抗牙齦卟啉單胞菌卵黃抗體的制備、純化和生物學(xué)特性鑒定
本文關(guān)鍵詞:抗牙齦卟啉單胞菌卵黃抗體的制備、純化和生物學(xué)特性鑒定
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【摘要】:目的:制備特異性抗牙齦卟啉單胞菌(Pg)的雞卵黃免疫球蛋白(Ig Y)并檢測(cè)其生物學(xué)特性。方法:厭氧培養(yǎng)牙齦卟啉單胞菌,將甲醛滅活的菌體經(jīng)翅膀下淺層肌肉免疫150日齡羅曼母雞3次,每次間隔10 d。取雞蛋用兩步硫酸銨沉淀法提取Ig Y,BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)含量,ELLSA法檢測(cè)純化后Ig Y的特異性和抗體效價(jià)變化,并進(jìn)行SDS-PAGE和Western blotting分析。觀察抗Pg-Ig Y對(duì)紅細(xì)胞凝集的抑制作用。結(jié)果:經(jīng)3次免疫后,抗體滴度最高可達(dá)25 600,純化后每個(gè)雞蛋可得約70 mg Ig Y抗體;SDS-PAGE分析,純化的Ig Y有1條主要蛋白帶,相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)為180 k D,純度為65%;Western blotting分析,該Ig Y抗體可識(shí)別抗原Pg。每孔3.125μg Pg-Ig Y可有效抑制Pg的紅細(xì)胞凝集活性;1 mg/m L Pg-Ig Y可有效抑制Pg生長(zhǎng)。結(jié)論:本研究得到的Ig Y特異性強(qiáng),產(chǎn)量和純度高。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;安徽醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙周黏膜科安徽省口腔疾病研究中心實(shí)驗(yàn)室;安徽安科生物工程(集團(tuán))股份有限公司;安徽醫(yī)科大學(xué)人獸共患病安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 牙齦卟啉單胞菌 免疫球蛋白Y 卵黃抗體
【基金】:安徽省自然科學(xué)基金(1308085MH130,1408085MKL28) 安徽安科生物校企合作項(xiàng)目(K2015011)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 口腔醫(yī)院牙周黏膜科安徽省口腔疾病研究中心實(shí)驗(yàn)室;2.安徽安科生物工程(集團(tuán))股份有限公司;3.安徽醫(yī)科大學(xué)人獸共患病安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivals,Pg)是目前公認(rèn)慢性牙周炎的主要致病菌,與牙周炎的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[1],85%的病變位點(diǎn)可檢測(cè)到Pg
【共引文獻(xiàn)】
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3 王R,
本文編號(hào):559795
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