發(fā)布時間：2017-07-18 19:30

  本文關鍵詞：改良的間充質干細胞的培養(yǎng)方法

  更多相關文章： 人臍帶間充質干細胞 骨髓間充質干細胞 BALB/C小鼠 細胞培養(yǎng) 免疫表型 誘導分化

【摘要】：第一部分改良的人臍帶間充質干細胞的培養(yǎng)方法 目的：建立人臍帶間充質干細胞(hUCMSCs)的分離和培養(yǎng)方法。 方法：用酶消化法、傳統(tǒng)組織塊法和改良組織塊法從人臍帶華通膠中分離間充質干細胞，對比三種方法所培養(yǎng)的原代細胞生長狀態(tài)及數(shù)量；流式細胞儀檢測改良組織塊法所培養(yǎng)細胞的免疫表型；用不同的培養(yǎng)體系誘導改良法所培養(yǎng)細胞向成骨細胞及成脂細胞分化，并對其進行鑒定。 結果：改良的hUCMSCs的培養(yǎng)方法所培養(yǎng)的細胞純度更高，改良組織塊法所獲得的原代細胞數(shù)量是酶消化法的2倍左右，是傳統(tǒng)組織塊法的約20倍，細胞呈長梭形生長；高表達CD90、CD44，不表達CD45、CD34；茜素紅染色及油紅O染色證實了hUCMSCs可分化為脂肪細胞和成骨細胞。 結論：建立了hUCMSCs的培養(yǎng)新方法，證實了hUCMSCs的增殖能力和多向分化潛能，為其在疾病治療方面的應用提供支持。 第二部分改良的BALB/C小鼠骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)方法 目的：建立BALB/C小鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs)的培養(yǎng)方法。 方法：用全骨髓培養(yǎng)法和改良的全骨髓培養(yǎng)法從BALB/C小鼠脛骨和股骨中分離間充質干細胞，對比兩種方法所培養(yǎng)原代細胞的生長情況及數(shù)量；流式細胞儀檢測改良法所培養(yǎng)細胞的免疫表型；用成骨誘導培養(yǎng)體系誘導改良法所培養(yǎng)的BMSCs向成骨細胞分化，并對其進行鑒定。 結果：改良的全骨髓培養(yǎng)法所培養(yǎng)的原代細胞數(shù)量上較傳統(tǒng)方法增加了約50%，細胞生長更快；流式細胞學檢測其高表達CD90和CD44，不表達CD45；茜素紅染色證實了BMSCs可分化為成骨細胞。 結論：建立了BALB/C小鼠BMSCs培養(yǎng)的新方法，為其在基礎研究中的應用提供支持。
【關鍵詞】：人臍帶間充質干細胞 骨髓間充質干細胞 BALB/C小鼠 細胞培養(yǎng) 免疫表型 誘導分化
【學位授予單位】：華中科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 縮略語5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 第一部分 改良的人臍帶間充質干細胞的培養(yǎng)方法12-24
• 一. 實驗材料12-13
• 二. 實驗方法13-17
• 三. 實驗結果17-22
• 四. 討論22-24
• 第二部分 改良的BALB/C小鼠骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)方法24-33
• 一. 實驗材料24
• 二. 實驗方法24-26
• 三. 實驗結果26-31
• 四. 討論31-33
• 全文總結33-34
• 參考文獻34-37
• 綜述37-56
• 參考文獻51-56
• 致謝56

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