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川芎嗪對(duì)大鼠脊髓損傷模型GAP-43和Survivin表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-07-25 16:24

  本文關(guān)鍵詞:川芎嗪對(duì)大鼠脊髓損傷模型GAP-43和Survivin表達(dá)的影響


  更多相關(guān)文章: 脊髓損傷(SCI) BBB評(píng)分 川芎嗪(TMP) 神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43(GAP-43) Survivin


【摘要】:目的:通過改良Allen's法建立SD大鼠脊髓損傷(Spinal cord injury,SCI)模型,觀察川芎嗪治療組對(duì)大鼠損傷模型的GAP-43和Survivin表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討川芎嗪治療脊髓損傷的可能機(jī)制。 方法:選取健康的成年SD大鼠共72只,雌雄不限,鼠齡約10周,體重約250-270g。隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham operation group S組,n=12)、生理鹽水對(duì)照組(normal saline control groupN組,n=30)、川芎嗪治療組(tetramethylpyrazine treatment group T組,n=30)。然后按術(shù)后大鼠處死時(shí)間再分為1d、3d、7d、14d、21d、28d六個(gè)亞組,在每個(gè)亞組中S組2只大鼠,N組和T組各5只大鼠,N組和T組采用改良Allen's法建立SD大鼠T10節(jié)段脊髓損傷模型,S組只咬除椎板,不打擊,不給藥物;T組術(shù)后30分鐘予以川芎嗪注射劑腹腔給藥(200mg/Kg),每日一次,共用藥5日;N組同等劑量的生理鹽水腹腔注射,給藥時(shí)間同T組,于術(shù)后1d、3d、7d、14d、21d、28d六個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別對(duì)相應(yīng)大鼠進(jìn)行BBB評(píng)分,評(píng)價(jià)大鼠脊髓的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況;然后處死相應(yīng)大鼠,獲取損傷脊髓標(biāo)本,進(jìn)行HE染色以及GAP-43、Survivin免疫組化染色,記錄免疫陽性細(xì)胞數(shù),結(jié)果用SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:1.BBB評(píng)分:BBB評(píng)分T組在第1天和第3天時(shí)間點(diǎn)與N組相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而在第7天、第14天、第21天、第28的時(shí)間點(diǎn)T組BBB評(píng)分高于N組BBB評(píng)分,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中在第7天和第21天的時(shí)間點(diǎn)差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。2.GAP-43表達(dá):S組幾乎沒有GAP-43陽性細(xì)胞表達(dá)。各個(gè)時(shí)間點(diǎn)N組和T組可見明顯陽性細(xì)胞結(jié)構(gòu),GAP-43在損傷后1天即可觀察到明顯表達(dá),在14天達(dá)到高峰,28天仍有表達(dá)。T組分別在第3天、第7天、第14天及第21天的時(shí)間點(diǎn)GAP-43陽性細(xì)胞數(shù)高于N組GAP-43陽性細(xì)胞數(shù),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中第7天、第14天、第21天的時(shí)間點(diǎn)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3.Survivin表達(dá):S組Survivin陽性表達(dá)不明顯。各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的N組及T組可見明顯的Survivin陽性細(xì)胞。Survivin在脊髓損傷后的1天也有明顯表達(dá),7天達(dá)到高峰,28天仍可見有表達(dá)。T組在第1天、第3天、第7天和第14天的時(shí)間點(diǎn)Suvivin的陽細(xì)胞數(shù)高于N組Suvivin的陽細(xì)胞數(shù),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中在第1天和第3天兩時(shí)間點(diǎn)有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論:1.川芎嗪能夠促進(jìn)脊髓損傷后的運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù);2.川芎嗪能夠促進(jìn)脊髓損傷后GAP-43及Suvivin表達(dá)的上調(diào),川芎嗪對(duì)脊髓損傷后神經(jīng)功能的恢復(fù)的促進(jìn)作用可能與此機(jī)制有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:脊髓損傷(SCI) BBB評(píng)分 川芎嗪(TMP) 神經(jīng)生長相關(guān)蛋白-43(GAP-43) Survivin
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R-332;R651.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 英文縮寫對(duì)照表10-11
  • 前言11-14
  • 第一章 材料與方法14-22
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)分組14
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備14-15
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑15
  • 1.4 實(shí)驗(yàn)步驟15-21
  • 1.4.1 SD大鼠脊髓損傷模型的建立15-16
  • 1.4.2 大鼠的飼養(yǎng)和術(shù)后護(hù)理16
  • 1.4.3 BBB評(píng)分16-18
  • 1.4.4 動(dòng)物取材步驟18
  • 1.4.5 石蠟切片制作步驟18-19
  • 1.4.6 HE染色步驟19-20
  • 1.4.7 免疫組化步驟20-21
  • 1.4.8 免疫組化結(jié)果計(jì)數(shù)21
  • 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21-22
  • 第二章 結(jié)果與分析22-26
  • 2.1 一般行為觀察22
  • 2.2 BBB評(píng)分22-23
  • 2.3 組織學(xué)觀察23
  • 2.4 免疫組化GAP-43測定23-24
  • 2.5 免疫組化Survivin測定24-26
  • 第三章 討論26-32
  • 3.1 脊髓損傷模型的建立26-27
  • 3.2 行為學(xué)評(píng)分27-28
  • 3.3 GAP-43與脊髓損傷28-29
  • 3.4 Survivin與脊髓損傷29-30
  • 3.5 川芎嗪與脊髓損傷30-31
  • 3.6 問題與展望31-32
  • 結(jié)論32-33
  • 附圖33-37
  • 參考文獻(xiàn)37-40
  • 綜述40-55
  • 參考文獻(xiàn)51-55
  • 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):572199

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