發(fā)布時(shí)間：2017-07-18 03:10

  本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)BTLA轉(zhuǎn)染未成熟樹突狀細(xì)胞的研究

  更多相關(guān)文章： B和T淋巴細(xì)胞衰減因子 慢病毒 樹突狀細(xì)胞 基因轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的探討構(gòu)建攜帶B和T淋巴細(xì)胞衰減因子(BTLA)基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染未成熟樹突狀細(xì)胞(DC)的可行性。方法根據(jù)GeneBank公布的小鼠BTLA的mRNA序列構(gòu)建ORF慢病毒表達(dá)質(zhì)粒,合成BTLA基因的重組慢病毒載體。原代分離培養(yǎng)CL57/BL小鼠骨髓來(lái)源的未成熟DC,用包含BTLA基因的重組慢病毒載體以感染復(fù)數(shù)為15轉(zhuǎn)染至未成熟DC。采用免疫熒光、反轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)BTLA基因的表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建有活性的慢病毒載體LPP-Mm126645-Lv203-400,慢病毒滴度為3.25×10~9TU/ml。以重組慢病毒LPP-Mm266454-Lv203400轉(zhuǎn)染未成熟DC 96 h后在熒光倒置顯微鏡下可觀察到被感染的陽(yáng)性細(xì)胞有綠色熒光蛋白表達(dá),反轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)到感染的DC中BTLA基因的表達(dá)量比未感染的DC的表達(dá)量高(P0.05),提示轉(zhuǎn)染成功。結(jié)論構(gòu)建攜帶BTLA基因的慢病毒載體可成功轉(zhuǎn)染BTLA至小鼠骨髓來(lái)源的未成熟DC。
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： B和T淋巴細(xì)胞衰減因子 慢病毒 樹突狀細(xì)胞 基因轉(zhuǎn)染
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81271327) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2011B03I8O0015)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： B和T淋巴細(xì)胞衰減因子(BTLA)是免疫球蛋白超家族的一員,是CD28家族被發(fā)現(xiàn)的第3個(gè)抑制性分子,與相應(yīng)受體皰疹病毒侵入介質(zhì)(HVEM)結(jié)合提供抗原特異性T淋巴細(xì)胞活化的第二信號(hào),在免疫反應(yīng)早期階段發(fā)揮重要的協(xié)同抑制作用[1]。樹突狀細(xì)胞(DC)是體內(nèi)最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞(APC),在

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 王雪峰;陳永井;王勤;代群;楊科芳;張學(xué)光;;一株鼠抗人BTLA功能性單克隆抗體的研制及其生物學(xué)特性鑒定[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2007年01期

2 曾今誠(chéng);鮑晶晶;王紅梅;張慧;張俊愛;王萬(wàn)黨;關(guān)向前;徐軍發(fā);;小鼠BTLA慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年03期

3 陳芳,朱旭昆,賀宇飛,王晶,陽(yáng)諾,張桂梅,馮作化;可溶性BTLA真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其抗腫瘤作用[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2005年04期

4 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 傅振坤;;B及T淋巴細(xì)胞弱化因子(BTLA)外顯子基因多態(tài)性與黑龍江乳腺癌相關(guān)性研究[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

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本文編號(hào)：555772