本文關鍵詞：短期凍存兔骨髓間充質干細胞對其增殖及成骨分化潛能的影響

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【摘要】：目的探討短期凍存對兔BMSCs的增殖、生物特征及成骨能力的影響，為進一步研究作基礎。方法第5代兔BMSCs凍存，30d后復蘇、體外培養(yǎng)至第10代，，設相同代數(shù)未凍存的BMSCs為對照組。MTT、細胞周期、細胞表面標志及成骨誘導分化后ALP含量、Ⅰ型膠原及鈣結節(jié)染色作為其增殖、生物特征及成骨能力的評價指標。結果凍存后BMSCs存活率為（84.38±3.78）%，生長潛伏期延長，傳代后逐漸恢復；增殖指數(shù)和G1期細胞所占比例分別為（42.9±3.4）%、（57.0±3.4）%，細胞表面標志CD44陽性率為（93.62±1.05）%，不表達CD45；成骨誘導第7、14dALP含量（U/gprot）分別為6.73±1.92、15.99±4.36，第14、21天，Ⅰ型膠原、鈣結節(jié)茜素紅染色陽性；以上結果與未凍存組相比差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論短期凍存對兔BMSCs增殖、生物特征及成骨分化潛能無明顯影響，凍存后可繼續(xù)進一步研究。
【關鍵詞】：骨髓間充質干細胞 凍存 增殖 生物特性 成骨分化
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R329
【目錄】：

• 目錄3-6
• 中文摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 英漢縮略詞對照表9-11
• 前言11-12
• 1 材料與方法12-32
• 1.1 實驗動物12
• 1.2 主要實驗試劑及材料12-14
• 1.2.1 主要試驗試劑12-14
• 1.2.2 主要試驗耗材14
• 1.3 主要實驗儀器14-15
• 1.4 實驗方法15-32
• 1.4.1 主要液體配制15-17
• 1.4.2 兔 BMSCs 原代分離、培養(yǎng)17-18
• 1.4.3 兔 BMSCs 傳代培養(yǎng)18
• 1.4.4 兔 BMSCs 的冷凍保存18-19
• 1.4.5 兔 BMSCs 復蘇19
• 1.4.6 復蘇細胞的活性檢測19
• 1.4.7 細胞形態(tài)學觀察19-20
• 1.4.8 MTT 比色法繪制生長曲線20
• 1.4.9 細胞周期檢測20
• 1.4.10 兔 BMSCs 表型檢測20-21
• 1.4.11 向成骨細胞分化能力的檢測21-24
• 1.4.11.1 堿性磷酸酶（ ALP ）含量檢測21-22
• 1.4.11.2 Ⅰ型膠原蛋白免疫組織化學染色（SP 法）22-23
• 1.4.11.3 鈣結節(jié)茜素紅染色23-24
• 1.4.12 向成骨細胞分化相關調控因子的檢測24-31
• 1.4.13 觀察指標31
• 1.4.14 統(tǒng)計學分析31-32
• 2 結果32-42
• 2.1 BMSCs 的培養(yǎng)情況32-33
• 2.2 BMSCs 存活率及生長曲線33-34
• 2.3 BMSCs 表面抗原表達情況34-36
• 2.4 BMSCs 細胞周期檢測36-37
• 2.5 ALP 表達情況37-38
• 2.6 Ⅰ型膠原免疫組織化學染色38-39
• 2.7 鈣結節(jié)茜素紅染色39-40
• 2.8 成骨細胞分化相關調控因子的檢測40-42
• 3 討論42-52
• 3.1 BMSCs 的概況及分離培養(yǎng)42-44
• 3.2 BMSCs 的凍存、復蘇44-45
• 3.3 短期凍存后 BMSCs 的生物特性45-48
• 3.4 短期凍存后 BMSCs 向成骨細胞分化的能力48-50
• 3.5 成骨細胞分化相關調控因子的檢測50-52
• 4 結論52-53
• 綜述53-62
• 參考文獻62-74
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄74-75
• 致謝75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：603451