發(fā)布時(shí)間：2017-07-07 16:22

  本文關(guān)鍵詞：家蠅伴侶蛋白CCTη基因序列分析與表達(dá)模式

  更多相關(guān)文章： 家蠅 伴侶蛋白(CCT) 克隆 實(shí)時(shí)熒光 表達(dá)模式

【摘要】：目的對(duì)家蠅伴侶蛋白CCTη(MD-CCTη)基因進(jìn)行序列分析,克隆其c DNA序列并檢測(cè)家蠅CCTη基因的表達(dá)情況。方法采用表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)測(cè)序技術(shù)從已構(gòu)建的家蠅幼蟲(chóng)c DNA文庫(kù)中篩選MD-CCTη基因,對(duì)其進(jìn)行序列測(cè)定和分析;提取家蠅3日齡幼蟲(chóng)RNA,逆轉(zhuǎn)錄c DNA為模板,PCR擴(kuò)增,并與p MD-19T載體連接,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α中;采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)分析MD-CCTη基因在家蠅不同生長(zhǎng)發(fā)育階段及3日齡幼蟲(chóng)組織中表達(dá)模式。結(jié)果 MD-CCTη基因開(kāi)放閱讀框(ORF)全長(zhǎng)1 632 bp,編碼543個(gè)氨基酸,理論分子量59.3 k Da,等電點(diǎn)6.27;該基因推導(dǎo)的氨基酸序列與其他昆蟲(chóng)同源序列比較有較高的相似性(93%),聚類(lèi)分析結(jié)果顯示,家蠅與地中海實(shí)蠅和果蠅的親緣關(guān)系最近(100%);MD-CCTη在發(fā)育階段以卵期表達(dá)量最高,其次為1日齡幼蟲(chóng),雄性成蟲(chóng)表達(dá)量最低;MD-CCTη基因在家蠅3日齡幼蟲(chóng)組織中氣管表達(dá)量最高,其次為唾液腺,在體壁中表達(dá)量最低。結(jié)論成功克隆出MD-CCTη基因的c DNA序列,MD-CCTη在家蠅不同發(fā)育階段及組織中表達(dá)模式存在明顯差異。
【作者單位】： 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院寄生蟲(chóng)學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 家蠅 伴侶蛋白(CCT) 克隆 實(shí)時(shí)熒光 表達(dá)模式
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81160204;81360254) 貴州省科技廳基金(黔科合【2010】3160) 高校博士點(diǎn)學(xué)科專項(xiàng)科研基金(20105215120001)
【分類(lèi)號(hào)】：R384.2
【正文快照】： Molecular cloning,sequencing and expression pattern of chaperonin genein housefly-Musca domesitcaZHAO Xue-jun,GUO Guo,XIU Jiang-fan,et al(School of Basic Medical Sciences,G uiyang Medical College,G uiyang,熱休克蛋白(heat shock protein,HSP)又稱應(yīng)激反應(yīng)蛋

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7 田

本文編號(hào)：530953