本文關(guān)鍵詞：人促卵泡激素體外生物學(xué)活性測定方法的建立

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【摘要】：目的:建立人促卵泡激素(FSH)體外生物學(xué)活性檢測方法,并對方法進(jìn)行驗(yàn)證。方法:以人卵巢顆粒細(xì)胞KGN為基質(zhì)細(xì)胞,用不同濃度的FSH與KGN細(xì)胞表面的FSH受體結(jié)合,刺激細(xì)胞產(chǎn)生不同濃度的孕酮,通過測定細(xì)胞培養(yǎng)上清中的孕酮含量來評價FSH的生物學(xué)活性,結(jié)果用國際標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校正;對方法的專屬性、線性與范圍、回收率、精密度、耐用性進(jìn)行驗(yàn)證;對市售FSH產(chǎn)品進(jìn)行檢測,并與傳統(tǒng)動物體內(nèi)活性檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果:KGN細(xì)胞對FSH有很好的劑量反應(yīng)關(guān)系,方法專屬性符合要求;線性范圍為0.1~200 ng/m L,相關(guān)系數(shù)R2≥0.99;回收率為80%~120%;經(jīng)3次重復(fù)測定,3批市售樣品和3批自制樣品的活性分別為(13.4±0.4)~(13.5±0.8)和(12.9±0.7)~(14.3±1.2)IU/μg,變異系數(shù)在15%之內(nèi);結(jié)果顯示該方法有很好的耐用性。測定3批市售重組人FSH產(chǎn)品和1批尿源FSH國家標(biāo)準(zhǔn)品,其體外活性測定結(jié)果與傳統(tǒng)動物體內(nèi)活性測定結(jié)果一致。結(jié)論:建立并驗(yàn)證了一種利用KGN細(xì)胞體外測定FSH生物學(xué)活性的方法,有望代替?zhèn)鹘y(tǒng)的動物體內(nèi)活性測定方法,可用于FSH的生物學(xué)活性評價和質(zhì)量控制。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所;北京泰德制藥股份有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 人促卵泡激素 人卵巢顆粒細(xì)胞 體外細(xì)胞生物學(xué)活性 卵巢增重法 孕酮含量
【分類號】：R321
【正文快照】： FSH)是一種治療女性不孕的重要藥物,主要用于治療女性無排卵性不孕癥、控制性卵巢刺激和輔助生殖技術(shù)等。FSH是一個異源二聚體的糖蛋白激素,由垂體前葉產(chǎn)生,相對分子質(zhì)量約30×103。FSH由一個α亞基和一個β亞基經(jīng)非共價鍵連接[1],其中α亞基與其他糖蛋白激素如促甲狀腺素(thy

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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5 秦藝e，

本文編號：515471