本文關(guān)鍵詞：低劑量X線照射對(duì)小鼠成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的激發(fā)及興奮作用

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【摘要】：自然環(huán)境和核設(shè)施始終緩慢的釋放著人們已經(jīng)習(xí)以為常的低劑量（或低劑量率）輻射。個(gè)體每年從自然環(huán)境中受到的世界平均輻射劑量約為0.25cGy。隨著放射技術(shù)在醫(yī)療中的應(yīng)用，普通人群暴露于低劑量輻射（LDI）的影響越來(lái)越受到人們的關(guān)注。因此，檢測(cè)LDI的風(fēng)險(xiǎn)變得十分重要，尤其是其致癌風(fēng)險(xiǎn)。傳統(tǒng)的觀點(diǎn)認(rèn)為任何劑量的輻射均對(duì)機(jī)體有害（LNT理論），然而，這一理論卻被LDI帶來(lái)的興奮效應(yīng)、適應(yīng)性效應(yīng)和DNA損傷修復(fù)等放射生物現(xiàn)象質(zhì)疑。興奮效應(yīng)被認(rèn)為是機(jī)體應(yīng)對(duì)LDI刺激作出的防御反應(yīng)和應(yīng)激誘導(dǎo)反應(yīng)。近年來(lái)，很多研究證實(shí)LDI在調(diào)節(jié)成骨分化和骨重塑過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用，，但鮮有研究確定LDI在骨重塑過(guò)程中對(duì)細(xì)胞層次的影響，這種影響很可能是LDI促進(jìn)骨重塑的潛在機(jī)制。 第一部分低劑量照射對(duì)小鼠成骨細(xì)胞的激發(fā)作用 目的：我們的前期研究證實(shí)低劑量照射可以加快大鼠骨折處的骨痂礦化，并促進(jìn)成骨前體細(xì)胞的增殖和成骨分化。本研究將檢測(cè)LDI對(duì)小鼠成骨細(xì)胞的增殖和成骨能力的影響，探討低劑量照射促進(jìn)骨痂礦化在細(xì)胞層面的潛在機(jī)制。 方法：采用CCK-8法檢測(cè)不同劑量LDI照射對(duì)細(xì)胞增殖的影響。將成骨細(xì)胞隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（10cGy LDI）和對(duì)照組：使用PNPP法和茜素紅（ARS）法分別檢測(cè)細(xì)胞的堿性磷酸酶（ALP）活性和礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量。采用Q-PCR法和Western Blotting法檢測(cè)成骨相關(guān)基因OCN, BMP, OPG, RANKL, Col-1和Cbfa1的表達(dá)情況。 結(jié)果：增殖實(shí)驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組間有顯著差異，10cGy的低劑量照射可明顯刺激成骨細(xì)胞的增殖（P＜0.05）。而成骨能力實(shí)驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組堿性磷酸酶活性和礦化結(jié)節(jié)數(shù)目較對(duì)照組增多（P＜0.05）。基因?qū)嶒?yàn)顯示LDI促進(jìn)了BMP、OPG和Col-1的表達(dá)（P＜0.05），但對(duì)OCN、RANKL和Cbfa1基因的表達(dá)沒(méi)有明顯的影響（P＞0.05）。 結(jié)論：低劑量X線照射可有效促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和成骨能力，從而加速成骨和骨重塑過(guò)程。 第二部分低劑量照射對(duì)小鼠破骨細(xì)胞的激發(fā)作用 目的：檢測(cè)LDI對(duì)小鼠破骨細(xì)胞的生存能力、活性及骨吸收能力的影響，探討低劑量照射促進(jìn)骨痂礦化在細(xì)胞層面的潛在機(jī)制。 方法：采用CCK-8法檢測(cè)不同劑量LDI照射對(duì)破骨前體細(xì)胞增殖的影響。使用M-CSF和RANKL誘導(dǎo)破骨前體細(xì)胞向破骨細(xì)胞分化。采用TRAP染色法檢測(cè)不同劑量LDI照射對(duì)破骨細(xì)胞的形態(tài)和分化潛能。將誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（10cGy LDI）和對(duì)照組：以Q-PCR法和Western Blotting法檢測(cè)破骨細(xì)胞相關(guān)基因TRAP, Cathepsin-K, NFATc1, CTR和MMP-9的表達(dá)情況。采用TUNEL法檢測(cè)了LDI對(duì)破骨前體細(xì)胞和破骨細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果：各劑量的LDI對(duì)破骨前體細(xì)胞的增殖無(wú)明顯影響（P＞0.05）。TRAP染色發(fā)現(xiàn)各劑量的LDI并沒(méi)有增加分化的破骨細(xì)胞的數(shù)量（P＞0.05），但卻促進(jìn)了破骨細(xì)胞的分化成熟程度�；�?qū)嶒?yàn)顯示LDI促進(jìn)了TRAP, Cathepsin-K和CTR基因的表達(dá)（P＜0.05），但對(duì)NFATc1和MMP-9基因的表達(dá)沒(méi)有明顯的影響（P＞0.05）。凋亡實(shí)驗(yàn)證實(shí)LDI誘發(fā)了破骨前體細(xì)胞和破骨細(xì)胞的凋亡。 結(jié)論：低劑量X線照射對(duì)破骨前體細(xì)胞的增殖和破骨分化無(wú)明顯影響，但卻促進(jìn)了破骨細(xì)胞的分化成熟度，有效增強(qiáng)了破骨細(xì)胞的活性和骨吸收能力，從而加速了骨重塑過(guò)程。
【關(guān)鍵詞】：成骨細(xì)胞 低劑量照射 骨形成 骨重塑 破骨細(xì)胞 低劑量照射 TUNEL法 骨吸收 骨重塑
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-11
• 前言11-16
• 參考文獻(xiàn)13-16
• 第一部分 低劑量照射對(duì)小鼠成骨細(xì)胞的激發(fā)作用16-31
• 一、材料和方法16-24
• 二、結(jié)果24-27
• 三、討論27-29
• 參考文獻(xiàn)29-31
• 第二部分 低劑量照射對(duì)小鼠破骨細(xì)胞的激發(fā)作用31-43
• 一、材料與方法31-36
• 二、結(jié)果36-39
• 三、討論39-41
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 總結(jié)43-44
• 綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)46-51
• 中英文對(duì)照縮略詞表51-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文52-53
• 致謝53-54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 劉樹(shù)錚;低劑量輻射興奮效應(yīng)發(fā)生機(jī)理若干問(wèn)題的探討[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;2003年06期

本文編號(hào)：532553