本文關(guān)鍵詞：前列地爾對體外培養(yǎng)類缺血再灌注模型視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的影響

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【摘要】：目的：(1)觀察前列地爾對體外培養(yǎng)類缺血再灌注模型視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(Retina ganglion cells, RGC)存活的影響；(2)探討前列地爾對體外培養(yǎng)類缺血再灌注模型RGC的最佳作用濃度與作用時間；(3)探討前列地爾對體外培養(yǎng)RGC類缺血再灌注損傷的保護作用機制。 方法：采用胰酶消化法原代培養(yǎng)出生3d內(nèi)的Sprague-Dawley大鼠RGC,并將培養(yǎng)72h的RGC使用抗大鼠Thy-1單克隆抗體對培養(yǎng)的RGC進行鑒定。RGC培養(yǎng)48h后,將培養(yǎng)的RGC隨機分為正常組、模型組、模型+前列地爾組。模型組建立RGC類缺血再灌注損傷模型,模型+前列地爾組在RGC缺血期及再灌注期均加入濃度分別為15μg·L-1、45μg·L-1、135μg·L-1前列地爾。觀察前列地爾對體外培養(yǎng)類缺血再灌注模型RGC存活的影響,于RGC類缺血再灌注模型建立24h、48h、72h時應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽(MTT)微量酶反應(yīng)比色法分別測定各組細胞的吸光值(A值),并根據(jù)MTT法的測定結(jié)果確定前列地爾的最佳作用濃度與作用時間。采用熒光定量PCR方法分別測定正常組、模型組、模型+前列地爾組(最佳濃度組)各組細胞中Bax、Bcl-2的相對表達量。 結(jié)果：(1)RGC培養(yǎng)48h后,可見RGC伸出突起,隨著培養(yǎng)時間的延長,細胞突起變長,部分細胞突起相互連接。(2)使用抗大鼠Thy-1單克隆抗體對RGC進行免疫細胞學(xué)檢測,可見RGC胞漿及軸突染成棕黃色。(3)RGC類缺血再灌注模型建立24h、48h、72h時,模型組RGC的A值均明顯降低,且分別與正常組、模型+前列地爾組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。RGC類缺血再灌注模型建立24h時,模型+45μg·L-1前列地爾組A值與正常組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),同時15μg·L-1前列地爾組與135μg·L-1前列地爾組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而正常組、模型+45μg·L-1前列地爾組分別與15μg·L-1前列地爾組、135μg·L-1前列地爾組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。模型建立48h、72h時,正常組、模型+前列地爾組之間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P0.05)。MTT法的測定結(jié)果表明前列地爾可減少類缺血再灌注RGC的死亡,且前列地爾對類缺血再灌注模型RGC的最佳作用濃度為45μg·L1,有效作用時間為類缺血再灌注模型建立24h。(4)使用熒光定量PCR方法分別測定各組RGC中Bax、Bcl-2的相對表達量：Bcl-2：正常組為0.999±0.035,模型組為0.657±0.012,模型+前列地爾(45μg·L-1)組為1.715±O.016(p0.05)；Bax:正常組為1.001±0.048,模型組為1.712±0.089,模型+前列地爾(45μg·L-1)組為1.508±0.061(P0.05)。 結(jié)論：(1)前列地爾對體外培養(yǎng)RGC類缺血再灌注損傷具有保護作用,前列地爾可減少類缺血再灌注RGC的死亡；(2)前列地爾可能通過上調(diào)RGC內(nèi)Bcl-2的表達,同時下調(diào)Bax的表達,進而對類缺血再灌注RGC發(fā)揮保護作用。
【關(guān)鍵詞】：前列地爾 原代培養(yǎng) 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 類缺血再灌注 Bax Bcl-2
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 前言8-10
• 材料與方法10-16
• 結(jié)果16-22
• 討論22-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻28-32
• 綜述32-47
• 參考文獻42-47
• 縮略詞與中英文對照47-49
• 致謝49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳鵬;賀翔鴿;;體外培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞缺氧條件下HIF-1α動態(tài)表達及意義[J];重慶醫(yī)學(xué);2006年15期

2 陳芳;糜漫天;許紅霞;白雪;陳卡;;�；撬釋θ毖醮笫笠暰W(wǎng)膜缺氧誘導(dǎo)因子-1α表達的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2006年07期

3 陳鵬;賀翔鴿;;RGCs缺氧條件下鈣離子水平動態(tài)變化及與TNF-α及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的關(guān)系研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2006年22期

4 程輝;李秀云;鞠學(xué)紅;;大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注模型的建立與觀察[J];解剖學(xué)研究;2009年02期

5 牛膺筠,趙巖松,高云霞,周占宇,王紅云;視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的機制及bFGF對其干預(yù)作用[J];國際眼科雜志;2003年03期

6 丁建光,姜德詠;視網(wǎng)膜缺血——再灌注損傷的保護[J];國際眼科雜志;2005年05期

7 張薇;李若溪;許建華;劉哲麗;;低氧條件下大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α及P53的表達及相關(guān)分析[J];國際眼科雜志;2006年04期

8 徐國興;許建斌;胡建章;;糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中缺氧誘導(dǎo)因子-1α和血管內(nèi)皮生長因子表達的研究[J];國際眼科雜志;2008年03期

9 戚雪;龐東渤;趙海雁;譚歆;黎笑楠;;α-硫辛酸對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷中P53和Bax表達的影響[J];國際眼科雜志;2011年01期

10 高峰麗;戚雪;;黃芪對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷中Bcl-2和Bax表達的影響[J];國際眼科雜志;2012年05期

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本文編號：569324