本文關鍵詞：慢病毒介導BTLA轉(zhuǎn)染未成熟樹突狀細胞的研究

  更多相關文章： B和T淋巴細胞衰減因子 慢病毒 樹突狀細胞 基因轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的探討構建攜帶B和T淋巴細胞衰減因子(BTLA)基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染未成熟樹突狀細胞(DC)的可行性。方法根據(jù)GeneBank公布的小鼠BTLA的mRNA序列構建ORF慢病毒表達質(zhì)粒,合成BTLA基因的重組慢病毒載體。原代分離培養(yǎng)CL57/BL小鼠骨髓來源的未成熟DC,用包含BTLA基因的重組慢病毒載體以感染復數(shù)為15轉(zhuǎn)染至未成熟DC。采用免疫熒光、反轉(zhuǎn)錄PCR檢測BTLA基因的表達。結果成功構建有活性的慢病毒載體LPP-Mm126645-Lv203-400,慢病毒滴度為3.25×10~9TU/ml。以重組慢病毒LPP-Mm266454-Lv203400轉(zhuǎn)染未成熟DC 96 h后在熒光倒置顯微鏡下可觀察到被感染的陽性細胞有綠色熒光蛋白表達,反轉(zhuǎn)錄PCR檢測到感染的DC中BTLA基因的表達量比未感染的DC的表達量高(P0.05),提示轉(zhuǎn)染成功。結論構建攜帶BTLA基因的慢病毒載體可成功轉(zhuǎn)染BTLA至小鼠骨髓來源的未成熟DC。
【作者單位】： 中山大學附屬第三醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關鍵詞】： B和T淋巴細胞衰減因子 慢病毒 樹突狀細胞 基因轉(zhuǎn)染
【基金】：國家自然科學基金(81271327) 廣東省科技計劃項目(2011B03I8O0015)
【分類號】：R329
【正文快照】： B和T淋巴細胞衰減因子(BTLA)是免疫球蛋白超家族的一員,是CD28家族被發(fā)現(xiàn)的第3個抑制性分子,與相應受體皰疹病毒侵入介質(zhì)(HVEM)結合提供抗原特異性T淋巴細胞活化的第二信號,在免疫反應早期階段發(fā)揮重要的協(xié)同抑制作用[1]。樹突狀細胞(DC)是體內(nèi)最強的專職抗原提呈細胞(APC),在

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王雪峰;陳永井;王勤;代群;楊科芳;張學光;;一株鼠抗人BTLA功能性單克隆抗體的研制及其生物學特性鑒定[J];現(xiàn)代免疫學;2007年01期

2 曾今誠;鮑晶晶;王紅梅;張慧;張俊愛;王萬黨;關向前;徐軍發(fā);;小鼠BTLA慢病毒表達載體的構建及鑒定[J];細胞與分子免疫學雜志;2013年03期

3 陳芳,朱旭昆,賀宇飛,王晶,陽諾,張桂梅,馮作化;可溶性BTLA真核表達載體的構建及其抗腫瘤作用[J];華中科技大學學報(醫(yī)學版);2005年04期

4 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 傅振坤;;B及T淋巴細胞弱化因子(BTLA)外顯子基因多態(tài)性與黑龍江乳腺癌相關性研究[A];第六屆全國免疫學學術大會論文集[C];2008年

，

本文編號：555772