發(fā)布時間：2017-07-05 00:04

  本文關鍵詞：不同配比凍存液對兔脂肪干細胞液氮凍存效果的研究

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【摘要】：目的:探究不同濃度配比凍存液對脂肪干細胞(Adipose-derived Stem Cells,ADSCs)凍存復蘇后存活率及增殖活性的影響。方法:無菌條件下取新西蘭大白兔的脂肪組織,體外分離、培養(yǎng)ADSCs并傳代至第3代,行免疫細胞化學染色對其表面標志物進行鑒定,同時對其行成軟骨及成表皮細胞誘導以證實其多項分化能力。將第3代ADSCs置于液氮(-196℃)中凍存,根據(jù)凍存液中培養(yǎng)基(DMEM)、胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)及二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)的配比不同分為8組:1含不同濃度FBS配比分組:A組(70%DMEM+20%FBS+10%DMSO)、B組(60%DMEM+30%FBS+10%DMSO)、C組(50%DMEM+40%FBS+10%DMSO)、D組(含有40%DMEM+50%FBS+10%DMSO);2含不同濃度DMSO配比分組:E組(55%DMEM+40%FBS+5%DMSO)、F組(50%DMEM+40%FBS+10%DMSO)、G組(45%DMEM+40%FBS+15%DMSO)、H組(40%DMEM+40%FBS+20%DMSO)。細胞凍存三個月后,對其進行復蘇并觀察細胞形態(tài)學變化;通過細胞計數(shù)計算細胞存活率;采用MTT法繪制復蘇后細胞生長曲線,以測定其生長增殖情況。結果:細胞復蘇后,通過細胞計數(shù)計算結果顯示C、D組存活率明顯高于A、B組(P0.05),E、F、G、H四組之間有統(tǒng)計學意義(P0.01);MTT法結果顯示C、D、F組的增殖曲線與未凍存組無明顯差異(P0.05)。結論:從兔脂肪組織中成功分離出了ADSCs,并且能在體外培養(yǎng)過程中穩(wěn)定生長,快速增殖;ADSCs凍存液比例選擇以DMEM:FBS:DMSO=5:4∶1的凍存效果最好。
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學院;費縣人民醫(yī)院;
【關鍵詞】： 脂肪來源干細胞 凍存液 液氮
【基金】：濰坊醫(yī)學院科技創(chuàng)新研究基金資助項目(K11TSl006)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： ADSCs是從脂肪組織中提取的干細胞,具有取材方便,來源豐富,體外增殖能力強等優(yōu)點,在組織個過程中得到廣泛應用。然而在體外培養(yǎng)過程中,隨著傳代次數(shù)的增加,細胞的生物學特性會發(fā)生變化,從而在一定程度上影響了ADSCs的生物活性。對于采用液氮(-196℃)進行細胞凍存,理論上是沒有

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王亮;劉婷婷;彭濤;朱海;汪漢卿;曹旭;;荷斯坦奶牛耳組織成纖維細胞分離培養(yǎng)及冷凍保存方法研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2006年05期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔣東霞,楊勝利,何琳;惡性腫瘤患者外周血淋巴細胞mdr-1基因表達在原發(fā)耐藥與繼發(fā)耐藥中的作用研究[J];癌變.畸變.突變;2002年04期

2 何琳,張巧,胡杰英;抗腫瘤藥物體外誘導新鮮癌組織及其外周血淋巴細胞mdr-1基因表達的相關性研究[J];癌變.畸變.突變;2002年04期

3 何志穎,江千里,姚玉成,溫麗敏,李建秀,王新民,胡以平,王健民;RFP標記的YCD基因在HeLa細胞中的表達及其介導的細胞毒性[J];癌變.畸變.突變;2004年05期

4 單保恩,李俊新,張靜,梁文杰,李宏芬;中藥香加皮與其易混品體外抑瘤效果研究[J];癌變.畸變.突變;2005年05期

5 朱京童;白玉;司文秀;劉洪喜;任曲輝;;中藥白頭翁提取物抗腫瘤活性的體外實驗研究[J];癌變.畸變.突變;2007年01期

6 劉俊康;吳小蘭;章榮華;徐啟旺;;小鼠EP瘤細胞株建立的初步研究[J];癌變.畸變.突變;2007年04期

7 趙文紅;莊穎;趙紅;張鼎;;膽固醇誘導內皮細胞凋亡及抑制細胞增殖的實驗研究[J];癌變.畸變.突變;2007年06期

8 杜牡丹;宋旭紅;劉戈飛;梁斌;張巧霞;李蕊;謝健平;甘雪瓊;黃東陽;;抗兔輔酶Ⅱ依賴性視黃醇脫氫/還原酶單克隆抗體的制備和鑒定[J];癌變.畸變.突變;2008年03期

9 張銘清;;中華補血草黃酮抑制白血病細胞增殖的初探[J];安徽農學通報(上半月刊);2011年01期

10 李有文;魏風;郭志儒;陳創(chuàng)夫;;山羊痘病毒培養(yǎng)及其細胞病變觀察研究[J];安徽農業(yè)科學;2009年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郝冬海;曹珂;劉檢;張予陽;;細胞損傷模型在化合物抗腦缺血活性篩選中的應用[A];2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

2 洪勝輝;張軍;張蕊;王來娣;邵丹;張宜輝;董飚;段修軍;龔道清;;鵝原代肝細胞的簡易、高純分離及培養(yǎng)[A];安全優(yōu)質的家禽生產——第十五次全國家禽學術討論會論文集[C];2011年

3 李忠秋;孫金艷;馬紅;郭鎮(zhèn)華;吳賽輝;彭福剛;;成年種公牛耳皮成纖維細胞的分離與培養(yǎng)[A];首屆中國奶業(yè)大會論文集(上冊)[C];2010年

4 王德文;王煒;左紅艷;姚華;常公民;王瑞娟;高亞兵;王水明;董波;張志毅;彭瑞云;;不同波段電磁輻射對淋巴細胞的損傷效應[A];第十二屆中國體視學與圖像分析學術會議論文集[C];2008年

5 路廣林;郝鈺;董建勛;鄭宏;陳淑長;黃啟福;;溫脈通抑制血管平滑肌細胞增殖、遷移作用的實驗研究[A];第三屆全國中醫(yī)藥免疫學術研討會論文匯編[C];2006年

6 陳磊;凌沛學;張?zhí)烀?;硫酸軟骨素對兔軟骨細胞體外培養(yǎng)的影響[A];2009年中國藥學大會暨第九屆中國藥師周論文集[C];2009年

7 陳磊;凌沛學;張?zhí)烀?;硫酸軟骨素對兔軟骨細胞體外培養(yǎng)的影響[A];2010年中國藥學大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

8 李英;馬勇江;許麗娜;張媛;李玉谷;;不同培養(yǎng)體系對小鼠胸腺上皮細胞體外培養(yǎng)的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十五次學術研討會論文集[C];2008年

9 司紅麗;王建娜;胡延春;王建華;;狗舌草總黃酮對L_(1210)細胞的體外作用研究[A];紀念中國畜牧獸醫(yī)學會中獸醫(yī)學分會成立30周年中國畜牧獸醫(yī)學會中獸醫(yī)學分會2009年學術年會、華東區(qū)第十九次中獸醫(yī)科研協(xié)作與學術研討會論文集[C];2009年

10 王金果;涂健;趙德明;;酸化條件對偽狂犬病毒清除效果的檢測[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2010年學術年會——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集(下冊)[C];2010年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李坤寅;橘荔散結丸有效部位對子宮肌瘤細胞增殖、凋亡及相關因子表達的影響[D];湖南中醫(yī)藥大學;2010年

2 鐘興;hNIS轉染鼻咽癌介導放射性核素顯像和治療的實驗研究[D];暨南大學;2010年

3 袁慧星;構建saRNA激活大鼠陰莖海綿體平滑肌細胞iNOS基因表達治療ED的體外實驗研究[D];華中科技大學;2011年

4 譚琦;加味丹參飲誘導骨髓間充質干細胞分化為心肌樣細胞的研究[D];湖南中醫(yī)藥大學;2011年

5 張銘杰;成人MSCs體外定向成骨分化及激素性股骨頭壞死MSCs活性研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2011年

6 關永格;子宮腺肌病中醫(yī)證型分布與化瘀止痛方及其拆方的干預機制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2011年

7 袁爍;化瘀消ve殺胚法對輸卵管妊娠影響的臨床與實驗研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2011年

8 周仕軼;腫節(jié)風對人前列腺癌DU-145細胞PI3K/Akt/mTOR信號傳導通路的影響[D];成都中醫(yī)藥大學;2011年

9 張東;轉fat-1基因體細胞克隆綿羊的研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2011年

10 趙麗;三種重金屬單抗的制備與抗體基因序列分析及其免疫檢測方法的建立[D];內蒙古農業(yè)大學;2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 施六霞;富血小板血漿對不同條件下人牙周膜成纖維細胞功能的影響[D];南京醫(yī)科大學;2010年

2 謝鵬;脂多糖、多巴胺對凡納濱對蝦血細胞作用機制的研究[D];中國海洋大學;2010年

3 張賀佳;三種正畸用鎳鈦記憶合金絲細胞毒性的試驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2010年

4 徐佳麗;白首烏總苷A（CGA）酸水解產物的抗腫瘤作用研究[D];浙江中醫(yī)藥大學;2010年

5 王代憲;負載BMP與VEGF的PDLLA組織工程材料修復兔橈骨缺損的實驗研究[D];泰山醫(yī)學院;2007年

6 王麗潔;凝血因子Ⅶ檢測試劑的研制[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2010年

7 高越穎;王不留行抑制血管新生有效部位的提取分離及其活性評價[D];江南大學;2010年

8 劉莉娜;遠志與厚樸配伍對小鼠Cajal間質細胞的影響[D];成都中醫(yī)藥大學;2010年

9 張立靜;TEM1型β-內酰胺酶免疫膠體金層析檢測方法的建立[D];河北農業(yè)大學;2011年

10 肖顏顏;富硒大麥苗生物學功能的研究[D];魯東大學;2011年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 任芳麗,李煜,張涌;牛皮膚成纖維細胞的體外培養(yǎng)與凍存[J];黃牛雜志;2002年01期

2 楊震;簡月奎;安榮澤;敖俊;王兆杰;;SD大鼠脂肪干細胞的體外分離培養(yǎng)及實驗研究[J];貴州醫(yī)藥;2008年05期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱艷霞;劉天慶;宋克東;馬學虎;崔占峰;;心肌樣微環(huán)境誘導脂肪干細胞分化的研究[J];生物化學與生物物理進展;2009年05期

2 何旭;楊旭芳;張麗紅;何牮;高云鶴;譚小華;李玉林;;人脂肪干細胞的形態(tài)學特征[J];生物醫(yī)學工程學雜志;2011年02期

3 王嬋;戴應;郭永龍;楊艷;劉慶;陳建蘇;;脂肪干細胞的三維球形培養(yǎng)[J];中國組織工程研究;2014年06期

4 姜麗麗;劉天慶;宋克東;關水;李香琴;葛丹;;脂肪干細胞生長特性研究[J];高�；瘜W工程學報;2014年02期

5 陳崎;彭智;;脂肪干細胞在骨、軟骨組織工程中的研究進展[J];中國民族民間醫(yī)藥;2009年14期

6 鄧騫;;脂肪干細胞探源[J];科技智囊;2013年08期

7 呂春燕;陳高莉;楊玲;陳昌金;袁慧;楊雪梅;;大鼠脂肪干細胞分離培養(yǎng)及細胞表型的研究[J];海南醫(yī)學;2014年09期

8 龔鍇;韋玉軍;劉玲玲;王干;趙南明;張秀芳;公衍道;;體外培養(yǎng)神經細胞環(huán)境誘導脂肪干細胞向神經方向的分化[J];生物物理學報;2009年S1期

9 張s，

本文編號：519781