本文關(guān)鍵詞：大連口岸媒介生物抗藥性監(jiān)測及殺蟲劑合理使用研究

  更多相關(guān)文章： 大連口岸 媒介生物 殺蟲劑 除蟲菊酯 抗藥性

【摘要】：研究背景：媒介生物是指直接或間接傳播人類疾病的生物，主要有蚊、蠅、鼠、蚤等八大類。蚊類是重要的媒介生物之一，全世界已知約3000余種。雌蚊刺叮吸血，傳播20余種蟲媒傳染病，如瘧疾、登革熱和登革出血熱、流行性乙型腦炎、黃熱病、絲蟲病等。據(jù)統(tǒng)計全球每年瘧疾的發(fā)病人數(shù)達(dá)3～5億，死亡人數(shù)約為150～300萬。蠅類全世界已知約7萬余種。蠅類可傳播錐蟲病，并且可以攜帶脊髓灰質(zhì)炎病毒、霍亂弧菌、寄生蟲卵等多種病原體，蠅類的幼蟲還可以寄生在人或脊椎動物體內(nèi)而引起蠅蛆癥。目前，隨著擬除蟲菊酯殺蟲劑的大規(guī)模使用，媒介生物對殺蟲劑逐漸產(chǎn)生了抗藥性。自然種群中主要媒介生物如蚊、蠅等對殺蟲劑的抗藥性高達(dá)數(shù)十倍至數(shù)百倍。連續(xù)使用后令殺蟲劑使用劑量不斷加大，濃度不斷提高，自八十年代進(jìn)入中國用于衛(wèi)生害蟲防治，至今在某些地區(qū)的使用濃度已經(jīng)提高1000多倍，該狀況不但增加了殺蟲劑的使用成本，同時也帶來一系列的生態(tài)問題。因此抗藥性監(jiān)測與殺蟲藥物的合理應(yīng)用，對于媒介生物的防治意義非常重大。 目的：本課題研究口岸媒介生物抗藥性監(jiān)測技術(shù)，對口岸地區(qū)媒介生物進(jìn)行快速抗藥性檢測，在此基礎(chǔ)上研究殺蟲劑的合理使用，從而減少用藥的盲目性，降低環(huán)境污染，并將此監(jiān)測技術(shù)與防制方法進(jìn)行推廣，提高口岸地區(qū)媒介生物防治效率。 研究方法：本課題采集大連口岸蚊蠅類媒介生物為主要研究對象，通過野外現(xiàn)場采集、實驗室標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖、抗藥性生物學(xué)測試和除蟲菊酯殺蟲劑擊倒抗性(等位基因特異性PCR)分子檢測等方法，對大連西山屯、大連灣、藍(lán)天集裝箱場、大窯灣等地區(qū)蚊蠅類媒介生物進(jìn)行快速抗藥性檢測，在此基礎(chǔ)上研究殺蟲劑的合理使用，從而減少用藥的盲目性，降低環(huán)境污染，并將此監(jiān)測技術(shù)與防治方法進(jìn)行推廣，提高口岸地區(qū)媒介生物防治效率。蚊類使用抗藥性生物學(xué)測試方法中的浸漬法進(jìn)行實驗，通過計算半數(shù)致死率(LC50)，比較蚊類對幾種殺蟲劑的敏感度，從而找到敏感度相對高的殺蟲劑進(jìn)行蚊類滅殺；蠅類使用抗藥性生物學(xué)測試方法中的掛籠法進(jìn)行實驗，比較蠅類對幾種殺蟲劑的敏感度，并且檢測家蠅對敵敵畏抗藥性。蚊蠅均使用等位基因特異性PCR進(jìn)行抗藥性分子生物學(xué)檢測，通過計算突變基因的概率，檢測蚊蠅抗藥性情況。 結(jié)果：利用浸漬法對淡色庫蚊及幼蟲進(jìn)行抗藥性毒力測試，結(jié)果大連的3個地理株對溴氰菊酯敏感度相對較高，對敵敵畏的抗性最高。殘殺威應(yīng)用較多，蚊類產(chǎn)生較明顯的抗藥性，應(yīng)替換使用其他類的殺蟲劑。掛籠法實驗結(jié)果表明，列喜鎮(zhèn)對大連地區(qū)的媒介生物具有較好的殺滅效果，家蠅對其敏感性要高于淡色庫蚊，可以應(yīng)用其殺滅口岸家蠅。應(yīng)用家蠅對敵敵畏抗藥性快速檢測的方法對大連地區(qū)的家蠅進(jìn)行抗藥性檢測，結(jié)果乙酰膽堿脂酶抑制實驗陽性率(包括弱陽性)91.2%，說明大連地區(qū)的家蠅種群對有機磷殺蟲劑敵敵畏普遍產(chǎn)生抗藥性。在口岸上使用有機磷類殺蟲劑時應(yīng)該慎重。建立特異性等位基因PCR方法，檢測不同種群擬除蟲菊酯類殺蟲劑擊倒抗性(kdr)基因頻率，結(jié)果大連地區(qū)三個地理株的淡色庫蚊各50組樣品，其中藍(lán)天集裝箱場kdr基因頻率為19.0%；西山屯(2009年)kdr基因頻率為19.8%；西山屯(2010年)kdr基因頻率為20.0%；大連灣kdr基因頻率為19.1%。說明大連口岸淡色庫蚊對擬除蟲菊酯類藥物已經(jīng)產(chǎn)生抗藥性，可更換其他藥物進(jìn)行替換擬除蟲菊酯類殺蟲劑。大連的3個地理株家蠅中，，藍(lán)天集裝箱場、大窯灣檢測出kdr抗性雜合子基因型，其kdr基因頻率分別為5%、1%，另外1個種群未發(fā)現(xiàn)抗性基因，該類藥物可繼續(xù)使用。 結(jié)論：通過本項目的各項檢測結(jié)果，提出以下殺蟲劑合理使用措施：大連口岸殺滅淡色庫蚊應(yīng)該采用敏感性較高的幾種擬除蟲菊酯類殺蟲劑輪用，也可對其加入增效劑來使用；大連口岸的家蠅種群對有機磷殺蟲劑敵敵畏普遍產(chǎn)生抗藥性，應(yīng)更換其他類的殺蟲劑輪用。
【關(guān)鍵詞】：大連口岸 媒介生物 殺蟲劑 除蟲菊酯 抗藥性
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R384.1
【目錄】：

• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-13
• 材料和方法13-20
• 1 材料13-14
• 1.1 實驗用媒介生物來源13
• 1.2 質(zhì)粒和菌株13
• 1.3 主要試劑13
• 1.4 培養(yǎng)基13-14
• 1.5 主要工具及儀器14
• 2 方法14-20
• 2.1 野外現(xiàn)場采集14
• 2.2 實驗室標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖14-15
• 2.3 抗藥性生物學(xué)測試15-16
• 2.4 擬除蟲菊酯殺蟲劑擊倒抗性(knockdown resistance，kdr)分子檢測方法的建立—等位基因特異性 PCR16-20
• 結(jié)果20-37
• 1 生物學(xué)測試結(jié)果20-32
• 1.1 浸漬法實驗結(jié)果20-27
• 1.2 掛籠法實驗結(jié)果27-31
• 1.3 家蠅對敵敵畏抗藥性快速檢測實驗結(jié)果31-32
• 2 等位基因特異性 PCR 實驗結(jié)果32-37
• 2.1 淡色庫蚊等位基因特異性 PCR32-34
• 2.2 家蠅等位基因特異性 PCR34-37
• 討論37-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 綜述43-52
• 參考文獻(xiàn)49-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況52-62
• 致謝62-63

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曹曉梅,宋鋒林,趙彤言,董言德,孫晨熹;Kdr等位基因頻率與家蠅對溴氰菊酯抗性的關(guān)系[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;2004年04期

2 宋鋒林,趙彤言,董言德,曹曉梅,張曉龍;淡色庫蚊(Culexpipienspallens)與擊倒抗性(kdr)相關(guān)的鈉通道基因突變[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;2005年02期

3 宋鋒林,趙彤言,董言德,曹曉梅,李春曉;淡色庫蚊對擬除蟲菊酯(溴氰菊酯、Es-生物丙烯菊酯)抗藥性品系現(xiàn)實遺傳力的研究[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;2005年04期

4 曹曉梅;趙彤言;董言德;;寡核苷酸探針法(PCR-ASO)檢測家蠅kdr抗性相關(guān)的L1014F點突變[J];寄生蟲與醫(yī)學(xué)昆蟲學(xué)報;2006年04期

5 黃文金;;對新發(fā)與再發(fā)媒介傳播疾病及其控制的回顧和建議[J];口岸衛(wèi)生控制;2006年04期

6 袁家s

本文編號：534029