本文關(guān)鍵詞：泛耐藥鮑曼不動桿菌與其主動外排泵蛋白的相關(guān)性研究

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【摘要】：目的：了解臨床出現(xiàn)的鮑曼不動桿菌對19種常用抗菌藥物的耐藥情況；探討鮑曼不動桿菌主動外排泵在耐藥方面的作用、基因表達(dá)；觀察外排泵抑制劑改變鮑曼不動桿菌耐藥的情況，指導(dǎo)臨床合理使用抗生素，提高泛耐藥鮑曼不動桿菌治療效果，改善患者預(yù)后有重要意義，同時(shí)為研制開發(fā)新的抗菌藥物提供理論依據(jù)。 方法： 1隨機(jī)收集非重復(fù)鮑曼不動桿菌共142株，并測定19種抗菌藥物的最低抑菌濃度(MIC)：阿米卡星、慶大霉素、氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林、頭孢他啶、亞胺培南、環(huán)丙沙星、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、美羅培南等藥物。 2羰基氰氯苯腙(CCCP)泵抑制劑對菌株MIC的影響：抗生素二倍稀釋系列培養(yǎng)基中聯(lián)用泵抑制劑,同時(shí)制備僅含泵抑制劑的培養(yǎng)基作為生長對照。比較應(yīng)用CCCP泵抑制劑前后MIC值的變化,以加入泵抑制劑后MIC值比不加泵抑制劑降低4倍或以上作為外排泵表型陽性的判定標(biāo)準(zhǔn)。 3對外排泵陽性株進(jìn)行外排泵蛋白基因的檢測和分析：提取外排泵表型陽性株DNA，用PCR擴(kuò)增主動外排系統(tǒng)調(diào)控基因并測序，擴(kuò)增產(chǎn)物以1.5%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳,凝膠成像分析系統(tǒng)對電泳帶進(jìn)行照相和灰度掃描。 4用WHONET統(tǒng)計(jì)軟件和SPSS l3.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理 結(jié)果 1142株臨床鮑曼不動桿菌分離菌株的主要來源分別是是痰液(72.6%)、分泌物(11.3)，而鮑曼不動桿菌菌株高發(fā)于ICU (40.8%)呼吸內(nèi)科(14.8%)。 2142株臨床鮑曼不動桿菌分離菌株對19藥物敏感測定結(jié)果顯示，對多粘菌素B的敏感率100%，四環(huán)素的耐藥率最高94.5%，對諾氟沙星、慶大霉素、頭孢噻肟、氨芐西林耐藥率達(dá)90%以上，亞胺培南和美羅培南耐藥率分別為34.5%、36.6%。共篩選出多重耐藥及泛耐藥菌96株。 3篩選出的96株多重耐藥及泛耐藥鮑曼不動桿菌在加入CCCP前后，慶大霉素耐藥率降低65.63%，耐藥菌株數(shù)減少63株，四環(huán)素、諾氟沙星、頭孢噻肟MIC值降低4倍及以上分別有32株、41株、29株。對四種抗生素MIC值均降低4倍及以上34株。 4從34株鮑曼不動桿菌檢測到adeB、adeR、adeS、adeJ、adeE、abeM基因分別有33株、32株、33株、33株、0株、33株，檢出率分別為97.06%、94.12%、97.06%、97.06%、0.00%、97.06%。 5對adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM基因進(jìn)行測序，，結(jié)果顯示與Genebank中參考菌株序列同源性為100%，未發(fā)現(xiàn)基因變異現(xiàn)象。 結(jié)論： 1臨床鮑曼不動桿菌分離菌株對臨床多種常用的抗菌藥物存在普遍耐藥。 2對篩選的96株多重耐藥及泛耐藥鮑曼不動桿菌進(jìn)行CCCP處理后，34株(35.42%)對最耐藥的四種抗生素的MIC值均降低4倍及以上。 3從34株可能由于外排泵的存在而產(chǎn)生耐藥的鮑曼不動桿菌檢出adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM。 4耐藥基因adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM序列與Genebank參考株序列核苷酸同源性均為100%，未發(fā)現(xiàn)基因變異現(xiàn)象。
【關(guān)鍵詞】：鮑曼不動桿菌 多重耐藥 主動外排系統(tǒng) 外排泵抑制劑 基因檢測 基因分析
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R378
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英文縮寫8-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-16
• 結(jié)果16-19
• 附圖19-25
• 附表25-30
• 討論30-35
• 結(jié)論35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 綜述39-55
• 參考文獻(xiàn)48-55
• 致謝55-56
• 個(gè)人簡歷56

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：598294