本文關(guān)鍵詞：大鼠正中隆起Nestin，Sox2和BrdU陽性細(xì)胞的分布及形態(tài)學(xué)研究

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【摘要】：目的：觀察正中隆起的Nestin, Sox2, BudU陽性細(xì)胞的分布及形態(tài)。 方法：選擇健康SD大鼠30只，體重180-200g，隨機分成兩組：①正常組（n=15）；②模型組（n=15）：注射BrdU。 1BrdU標(biāo)記實驗動物模型制備：分別于16:00和18:00，按照50mg/kg劑量對模型組的實驗動物進行腹腔注射BrdU生理鹽水溶液，連續(xù)給藥三天，制備BrdU模型。 2取材和標(biāo)本制備：正常組實驗動物9只，常規(guī)麻醉，經(jīng)心灌注，取材，后固定，浸蠟包埋，選取含正中隆起部分，石蠟切片，厚度為5μm，分別經(jīng)甲苯胺藍染色、Nestin和Sox2免疫組織化學(xué)染色；BrdU模型實驗動物9只，常規(guī)麻醉，經(jīng)心灌注，取材，固定，浸蠟包埋，，選取含正中隆起部分，石蠟切片，厚度為5μm，進行BrdU免疫組織化學(xué)染色，封片后Olympus BX-UCB顯微照相系統(tǒng)觀察照像。 3Nestin, Sox2免疫熒光化學(xué)雙標(biāo)染色步驟:正常組實驗動物6只，常規(guī)麻醉，經(jīng)心灌注，取材，后固定，蔗糖浸泡后選取含正中隆起部分，冰凍切片，厚度為8μm，經(jīng)Nestin, Sox2免疫熒光化學(xué)雙標(biāo)染色，50%甘油封片后Olympus BX-UCB顯微照相系統(tǒng)觀察照像。 4BrdU, Sox2免疫熒光化學(xué)雙標(biāo)染色：BrdU模型動物6只，常規(guī)麻醉，經(jīng)心灌注，取材，后固定，蔗糖浸泡后選取含正中隆起部分，冰凍切片，厚度為8μm，經(jīng)BrdU, Sox2免疫熒光化學(xué)雙標(biāo)染色，50%甘油封片后Olympus BX-UCB顯微照相系統(tǒng)觀察照像。 5統(tǒng)計學(xué)處理：照片的陽性細(xì)胞采用專業(yè)圖像分析軟件Image-ProPlus6.0對陽性細(xì)胞和總細(xì)胞進行計數(shù)，計算陽性率。 結(jié)果： 1甲苯胺藍染色 正常組大鼠下丘腦的冠狀切片顯示正中隆起位于第三腦室的基底部。甲苯胺藍染色后，細(xì)胞核呈藍色，尼氏體呈藍紫色，正中隆起被分為五個層次：室管膜層、室管膜下層、纖維層、網(wǎng)狀層和柵狀層。正中隆起及第三腦室側(cè)壁的室管膜細(xì)胞分為四種不同形態(tài)。正中隆起的腹側(cè)被腺垂體結(jié)節(jié)部覆蓋，ME含有大量毛細(xì)血管。 2免疫組織化學(xué)染色 2.3Nestin染色：ME中央部2/3的室管膜層和室管膜下層，胞核較大，胞質(zhì)為Nestin強陽性；ME兩側(cè)的室管膜層和室管膜下層，胞核較小，胞質(zhì)為Nestin弱陽性；ME纖維層和網(wǎng)狀層有散在分布的粗大Nestin陽性突起，Nestin陽性細(xì)胞胞核較大，散在分布；在柵狀層偶見Nestin陽性細(xì)胞，胞核較大。第三腦室單側(cè)側(cè)壁Nestin陽性細(xì)胞表達率：6.01±5.30%。ME的Nestin陽性細(xì)胞表達率：42.45±3.42%。 2.2Sox2染色：ME室管膜層和室管膜下層的Sox2免疫陽性細(xì)胞緊密排列，ME纖維層和網(wǎng)狀層，Sox2陽性細(xì)胞較稀疏。第三腦室單側(cè)側(cè)壁Sox2陽性細(xì)胞表達率：32.77±7.24%。ME的Sox2陽性細(xì)胞表達率：48.30±5.66%。 2.3BrdU染色：BrdU陽性細(xì)胞在ME的纖維層和網(wǎng)狀層零星分布，少數(shù)位于柵狀層，偶見于室管膜下層。第三腦室單側(cè)側(cè)壁BrdU陽性細(xì)胞表達率：0.12±0.08%。ME的BrdU陽性細(xì)胞表達率：4.17±0.38%。 3免疫熒光化學(xué)染色 3.1Nestin, Sox2雙標(biāo)免疫熒光化學(xué)染色：Nestin陽性胞漿呈綠色熒光，Sox2陽性胞核呈紅色熒光。Nestin和Sox2雙標(biāo)陽性細(xì)胞在ME中央部2/3的室管膜層和室管膜下層密集分布，在ME纖維層和網(wǎng)狀層分布稀疏。 3.2BrdU, Sox2雙標(biāo)免疫熒光化學(xué)染色：BrdU陽性胞核呈綠色熒光，Sox2陽性胞核呈紅色熒光。BrdU和Sox2雙標(biāo)陽性細(xì)胞，細(xì)胞核顏色疊加成為黃綠色，在ME纖維層和網(wǎng)狀層零星分布，少數(shù)位于柵狀層，偶見于室管膜下層。 結(jié)論： 1Nestin陽性細(xì)胞，在ME的室管膜層和室管膜下層分布密集，在纖維層和網(wǎng)狀層分布稀疏。 2Sox2陽性細(xì)胞，在ME室管膜層和室管膜下層分布密集，在纖維層和網(wǎng)狀層分布稀疏；BrdU陽性細(xì)胞在纖維層和網(wǎng)狀層零星分布。 3Nestin和Sox2雙標(biāo)細(xì)胞在ME的室管膜層和室管膜下層分布密集，在纖維層和網(wǎng)狀層分布稀疏；BrdU和Sox2雙標(biāo)細(xì)胞在ME的纖維層和網(wǎng)狀層零星分布。
【關(guān)鍵詞】：正中隆起 神經(jīng)干細(xì)胞 伸長細(xì)胞 Nestin Sox2 BrdU
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R329
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-19
• 結(jié)果19-23
• 附圖23-37
• 附表37-38
• 討論38-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-43
• 綜述 正中隆起伸長細(xì)胞的屏障功能43-56
• 參考文獻51-56
• 致謝56-57
• 個人簡歷57

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊天祝,賈漪濤,馬常升,曹翠麗,李學(xué)平,葛莉;大鼠室周器官的形態(tài)學(xué)觀察[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2002年03期

2 王周南;何澤涌;;伸長細(xì)胞(綜述)[J];山西醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1986年02期

3 劉梅;曹翠麗;馬常升;王麗梅;王榮耕;;實驗性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎大鼠正中隆起室管膜細(xì)胞的變化及意義[J];山東醫(yī)藥;2012年35期

本文編號：600398