本文關(guān)鍵詞：小鼠主要組織相容性復(fù)合物移植抗原肽的提取與驗證

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【摘要】：目的建立主要組織相容性復(fù)合物(MHC)移植抗原肽提取方法。方法以供體C57BL/6小鼠脾細胞為移植抗原免疫BALB/c受體小鼠,用p H3.3檸檬酸緩沖液洗脫受體小鼠脾細胞MHC結(jié)合抗原肽,用BCA蛋白測定法和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)檢測洗脫液中多肽成分,以小鼠異位心臟移植驗證洗脫液內(nèi)多肽的移植免疫抗原性。結(jié)果弱酸洗脫獲得了微量多肽50μg/108脾細胞,其中含有混雜短多肽。與同系移植組相比,HPLC-MS/MS檢測發(fā)現(xiàn)同種異體移植組洗脫液中出現(xiàn)差異多肽。同系MHC移植抗原肽預(yù)致敏受體心臟移植物中位存活時間為8 d,同種異體MHC移植抗原肽預(yù)致敏受體心臟移植物中位存活時間僅4 d。用同種異體來源的MHC移植抗原肽預(yù)致敏受體,使小鼠心臟移植物中位存活時間顯著縮短。結(jié)論通過供體脾細胞免疫,弱酸洗脫受體脾細胞可獲得MHC移植抗原肽,可用于進一步篩選移植抗原決定簇。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)附屬西京醫(yī)院肝膽外科暨器官移植中心;
【關(guān)鍵詞】： 移植免疫 抗原 抗原決定簇 T淋巴細胞 主要組織相容性復(fù)合物
【基金】：陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計劃項目(2011K12-01-06)
【分類號】：R392
【正文快照】： 移植排斥反應(yīng)本質(zhì)上是受體免疫系統(tǒng)對移植物抗原的特異性免疫應(yīng)答,T細胞免疫應(yīng)答是其主要機制[1-2]。以8~16個氨基酸為核心的抗原決定簇代表了細胞免疫中抗原的“特異性”,是產(chǎn)生T細胞免疫應(yīng)答的根源[3-4]�？乖瓫Q定簇的鑒定是一個復(fù)雜的系統(tǒng)工程,提取移植抗原肽是分離鑒定移

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本文編號：602450