本文關鍵詞：家蠅伴侶蛋白CCTη基因序列分析與表達模式

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【摘要】：目的對家蠅伴侶蛋白CCTη(MD-CCTη)基因進行序列分析,克隆其c DNA序列并檢測家蠅CCTη基因的表達情況。方法采用表達序列標簽(EST)測序技術從已構建的家蠅幼蟲c DNA文庫中篩選MD-CCTη基因,對其進行序列測定和分析;提取家蠅3日齡幼蟲RNA,逆轉錄c DNA為模板,PCR擴增,并與p MD-19T載體連接,轉化大腸桿菌DH5α中;采用實時熒光PCR技術分析MD-CCTη基因在家蠅不同生長發(fā)育階段及3日齡幼蟲組織中表達模式。結果 MD-CCTη基因開放閱讀框(ORF)全長1 632 bp,編碼543個氨基酸,理論分子量59.3 k Da,等電點6.27;該基因推導的氨基酸序列與其他昆蟲同源序列比較有較高的相似性(93%),聚類分析結果顯示,家蠅與地中海實蠅和果蠅的親緣關系最近(100%);MD-CCTη在發(fā)育階段以卵期表達量最高,其次為1日齡幼蟲,雄性成蟲表達量最低;MD-CCTη基因在家蠅3日齡幼蟲組織中氣管表達量最高,其次為唾液腺,在體壁中表達量最低。結論成功克隆出MD-CCTη基因的c DNA序列,MD-CCTη在家蠅不同發(fā)育階段及組織中表達模式存在明顯差異。
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學院寄生蟲學教研室;
【關鍵詞】： 家蠅 伴侶蛋白(CCT) 克隆 實時熒光 表達模式
【基金】：國家自然科學基金(81160204;81360254) 貴州省科技廳基金(黔科合【2010】3160) 高校博士點學科專項科研基金(20105215120001)
【分類號】：R384.2
【正文快照】： Molecular cloning,sequencing and expression pattern of chaperonin genein housefly-Musca domesitcaZHAO Xue-jun,GUO Guo,XIU Jiang-fan,et al(School of Basic Medical Sciences,G uiyang Medical College,G uiyang,熱休克蛋白(heat shock protein,HSP)又稱應激反應蛋

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7 田

本文編號：530953