本文關(guān)鍵詞：JNK激酶途徑調(diào)控BMP9誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化

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【摘要】：目的：前期研究發(fā)現(xiàn)骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic protein，BMP9)有較強(qiáng)的誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell，MSCs)向成骨分化的潛力，但是其具體的作用機(jī)制還不甚清楚。本課題旨在確認(rèn)絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases，MAPKs）中的JNK（c-Jun N-terminal kinases）激酶途徑對BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的調(diào)控作用及其相關(guān)分子機(jī)制。 方法：利用重組腺病毒將BMP9導(dǎo)入間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2、MEF、C2C12，通過Western印跡和熒光素酶報(bào)告基因檢測JNK的磷酸化水平；利用JNK特異性抑制劑SP600125和RNA干擾技術(shù)抑制JNK活性后，以堿性磷酸酶(ALP)活性測定分析早期成骨指標(biāo)ALP的變化，利用茜素紅S檢測鈣鹽沉積；通過RT-PCR檢測成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子RUNX2和成骨靶基因ID1、ID2、ID3、Col1的表達(dá)；通過Western印跡和熒光素酶報(bào)告基因檢測Smad1/5/8的活性；通過免疫細(xì)胞化學(xué)檢測OCN和OPN的表達(dá)；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證在RNA沉默JNK蛋白激酶后，對BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2異位成骨的影響。 結(jié)果：BMP9可以增強(qiáng)JNK激酶的磷酸化；利用JNK抑制劑SP600125抑制JNK激酶活性后，BMP9誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞的早期成骨指標(biāo)ALP活性以及晚期指標(biāo)鈣鹽沉積、OCN和OPN的表達(dá)均受到抑制，而且經(jīng)典Smad1/5/8的活化也受到抑制。同時(shí)，成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子RUNX2和成骨靶基因ID1、ID2、ID3、Col1的表達(dá)也相應(yīng)受到抑制；RNA干擾沉默JNK基因表達(dá)后，同樣也抑制了BMP9誘導(dǎo)的C3H10T1/2細(xì)胞的ALP活性、鈣鹽沉積和裸鼠皮下異位成骨。 結(jié)論：總之，我們的結(jié)果表明，BMP9可活化JNK激酶途徑，而且JNK活性受到抑制后，，BMP9誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化也受到抑制，表明BMP9可活化JNK激酶途徑從而誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨分化。
【關(guān)鍵詞】：骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(BMP9) 間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs） JNK激酶 成骨分化
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 英漢縮略對照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-12
• 第一部分 JNK 激酶途徑對 BMP9 誘導(dǎo)的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的調(diào)控12-28
• 1 材料與方法12-17
• 2 結(jié)果17-25
• 3 討論25-28
• 第二部分 BMP9 經(jīng) JNK 激酶途徑調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的初步作用機(jī)制28-35
• 1 材料與方法28-31
• 2 結(jié)果31-33
• 3 討論33-35
• 全文總結(jié)35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 文獻(xiàn)綜述39-47
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 致謝47-48
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文48-49

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 徐靜;趙丹;王箭;王文娟;羅進(jìn)勇;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白9通過JNKs激酶途徑調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2013年12期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 田剛;BMP-2在降鈣素基因相關(guān)肽調(diào)控MG63細(xì)胞增殖分化中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 黃曉丹;質(zhì)子泵抑制劑對骨折愈合影響的基礎(chǔ)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 閆欣;正畸牙齒移動(dòng)過程中Follistatin在牙周組織中表達(dá)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

本文編號(hào)：576781