小鼠唾液腺干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法研究
發(fā)布時(shí)間:2017-07-31 18:38
本文關(guān)鍵詞:小鼠唾液腺干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法研究
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【摘要】:目的:建立小鼠唾液腺干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法。方法:從7~8周齡的C57BL/6J小鼠唾液腺分離唾液腺干細(xì)胞,采用懸浮唾液球法培養(yǎng)唾液腺干細(xì)胞,應(yīng)用倒置顯微鏡動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài);細(xì)胞計(jì)數(shù)觀察細(xì)胞生長狀況;免疫熒光檢測LN(層連蛋白)的表達(dá)。結(jié)果:倒置顯微鏡下,接種2 d后細(xì)胞(salispheres)小聚集體明顯增加;接種4 d后唾液腺球直徑逐漸增大,形成直徑約100μm的神經(jīng)球,球周圍無明顯刺突,存在明顯細(xì)胞聚集。接種7 d后唾液腺球周圍存在較多微刺,10 d后球繼續(xù)增長,形狀明顯不同于4 d,表明處于活躍的增殖狀態(tài),唾液腺干細(xì)胞已經(jīng)開始分化。生長曲線結(jié)果顯示隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加,唾液腺球的數(shù)目呈明顯遞增趨勢,同時(shí),唾液腺球的直徑也明顯增大。免疫熒光結(jié)果顯示,培養(yǎng)2 d后,唾液干細(xì)胞球開始表達(dá)LN,培養(yǎng)第4 d后,隨著唾液干細(xì)胞球的增加,層連蛋白表達(dá)更明顯。結(jié)論:應(yīng)用該方法獲得了唾液腺干細(xì)胞,具有成體干細(xì)胞的特征,具有自我更新和多向分化的潛能。
【作者單位】: 南華大學(xué)藥學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院;南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】: 小鼠唾液腺干細(xì)胞 細(xì)胞分離培養(yǎng) 懸浮唾液球 層連蛋白
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81400117) 中國博士后基金項(xiàng)目(2014M562115) 湖南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2015JJ4042) 南華大學(xué)歸國人員科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(2014XQD46)
【分類號】:R329
【正文快照】: Chinese Library Classification(CLC):Q95-3;Q593 Document code:AArticle ID:1673-6273(2015)32-6230-04前言成體干細(xì)胞存在于成年動(dòng)物的許多組織和器官中,其在組織的修復(fù)和再生過程中起著關(guān)鍵的作用。成體干細(xì)胞是指在已分化組織中,具有自我更新和多向分化潛能的未分化細(xì)胞
【相似文獻(xiàn)】
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1 王甜甜;趙樹銘;;干細(xì)胞體外三維培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年06期
2 李歡;高W,
本文編號:600553
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