川芎嗪對大鼠脊髓損傷模型GAP-43和Survivin表達的影響
本文關鍵詞:川芎嗪對大鼠脊髓損傷模型GAP-43和Survivin表達的影響
更多相關文章: 脊髓損傷(SCI) BBB評分 川芎嗪(TMP) 神經(jīng)生長相關蛋白-43(GAP-43) Survivin
【摘要】:目的:通過改良Allen's法建立SD大鼠脊髓損傷(Spinal cord injury,SCI)模型,觀察川芎嗪治療組對大鼠損傷模型的GAP-43和Survivin表達的影響,進一步探討川芎嗪治療脊髓損傷的可能機制。 方法:選取健康的成年SD大鼠共72只,雌雄不限,鼠齡約10周,體重約250-270g。隨機分為假手術組(sham operation group S組,n=12)、生理鹽水對照組(normal saline control groupN組,n=30)、川芎嗪治療組(tetramethylpyrazine treatment group T組,n=30)。然后按術后大鼠處死時間再分為1d、3d、7d、14d、21d、28d六個亞組,在每個亞組中S組2只大鼠,N組和T組各5只大鼠,N組和T組采用改良Allen's法建立SD大鼠T10節(jié)段脊髓損傷模型,S組只咬除椎板,不打擊,不給藥物;T組術后30分鐘予以川芎嗪注射劑腹腔給藥(200mg/Kg),每日一次,共用藥5日;N組同等劑量的生理鹽水腹腔注射,給藥時間同T組,于術后1d、3d、7d、14d、21d、28d六個時間點分別對相應大鼠進行BBB評分,評價大鼠脊髓的運動功能恢復情況;然后處死相應大鼠,獲取損傷脊髓標本,進行HE染色以及GAP-43、Survivin免疫組化染色,記錄免疫陽性細胞數(shù),結(jié)果用SPSS16.0進行統(tǒng)計學分析。 結(jié)果:1.BBB評分:BBB評分T組在第1天和第3天時間點與N組相比,無統(tǒng)計學意義(P0.05);而在第7天、第14天、第21天、第28的時間點T組BBB評分高于N組BBB評分,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),其中在第7天和第21天的時間點差異具有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。2.GAP-43表達:S組幾乎沒有GAP-43陽性細胞表達。各個時間點N組和T組可見明顯陽性細胞結(jié)構(gòu),GAP-43在損傷后1天即可觀察到明顯表達,在14天達到高峰,28天仍有表達。T組分別在第3天、第7天、第14天及第21天的時間點GAP-43陽性細胞數(shù)高于N組GAP-43陽性細胞數(shù),差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),其中第7天、第14天、第21天的時間點差異有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01)。3.Survivin表達:S組Survivin陽性表達不明顯。各個時間點的N組及T組可見明顯的Survivin陽性細胞。Survivin在脊髓損傷后的1天也有明顯表達,7天達到高峰,28天仍可見有表達。T組在第1天、第3天、第7天和第14天的時間點Suvivin的陽細胞數(shù)高于N組Suvivin的陽細胞數(shù),差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),其中在第1天和第3天兩時間點有顯著性統(tǒng)計學意義(P0.01)。 結(jié)論:1.川芎嗪能夠促進脊髓損傷后的運動功能恢復;2.川芎嗪能夠促進脊髓損傷后GAP-43及Suvivin表達的上調(diào),川芎嗪對脊髓損傷后神經(jīng)功能的恢復的促進作用可能與此機制有關。
【關鍵詞】:脊髓損傷(SCI) BBB評分 川芎嗪(TMP) 神經(jīng)生長相關蛋白-43(GAP-43) Survivin
【學位授予單位】:中南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R-332;R651.2
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 英文縮寫對照表10-11
- 前言11-14
- 第一章 材料與方法14-22
- 1.1 實驗分組14
- 1.2 實驗設備14-15
- 1.3 實驗試劑15
- 1.4 實驗步驟15-21
- 1.4.1 SD大鼠脊髓損傷模型的建立15-16
- 1.4.2 大鼠的飼養(yǎng)和術后護理16
- 1.4.3 BBB評分16-18
- 1.4.4 動物取材步驟18
- 1.4.5 石蠟切片制作步驟18-19
- 1.4.6 HE染色步驟19-20
- 1.4.7 免疫組化步驟20-21
- 1.4.8 免疫組化結(jié)果計數(shù)21
- 1.5 統(tǒng)計學處理21-22
- 第二章 結(jié)果與分析22-26
- 2.1 一般行為觀察22
- 2.2 BBB評分22-23
- 2.3 組織學觀察23
- 2.4 免疫組化GAP-43測定23-24
- 2.5 免疫組化Survivin測定24-26
- 第三章 討論26-32
- 3.1 脊髓損傷模型的建立26-27
- 3.2 行為學評分27-28
- 3.3 GAP-43與脊髓損傷28-29
- 3.4 Survivin與脊髓損傷29-30
- 3.5 川芎嗪與脊髓損傷30-31
- 3.6 問題與展望31-32
- 結(jié)論32-33
- 附圖33-37
- 參考文獻37-40
- 綜述40-55
- 參考文獻51-55
- 致謝55
【參考文獻】
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,本文編號:572199
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