本文關(guān)鍵詞：改良的間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法

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【摘要】：第一部分改良的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法 目的：建立人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUCMSCs)的分離和培養(yǎng)方法。 方法：用酶消化法、傳統(tǒng)組織塊法和改良組織塊法從人臍帶華通膠中分離間充質(zhì)干細(xì)胞，對比三種方法所培養(yǎng)的原代細(xì)胞生長狀態(tài)及數(shù)量；流式細(xì)胞儀檢測改良組織塊法所培養(yǎng)細(xì)胞的免疫表型；用不同的培養(yǎng)體系誘導(dǎo)改良法所培養(yǎng)細(xì)胞向成骨細(xì)胞及成脂細(xì)胞分化，并對其進(jìn)行鑒定。 結(jié)果：改良的hUCMSCs的培養(yǎng)方法所培養(yǎng)的細(xì)胞純度更高，改良組織塊法所獲得的原代細(xì)胞數(shù)量是酶消化法的2倍左右，是傳統(tǒng)組織塊法的約20倍，細(xì)胞呈長梭形生長；高表達(dá)CD90、CD44，不表達(dá)CD45、CD34；茜素紅染色及油紅O染色證實了hUCMSCs可分化為脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞。 結(jié)論：建立了hUCMSCs的培養(yǎng)新方法，證實了hUCMSCs的增殖能力和多向分化潛能，為其在疾病治療方面的應(yīng)用提供支持。 第二部分改良的BALB/C小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法 目的：建立BALB/C小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的培養(yǎng)方法。 方法：用全骨髓培養(yǎng)法和改良的全骨髓培養(yǎng)法從BALB/C小鼠脛骨和股骨中分離間充質(zhì)干細(xì)胞，對比兩種方法所培養(yǎng)原代細(xì)胞的生長情況及數(shù)量；流式細(xì)胞儀檢測改良法所培養(yǎng)細(xì)胞的免疫表型；用成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)體系誘導(dǎo)改良法所培養(yǎng)的BMSCs向成骨細(xì)胞分化，并對其進(jìn)行鑒定。 結(jié)果：改良的全骨髓培養(yǎng)法所培養(yǎng)的原代細(xì)胞數(shù)量上較傳統(tǒng)方法增加了約50%，細(xì)胞生長更快；流式細(xì)胞學(xué)檢測其高表達(dá)CD90和CD44，不表達(dá)CD45；茜素紅染色證實了BMSCs可分化為成骨細(xì)胞。 結(jié)論：建立了BALB/C小鼠BMSCs培養(yǎng)的新方法，為其在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用提供支持。
【關(guān)鍵詞】：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 BALB/C小鼠 細(xì)胞培養(yǎng) 免疫表型 誘導(dǎo)分化
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 縮略語5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 第一部分 改良的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法12-24
• 一. 實驗材料12-13
• 二. 實驗方法13-17
• 三. 實驗結(jié)果17-22
• 四. 討論22-24
• 第二部分 改良的BALB/C小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法24-33
• 一. 實驗材料24
• 二. 實驗方法24-26
• 三. 實驗結(jié)果26-31
• 四. 討論31-33
• 全文總結(jié)33-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 綜述37-56
• 參考文獻(xiàn)51-56
• 致謝56

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