本文關(guān)鍵詞：豬孤雌胚胎來(lái)源單倍體細(xì)胞的研究

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【摘要】：哺乳動(dòng)物單倍體細(xì)胞系可以為基因功能研究和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)提供有力的工具。為了得到豬單倍體細(xì)胞,本研究主要進(jìn)行了三組實(shí)驗(yàn)。首先我們利用染色體核型分析技術(shù)檢測(cè)了豬早期(8細(xì)胞到16細(xì)胞)孤雌胚胎的基因組完整性。所分析的總共81個(gè)卵裂球染色體中期相中48.15%為遺傳完整的單倍體細(xì)胞�；谝陨蠈�(shí)驗(yàn)結(jié)果的支持,兩種主流的獲得大量單倍體細(xì)胞的技術(shù)被應(yīng)用到了本實(shí)驗(yàn)中,包括利用孤雌激活的卵母細(xì)胞得到類(lèi)胚胎干細(xì)胞和建立孤雌胎兒成纖維細(xì)胞系�？偣步⒘肆鶄�(gè)孤雌胚胎類(lèi)胚胎干細(xì)胞系。通過(guò)染色體分析,在這六個(gè)細(xì)胞系中沒(méi)有觀(guān)察到包含有19條染色體的豬單倍體細(xì)胞。其中的四個(gè)細(xì)胞系主要由多于38條染色體的多整倍體細(xì)胞組成�？偣步⒘�28個(gè)豬孤雌胎兒細(xì)胞系,染色體分析顯示其主要細(xì)胞類(lèi)型為19到38條染色體的非整倍體(59.48-60.91%),二倍體細(xì)胞也占有較高的比率(16.17%-22.73%),明顯不同于豬孤雌類(lèi)胚胎干細(xì)胞系。在27%的豬孤雌胎兒成纖維細(xì)胞系中觀(guān)察到了低比例的單倍體細(xì)胞(3.4%-8.3%)。但是這些細(xì)胞都不是真正的單倍體細(xì)胞,雖然都含有19條染色體,但都存在染色體的隨機(jī)丟失與補(bǔ)充。通過(guò)流式細(xì)胞篩選獲得很低的單倍體細(xì)胞富集效率(5.63%,5.97%)和較高的二倍體細(xì)胞富集效率(86.36%,89.06%)。富集之后的二倍體細(xì)胞呈正常的二倍體核型,經(jīng)基因芯片檢測(cè)父源印記基因表達(dá)水平極低。 綜合上述結(jié)果可見(jiàn)：從豬早期孤雌胚胎可以得到少量的真正的單倍體細(xì)胞。體外培養(yǎng)豬孤雌胚胎得到的類(lèi)胚胎干細(xì)胞和通過(guò)分離體內(nèi)發(fā)育的孤雌胎兒所得到的成纖維細(xì)胞中的單倍體細(xì)胞呈現(xiàn)異常核型。豬二倍體孤雌胎兒成纖維細(xì)胞可能是研究父系印跡基因的良好的材料。
【關(guān)鍵詞】：豬孤雌胚胎 單倍體細(xì)胞 卵裂球 類(lèi)胚胎干細(xì)胞 胎兒成纖維細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R321
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-7
• 前言7-9
• 1.材料9-11
• 2.方法11-28
• 3.結(jié)果28-52
• 4.討論52-56
• 5.結(jié)論56-58
• 參考文獻(xiàn)58-66
• 文獻(xiàn)綜述66-73
• 附錄73-74
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章74-75
• 致謝75

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Production of porcine cloned transgenic embryos expressing green fluorescent protein by somatic cell nuclear transfer[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2006年02期

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本文編號(hào)：604672