹，動(dòng)物食欲廢絕；②4/6只動(dòng)物屬于慢性活動(dòng)期，病程呈慢性進(jìn)行性發(fā)展，全身臨床評(píng)分維持2-3分。在免疫后70天觀察期間，CRP、WBC、NEUT、 MONO輕度升高，血清抗II型膠原IgG水平顯著升高(P≤0.05)。Ｘ線征象與臨床RA相似，雙手和雙足掌指關(guān)節(jié)（MCP）/跖趾關(guān)節(jié)和近段指關(guān)節(jié)（PIP）/近段趾關(guān)節(jié)出現(xiàn)初期或中期病變特征，表現(xiàn)為受累關(guān)節(jié)周圍軟組織腫脹、局限性骨質(zhì)疏松、關(guān)節(jié)間隙狹窄和骨質(zhì)侵蝕以關(guān)節(jié)邊緣骨質(zhì)侵蝕最具有特異性，病變以手或足遠(yuǎn)端、近端指間關(guān)節(jié)為主，其中雙足關(guān)節(jié)破壞先于雙手關(guān)節(jié)。結(jié)論：膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制和表現(xiàn)與臨床相似。 第二部分西樂葆、益賽普對(duì)膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎的治療。 目的：驗(yàn)證西樂葆、益賽普對(duì)膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎的治療作用。 方法：對(duì)3只RA模型動(dòng)物（1/3只急性活動(dòng)期動(dòng)物，2/3只慢性活動(dòng)期動(dòng)物）在免疫后第四周開始用西樂葆（9mg kg-1，1次/天，po.）治療；對(duì)5只RA模型動(dòng)物在膠原免疫后D26皮下注射益賽普（1mg kg-1，2次/周，sc.）。6只動(dòng)物作為模型對(duì)照組觀察，免疫后每周檢測(cè)動(dòng)物的生化學(xué)指標(biāo)的變化，，采用半定量評(píng)分系統(tǒng)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)動(dòng)物的體重及行為狀態(tài)并評(píng)分；給藥前和給藥結(jié)束分別檢測(cè)：X線檢查骨關(guān)節(jié)病變程度，血清細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ的變化，血清中抗牛II型膠原IgG的變化。 結(jié)果：西樂葆（9mg kg-1）連續(xù)給藥30天治療3只活動(dòng)性RA猴，對(duì)炎癥控制起效較慢，連續(xù)給藥D16-D30可抑制CRP、WBC、NEUT升高，同時(shí)緩解ALB、HGB降低；X線表明可使受累關(guān)節(jié)局部軟組織腫脹緩解（3/3），但對(duì)骨保護(hù)方面的作用不明顯，特別是雙足骨破壞繼續(xù)發(fā)展（3/3）。 益賽普（1mg kg-1）治療5只急性活動(dòng)期RA猴，在給藥兩周后（共四針），動(dòng)物體重出現(xiàn)較大的反彈，生化指標(biāo)逐漸恢復(fù)；在給藥D20（第5針），4/5只動(dòng)物由于免疫低下繼發(fā)感染出現(xiàn)炎性細(xì)胞升高，停藥后給予西樂葆（9mg kg-1，1次/天，治療13天），動(dòng)物體重呈增長趨勢(shì)（臨床評(píng)分降低至1~2分），同時(shí)MONO呈降低趨勢(shì)，但WBC、NEUT持續(xù)保持高水平。與給藥前四肢關(guān)節(jié)的X光平片比較，動(dòng)物關(guān)節(jié)軟組織腫脹改善明顯，5/5只動(dòng)物的關(guān)節(jié)面骨質(zhì)損傷發(fā)展不明顯。 結(jié)論：西樂葆可以控制膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎的炎癥發(fā)展，但其對(duì)關(guān)節(jié)面的骨損害沒有保護(hù)作用且療效的產(chǎn)生較為緩慢，關(guān)節(jié)炎癥狀的明顯改善出現(xiàn)在給藥一個(gè)月左右。益賽普可以控制中度或重度的關(guān)節(jié)炎癥狀，對(duì)關(guān)節(jié)面的損害有減緩作用，療效產(chǎn)生的時(shí)程短，給藥兩周后動(dòng)物的癥狀得到了明顯改善。
【關(guān)鍵詞】：膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎 恒河猴 生化指標(biāo)X光平片 西樂葆 益賽普
【學(xué)位授予單位】：四川抗菌素工業(yè)研究所
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R684.3;R-332
【目錄】：

• 摘要7-10
• Abstract10-14
• 前言14-17
• 一、牛 II 型膠原誘導(dǎo)恒河猴關(guān)節(jié)炎的研究17-31
• 1 引言17
• 2 材料17-19
• 2.1 動(dòng)物17-18
• 2.2 試劑18
• 2.2.1 試劑一18
• 2.2.2 試劑二18
• 2.2.3 試劑三18
• 2.2.4 ELISA 試劑盒18
• 2.3 其他材料18-19
• 2.4 儀器19
• 3 方法19-22
• 3.1 懸濁液準(zhǔn)備與動(dòng)物免疫19
• 3.2 免疫后的臨床評(píng)分19-20
• 3.3 血液學(xué)與血清生化測(cè)定20
• 3.4 關(guān)節(jié)組織病理學(xué)檢查20
• 3.5 血清抗牛 II 型膠原 IgG 測(cè)定20-22
• 4 結(jié)果22-29
• 4.1 免疫后體重與臨床相關(guān)性評(píng)分分析22-25
• 4.2 血生化指標(biāo)分析25-26
• 4.3 病理學(xué)檢查結(jié)果26-27
• 4.4 X 線照片診斷27-28
• 4.5 抗牛 II 型膠原 IgG 測(cè)定結(jié)果28-29
• 5 討論29-31
• 二、西樂葆、益賽普對(duì) CIA 恒河猴模型臨床特征改變的試驗(yàn)研究31-48
• 1 引言31-32
• 2 材料32-33
• 2.1 動(dòng)物32
• 2.2 藥物32
• 2.3 其他試劑32-33
• 2.4 儀器33
• 3 方法33-37
• 3.1 模型建立33-34
• 3.1.1 制備和免疫方法33
• 3.1.2 致炎后的動(dòng)物入選標(biāo)準(zhǔn)33-34
• 3.2 給藥方案34
• 3.3 各種指標(biāo)的檢查與頻率34-36
• 3.3.1 臨床癥狀的觀察34
• 3.3.2 注射部位的觀察34-35
• 3.3.3 體重測(cè)定35
• 3.3.4 攝食量測(cè)定35
• 3.3.5 四肢關(guān)節(jié)檢查35
• 3.3.6 X 線照片診斷35-36
• 3.4 細(xì)胞因子試驗(yàn)36-37
• 3.4.1 血清 TNF-α含量測(cè)定36-37
• 3.4.2 血清 IFN-γ含量測(cè)定37
• 3.5 數(shù)據(jù)處理37
• 4 結(jié)果37-47
• 4.1 體重與臨床評(píng)分相關(guān)性分析37-40
• 4.2 與炎癥相關(guān)的血液學(xué)指標(biāo)分析40-42
• 4.3 CRP 水平變化42-43
• 4.4 ALB 與 HGB 水平的變化43-44
• 4.5 X 線平片診斷結(jié)果44-45
• 4.6 西樂葆、益賽普對(duì) IFN-γ、 TNF-α和抗牛 II 型膠原 IgG 的影響45-47
• 5 討論47-48
• 結(jié)論48-49
• 試驗(yàn)創(chuàng)新性49-50
• 附錄：實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)列表50-51
• 附圖51-53
• 參考文獻(xiàn)53-55
• 致謝55-56
• 作者在讀期間科研成果簡介56-57
• 綜述57-66
• 參考文獻(xiàn)64-66
• 中英文縮略詞66

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1 常君;鈴兒;;恒河猴基因組測(cè)序工作完成[J];中國醫(yī)藥生物技術(shù);2007年03期

2 陳海芳;廖進(jìn)民;李文德;吳天秀;黃韌;;恒河猴大腦與人類大腦的比較解剖學(xué)研究[J];中國臨床解剖學(xué)雜志;2007年04期

3 鄭霞;楊萍;顧性初;;新型長效干擾素α_(2b)對(duì)恒河猴的毒性研究[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年01期

4 楊佳佳;;恒河猴腎的個(gè)體發(fā)育以及腎發(fā)育過程中的標(biāo)志物[J];天津醫(yī)藥;2011年10期

5 高進(jìn)權(quán);佟巍;張麗芳;劉先菊;王艷蓉;向志光;劉云波;;恒河猴離乳幼猴B病毒動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2013年02期

6 蘇漁光;潘漢朋;潘寶華;;恒河猴難產(chǎn)手術(shù)三例[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);1986年01期

7 朱智勇,翁景清,付桂明,姚順榮;流行性出血熱病毒感染恒河猴的動(dòng)態(tài)觀察[J];中國公共衛(wèi)生;1987年01期

8 錢開明;黃龍海;馬行福;;恒河猴水腫處置三例[J];上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué);1987年04期

9 皮至明;;恒河猴對(duì)多次注射人單克隆抗體的反應(yīng)[J];國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè));1988年01期

10 黃妙輝;吳麗瑟;黃秀蘭;嚴(yán)以齊;;恒河猴血清鋅、銅含量[J];福建醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1992年03期

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1 王冬平;隨麗華;洪寶慶;孫巖松;李慕;李桂軍;凡秀;;恒河猴與食蟹猴血液生理和生化指標(biāo)的比較[A];中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)第七屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

2 魏強(qiáng);王健偉;張揚(yáng)清;鮑琳琳;涂新明;蔣虹;高紅;叢U

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